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正文內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)室安全基礎(chǔ)知識(shí)-文庫(kù)吧資料

2025-02-24 14:24本頁(yè)面
  

【正文】 的沙門氏菌屬為例,其屬于第三類病原微生物,實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別為二級(jí)。 ? 實(shí)驗(yàn)室菌種的安全要求: 菌株的生物危害程度應(yīng)與保藏實(shí)驗(yàn)室生物防護(hù)水平相適應(yīng),實(shí)驗(yàn)室的裝備和管理應(yīng)符合 《 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例 》 和 GB 19489《 實(shí)驗(yàn)室 生物安全通用要求 》 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定菌種使用、保藏管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程,應(yīng)涵蓋菌種申購(gòu)、保管、使用、傳代、存儲(chǔ)等諸方面。 (1O)應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒(méi)有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。最好在“最大”裝載時(shí)用熱偶計(jì)和記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測(cè),以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。 (7)即使溫度下降到 80℃ 以下,操作者打開門時(shí)也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥?lái)進(jìn)行防護(hù)。 (5)當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí),互鎖安全裝置可以防止門被打開,而沒(méi)有互鎖裝置的高壓滅菌器,應(yīng)當(dāng)關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到 80℃ 以下時(shí)再打開門。 (3)應(yīng)使用飽和蒸氣,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品,這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 7) ? 高壓滅菌器和滅菌消毒設(shè)備 (1)應(yīng)由受過(guò)良好培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)高壓滅菌器的操作和日常維護(hù)。 (4)除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。冰箱內(nèi)物品放置應(yīng)規(guī)范。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 6) ? 冰箱與冰柜 (1)冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔,應(yīng)清理出所有在儲(chǔ)存過(guò)程中破碎的安瓿和試管等物品。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 5) ? 接種環(huán) 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),能夠避免在酒精燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。 (1O)在打開隔膜封口的瓶子時(shí),應(yīng)使用可以使用移液管的工具,而避免使用皮下注射針頭和注射器。 (8)盛放廢棄移液管的容器不能放在外面,應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。 (7)污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。 (5)不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。 (3)不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 4) ? 移液管、移液器 (1)應(yīng)使用移液設(shè)備,嚴(yán)禁用口吸取。 (1 5)使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。 (1 3)應(yīng)當(dāng)檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。 (1 2)應(yīng)當(dāng)檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。 (1 O)對(duì)于危險(xiǎn)度 3級(jí)和 4級(jí)的微生物,必須使用可封口的離心桶 (安全杯 )。 (8)操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 (6)離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。 (4)離心管和盛放離心標(biāo)本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成,或最好為塑料制品,并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。 (2)應(yīng)按照操作手冊(cè)來(lái)操作離心機(jī)。掌握正確的離心機(jī)使用技術(shù)十分重要。 ( 11)每年應(yīng)對(duì)生物安全防護(hù)效果進(jìn)行測(cè)試,定期維護(hù)。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 2) ? 生物安全柜使用要點(diǎn): ( 1)使用者應(yīng)熟知生物安全柜的使用方法和局限性; ( 2)使用前后,工作臺(tái)面和內(nèi)壁要用消毒劑擦拭消毒,生物安全柜風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行 5min完成凈化后使用; ( 3)使用中不能打開玻璃觀察檔板,應(yīng)穿個(gè)體防護(hù)服; ( 4)生物安全柜內(nèi)盡量少放置器材或標(biāo)本、不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán); ( 5)放入生物安全柜的物品應(yīng)采用 70%酒精來(lái)清除表面污染。 ? II級(jí)生物安全柜在設(shè)計(jì)上不但能提供個(gè)體防護(hù),而且能保護(hù)工作臺(tái)面的物品不受空氣的污染,其有四種不同的類型( A A B1和 B2型),可用于操作危險(xiǎn)度II級(jí)和 III級(jí)的感染性物質(zhì)。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)( 1) ? 生物安全柜分為 I、 II、 III個(gè)不同等級(jí)。 ? 在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進(jìn)行驗(yàn)收。 ? 用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當(dāng)工具。 ? 一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以減少生成氣溶膠。有不同設(shè)計(jì)的多種產(chǎn)品可供使用。 ? 需要詳細(xì)咨詢?cè)O(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格,以確保設(shè)施具備必要的安全特性。 五、 實(shí)驗(yàn) 室 設(shè)備 ? 選擇設(shè)備時(shí)應(yīng)符合一些基本原則,即: ? 在設(shè)計(jì)上應(yīng)能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸 ? 建筑材料應(yīng)防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求 ? 設(shè)備裝配后應(yīng)無(wú)毛刺、銳角以及易松動(dòng)的部件 ? 設(shè)備的設(shè)計(jì)、建造與安裝應(yīng)便于操作、易于維護(hù)、清潔、清除污染和進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。 ⑥消毒和滅菌方法 : 物理滅菌(紫外、過(guò)濾、灼燒、高壓 )法、化學(xué)滅菌 (熏蒸、酒精、消毒液 ) 法等。 ④玻璃儀器的清洗 : 量筒、燒杯、三角瓶等。 ②實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作技術(shù) :包括無(wú)菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌(毒)種保存等。 (2) 培訓(xùn)方式 : 現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)??己吮竞细裾唔氈匦聦W(xué)習(xí) ,不能進(jìn)入下一步的培訓(xùn)。 ? (4) 考核 : 由本實(shí)驗(yàn)室三位工作人員組織對(duì)理論學(xué)習(xí)的書面考試和面試工作。 ? (3) 培訓(xùn)內(nèi)容 : ① 本實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)成文的規(guī)章制度 :生物安全防護(hù)、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購(gòu)制度、儀器使用制度等。②了解本實(shí)驗(yàn)室從事工作的特點(diǎn)以及各種微生物的危害評(píng)估文件。培訓(xùn)內(nèi)容包括 : ? 1. 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)定、自身防護(hù)的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定 ; ? 2. 實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)儀器裝備的使用方法; ? 3. 正確的著裝方法; ? 4. 微生物學(xué)操作基本技術(shù)及無(wú)菌操作方法; ? 5. 實(shí)驗(yàn)室清潔及消毒方法; ? 6. 意外事故處理方法; ? 7. 國(guó)內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。 四、培訓(xùn) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn) , 方能取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。 ? 育齡期婦女應(yīng)知道某些微生物(如風(fēng)疹病毒)的職業(yè)暴露對(duì)未出生孩子的危害。記錄個(gè)人病史,并進(jìn)行一次有目的的職業(yè)健康評(píng)估。疾病和實(shí)驗(yàn)室意外事故應(yīng)迅速報(bào)告,所有工作人員都應(yīng)意識(shí)到應(yīng)用規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)的重要性。 在一級(jí)生物安全水平操作微生物的實(shí)驗(yàn)室工作人員的監(jiān)測(cè)指南: ? 歷史證據(jù)表明,在一級(jí)生物安全水平操作的微生物不太可能引起人類疾病或獸醫(yī)學(xué)意義的動(dòng)物疾病。監(jiān)測(cè)的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。 ? 如有必要,應(yīng)為所有實(shí)驗(yàn)室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)和治療,并應(yīng)妥善保存相應(yīng)的醫(yī)學(xué)記錄。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊(cè)。 ? 要將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員,同時(shí)要求他們閱讀生物安全或操作手冊(cè),并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作和規(guī)程。 5. 生物安全管理 ? 實(shí)驗(yàn)室主任(對(duì)實(shí)驗(yàn)室直接負(fù)責(zé)的人員)負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及安全或操作手冊(cè)。 ? 在進(jìn)行包裝和運(yùn)輸時(shí)必須遵循國(guó)家和 ∕ 或國(guó)際的相關(guān)規(guī)定。 ? 發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后,都必須清除工作臺(tái)面的污染。 ? 需要帶出實(shí)驗(yàn)室的手寫文件必須保證在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒(méi)有受到污染。 ? 污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染(采用化學(xué)或物理學(xué)方法)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存這些事件或事故的書面報(bào)告。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液,皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。 ? 所有的技術(shù)操作要按盡量減少氣溶膠和微小液滴形成的方式來(lái)進(jìn)行。 ? 嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。 ? 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。 ? 禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。 ? 嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室,(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間)。 ? 在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后,以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前,都必須洗手。 ? 在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí),應(yīng)戴上合適的手套。 ? 與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。 ? 兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。 ? 只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。潛在被污染的廢棄物同普通廢棄物隔開。 ? 設(shè)施和
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