【正文】 實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣 污染衣服 背面開口 罩在日常服裝外 塑料圍裙 污染衣服 防水 鞋襪 碰撞和噴濺 不露腳趾 護(hù)目鏡 碰撞和噴濺 防碰撞鏡片（必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡） 側(cè)面有護(hù)罩 安全眼鏡 碰撞 防碰撞鏡片（必須有視力校正） 側(cè)面有護(hù)罩 面罩 碰撞和噴濺 罩住整個(gè)面部 發(fā)生意外時(shí)易于取下 防毒面具 吸入氣溶膠 在設(shè)計(jì)上包括一次性使用的、整 個(gè)面部或一半面部空氣凈化的、 整個(gè)面部或加罩的動(dòng)力空氣凈化 （ powered air purifying， PAPR） 的以及供氣的防毒面具 手套 直接接觸微生物 劃破 得到微生物學(xué)認(rèn)可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚腈類材料 網(wǎng)孔結(jié)構(gòu) 一級(jí)和二級(jí)生物安全水平 安全指南 主要 內(nèi) 容 ? 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施 ? 實(shí)驗(yàn)室的基本規(guī)范 ? 健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測 ? 培訓(xùn) ? 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備 ? 檢測過程安全防護(hù) ? 廢棄物處理 一、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施 ? 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室和安排某些類型的實(shí)驗(yàn)工作時(shí)，對(duì)于那些可能造成安全問題的情況要加以特別關(guān)注，這些情況包括： ? 氣溶膠的形成 ? 處理大容量和 ∕ 或高濃度微生物 ? 儀器設(shè)備過度擁擠和過多 ? 嚙齒動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物的侵?jǐn)_ ? 未經(jīng)允許人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 ? 工作流程：一些特殊標(biāo)本和試劑的使用。 門保持關(guān)閉并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。 二、實(shí)驗(yàn)室的基本規(guī)范 ? BSLⅠ 和 BSLⅡ 實(shí)驗(yàn)室： ? 1．進(jìn)入規(guī)定 ? 2．工作人員的防護(hù)要求 ? 3. 有關(guān)安全操作 ? 4. 實(shí)驗(yàn)室工作區(qū) ? 5. 生物安全管理 ? 1. 進(jìn)入規(guī)定 ? 在處理危險(xiǎn)度 2 級(jí)或更高危險(xiǎn)度級(jí)別的微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志（圖 1）。 ? 實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。 ? 進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過特別批準(zhǔn)。 ? 在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，任何時(shí)候都必須穿著連體衣、隔離服或工作服。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。 ? 為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護(hù)設(shè)備。 ? 不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。 ? 禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。 ? 嚴(yán)禁用口吸移液管。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。 ? 應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。 ? 出現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。 ? 必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。根據(jù)所處理的微生物因子的危險(xiǎn)度評(píng)估結(jié)果，可能需要準(zhǔn)備污水處理系統(tǒng)。 4. 實(shí)驗(yàn)室工作區(qū) ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。 ? 所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。 ? 如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入的紗窗。 ? 實(shí)驗(yàn)室主管（向?qū)嶒?yàn)室主任匯報(bào)）應(yīng)當(dāng)保證提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)室主管應(yīng)當(dāng)確保所有實(shí)驗(yàn)室人員都了解這些要求。 ? 應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的控制方案。 三、健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測 ? 主管機(jī)構(gòu)有責(zé)任通過實(shí)驗(yàn)室主任來確保實(shí)驗(yàn)室全體工作人員接受適當(dāng)?shù)慕】当O(jiān)測。為達(dá)到這些目的，應(yīng)進(jìn)行如下工作： ? 根據(jù)需要提供主動(dòng)或被動(dòng)免疫（工作人員的免疫接種） ? 促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室感染的早期檢測 ? 應(yīng)禁止高度易感人群（如孕婦或免疫損傷人員）在高危險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)室中工作 ? 提供有效的個(gè)體防護(hù)裝備和方法。但理想的做法是，所有實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)進(jìn)行上崗前的體檢，并記錄其病史。 ? 在二級(jí)生物安全水平操作微生物的實(shí)驗(yàn)室工作人員的監(jiān)測指南： ? 必須有錄用前或上崗前的體檢。 ? 實(shí)驗(yàn)室管理人員要保存工作人員的疾病和缺勤記錄。保護(hù)胎兒的正確措施因婦女可能接觸的微生物而異。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織 ,熟悉實(shí)驗(yàn)室工作和操作規(guī)范的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。 培訓(xùn)的實(shí)施細(xì)則 ? 1. 理論培訓(xùn) : ? (l) 培訓(xùn)目標(biāo) : ① 熟悉本實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度和操作規(guī)范 ,形成初步的實(shí)驗(yàn)室工作概念。 ? (2) 培訓(xùn)方式 : 講解。②實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)規(guī)章制度和生物安全管理手冊(cè)。書面考試注重其掌握的準(zhǔn)確程度 ,面試主要測試其熟練程度和靈活應(yīng)變能力。 培訓(xùn)的實(shí)施細(xì)則 ? 2. 常規(guī)技能培訓(xùn) : (l) 培訓(xùn)目標(biāo) : ① 熟練基本實(shí)驗(yàn)操作和儀器的使用；②初步培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基本觀念和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。 (3) 培訓(xùn)內(nèi)容 : ① 衛(wèi)生打掃 : 實(shí)驗(yàn)室地面、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、超凈臺(tái)面、垃圾處理以及打掃得先后順序；工作休息區(qū)的衛(wèi)生打掃。 ③ 小型儀器的使用：微量移液器和移液管的使用、 pH計(jì)和試紙、天平、混勻器、微波爐、電磁爐、水浴鍋等。 ⑤大型儀器的使用 : 普通冰箱和低溫冰箱 (存放和處理樣品 )、 高壓鍋、離心機(jī)、液氮罐、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、電泳設(shè)備、超凈臺(tái)、 PCR 儀、搖床、超聲破碎儀、顯微鏡等。 ⑦辦公用品使用的培訓(xùn) : 電話、傳真機(jī)、電腦、打印機(jī)等。應(yīng)盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。 基本生物安全設(shè)備 ? 移液輔助器 —— 避免用口吸的方式移液。 ? 生物安全柜，在以下情況使用： ? —— 處理感染性物質(zhì)；如果使用密封的安全離心杯，并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣，則這類材料可在開放實(shí)驗(yàn)室離心 ? —— 空氣傳播感染的危險(xiǎn)增大時(shí) ? —— 進(jìn)行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(shí)（包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動(dòng)、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動(dòng)物鼻腔接種以及從動(dòng)物或卵胚采集感染性組織）。 ? 螺口蓋試管及瓶子。 ? 一次性巴斯德塑料移液管，盡量避免使用玻璃制品。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。 ? I級(jí)能夠保護(hù)工作人員和周圍環(huán)境，但不能切實(shí)保護(hù)操作樣本，因此生物安全柜 I級(jí)不能用于食品微生物檢驗(yàn)的無菌操作。 ? III級(jí)生物安全柜則可提供更高級(jí)別的生物安全保護(hù)。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以吸收可能濺出的液滴； （ 6）耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及移液適宜于盛放盤不應(yīng)放在生物安全柜的外面；（ 7）在工作臺(tái)面上的操作應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行； （ 8）在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火，可使用電熱式接種環(huán)滅菌器，最好使用一次性無菌接種環(huán)； （ 9）盡可能避免雙臂頻繁進(jìn)出生物安全柜，否則會(huì)干擾空氣屏障的完全性，影響防護(hù)； （ 10）一旦發(fā)生生物學(xué)危害物品溢出，應(yīng)在生物安全柜運(yùn)行狀態(tài)下清理，使用有效的消毒劑，盡可能減少氣溶膠，所有接觸溢出的物品都要進(jìn)行消毒或高壓滅菌。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)（ 3） ? 離心機(jī) 離心機(jī)是最常用的實(shí)驗(yàn)室儀器，最易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室污染。 (1)在使用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)時(shí)，儀器良好的機(jī)械性能是保障微生物安全的前提條件。 (3)離心機(jī)放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個(gè)子工作人員也能夠看到離心機(jī)內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶。 (5)用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊 (最好使用螺旋蓋 )。 (7)離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對(duì)，并在裝載離心管后正確平衡。 (9)空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或乙醇 (異丙醇， 7 O％ )來平衡。 (11)當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時(shí)，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會(huì)導(dǎo)致漏液。如污染明顯，應(yīng)重新評(píng)估離心操作規(guī)范。 (1 4)每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。 (1 6) 良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護(hù)，以防止感染性氣溶膠和可擴(kuò)散粒子的產(chǎn)生。 (2)所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。 (4)感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。 (6)刻度對(duì)應(yīng) (mark— to— mark)移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時(shí)間后再進(jìn)行處理。 (9)有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。 (11)為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散，在工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。最好使用不需要進(jìn)行消毒的一次性接種