【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】
ll to acquire a new phenotype. ( exogenous外源的; phenotype形態(tài) ) 167。 2 Transformation轉(zhuǎn)化 DNATransformation Transformation experiment of Streptococcus pneumoniae Transduction is the transfer of DNA fragments from one bacterium to another bacterium by a bacteriophage. ( exogenous外源的; phenotype形態(tài) ) 167。 3 Transduction轉(zhuǎn)導(dǎo) Transduction 1. RecA蛋白是一個(gè) 39kDa的單肽鏈 , 是同源重組過(guò)程中最重要的蛋白質(zhì) , 也叫重組酶(rebinase) 2. 作用:促進(jìn)同源 DNA聯(lián)會(huì)和促進(jìn) DNA分子間的單鏈交換 二、同源重組的酶學(xué)機(jī)制 ① 單鏈 DNA結(jié)合活性 ② 雙鏈 DNA結(jié)合活性 ③ NTP酶活性 ④ 促進(jìn)互補(bǔ)單鏈復(fù)性的能力 RecA蛋白在同源重組的具體作用分為 3個(gè)階段 : 1. RecA的第一個(gè) DNA結(jié)合位點(diǎn)(初級(jí)位點(diǎn))與單鏈 DNA結(jié)合,包被 DNA,形成蛋白質(zhì) DNA絲狀復(fù)合物; 2. RecA的第二個(gè) DNA結(jié)合位點(diǎn)(次級(jí)位點(diǎn))與 1個(gè)雙鏈 DNA分子結(jié)合,形成三鏈 DNA中間體,隨后單鏈 DNA侵入雙鏈 DNA,尋找同源序列; 3. RecA催化鏈交換,由被 RecA包被的單鏈 DNA從 5′→3′ 方向取代雙鏈 DNA分子之中的同源舊鏈,形成異源雙鏈,并發(fā)生分叉遷移 RecA蛋白促進(jìn) 2個(gè)雙鏈DNA分子鏈之間的交換 RecA蛋白促進(jìn)單鏈 DNA與雙鏈DNA進(jìn)行鏈交換 RecA蛋白單體的三維結(jié)構(gòu)模型 RecBCD蛋白 : 1. 由 RecB、 RecC和 RecD三個(gè)亞基組成。 2. 具有 5種酶的活性 —— 外切核酸酶 V、解鏈酶、核酸內(nèi)切酶、 ATP酶和單鏈 DNA外切酶 ; 3. RecBCD蛋白參與細(xì)胞內(nèi)的 RecBCD同源重組途徑 ——首先它與雙鏈 DNA分子自由末端結(jié)合,依靠其外切核酸酶 V的活性同時(shí)降解 DNA的 2條鏈,然而,一旦遇到chi( χ)序列, RecD亞基就從復(fù)合物中釋放出來(lái),留下來(lái)的 RecBC蛋白開(kāi)始以解鏈酶的活性發(fā)揮作用,在水解 ATP的同時(shí),解開(kāi) DNA雙鏈,產(chǎn)生單鏈 DNA,為RecA發(fā)揮作用鋪平道路,最終起動(dòng)了鏈交換和重組反應(yīng) RecBCD蛋白的作用模型 RecF途徑 : 這主要是質(zhì)粒之間進(jìn)行重組的途徑,需要的蛋白質(zhì)有 RecA、 RecJ、 RecN、 RecO、RecQ和 Ruv等 Sitespecific rebination occurs at a specific DNA sequence. 位點(diǎn)特異性重組發(fā)生在 兩條 DNA的 特異位點(diǎn) 上 。 The first example was found in the integration between lDNA and E. coli DNA. Section 3 Sitespecific Rebination 位點(diǎn)特異性重組 λDNA integration λ噬菌體的位點(diǎn)特異性整合 Transposition is the movement of specific pieces of