藥敏試驗的質(zhì)量控制培訓課件(編輯修改稿)
2025-02-09 02:11 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 懸液的濁度到 。 試驗操作 ? 接種平板： ? 調(diào)整好濁度的菌懸液最好在 15min內(nèi)將無菌棉簽浸取，同時在管壁上出去棉簽上多余的液體 ? 用拭子劃線整個瓊脂表面，接種于表面干燥的MHA平板上，每次旋轉(zhuǎn)平板約 60176。 ，以確保每次接種均勻分布，最后在瓊脂平板的邊緣涂抹一圈 ? 蓋子可半開 35min，但不可超過 15min，以便放置藥敏紙片前，使瓊脂吸收表面多余的水分 試驗操作 ? 放置紙片： – 將預先設(shè)定好并已經(jīng)平衡至溫度的藥敏紙片分置在已接種細菌的瓊脂表面 – 每個紙片必須壓下以確保與瓊脂表面完全接觸。無論是單獨放置或使用紙片分配設(shè)備，紙片必須分布均勻，兩紙片圓心的距離不少于 24mm – 最好在預期的產(chǎn)生小的抑菌環(huán)的紙片旁邊放置產(chǎn)生大的抑菌環(huán)的紙片，以避免重疊區(qū) – 紙片距離瓊脂邊緣的距離同樣重要，如果太靠近邊緣，抑菌環(huán)可能不完整，建議距離平板邊緣 15mm。 – 藥敏紙片一旦與瓊脂表面接觸，就不可再移動 – 放置紙片后 15min內(nèi)倒置平板進行培養(yǎng) 試驗操作 ? 孵育溫度：（ 35 177。 2） ℃ ? 孵育條件：除嗜血桿菌、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌和鏈球菌外，孵育不需要 CO2 ? CO2濃度變化會顯著改變一些藥物的抑菌環(huán)大小 ? 孵育時間： 1618h ? 測試 苯唑西林或萬古霉素對葡萄球菌屬，或萬古霉素對腸球菌屬的敏感性，孵育時間必須達到 24h 細菌 接種物準備方法 接種培養(yǎng)基 紙片數(shù)量 培養(yǎng)溫度 (℃ ) 5%CO2 培養(yǎng)時間（小時） 100mm 150mm 一般需氧菌 直接菌落懸浮法，生長法 MHA 5 12 35177。 2 不需要 1618 肺炎鏈球菌和其他鏈球菌 直接菌落懸浮法 5%羊血MHA 4 9 35177。 2，不超過37 需要 2024 流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌 直接菌落懸浮法 含 SR158因子的HTM 4 9 35177。 2 需要 1618 腦膜炎奈瑟菌 直接菌落懸浮法 5%羊血MHA 2 5 35177。 2，不超過37 需要 2024 淋病奈瑟菌 直接菌落懸浮法 GC瓊脂基質(zhì) +1%規(guī)定的生長添加物 4 9 36177。 1，不超過37 需要 1618 平板結(jié)果判讀 ? 培養(yǎng)后的平板觀察 ? 細菌的涂布是否滿意 ? 接種是否正確 ? 產(chǎn)生的抑菌環(huán)是否均勻為圓形 ? 菌苔是否融合生長 ○ 如果可見單個菌落，說明接種量過稀，必須重復試驗 平板結(jié)果判讀 ? 測量方法： ? 用肉眼判讀，測量完全抑制區(qū)的直徑，包括紙片的直徑 ? 采用游標卡或尺子在培養(yǎng)基的背面測量 ? 將培養(yǎng)基放在一個黑色不反光的背景上，并用反射光觀察 ? 如使用血平板，應除去蓋子并用反射光照射，在瓊脂的上方測量抑菌環(huán) 抑菌圈直徑閱讀 — 游標卡尺 抑菌圈直徑閱讀 — 直尺 平板結(jié)果判讀 ? 測量直徑 – 沒有肉眼可見的明顯的生長區(qū)即可認為抑菌圈邊緣。只能在放大鏡下觀察到的細小菌落忽略不計。 – 在一個明顯抑菌環(huán)內(nèi)有分散的菌落生長時，應該從原始菌落移種后重新測試。如分散的菌落依然在抑菌環(huán)內(nèi)生長，則應測量無菌落的抑菌環(huán)內(nèi)徑。 – 變形桿菌屬細菌可遷徙生長到某種抗菌藥物抑菌環(huán)內(nèi)，忽略明顯的抑菌環(huán)內(nèi)薄紗樣遷徙生長。 – 測量血平板上的抑菌環(huán)時，測量的是生長抑菌圈，而不是溶血抑制圈。 – 測量含甲氧芐啶和磺胺類藥物的抑菌圈時，忽略少量生長，測量比較明顯的邊緣，以確定抑菌環(huán)的直徑。 細菌 藥敏紙片 孵育時間 觀察結(jié)果 金黃色葡萄球菌 苯唑西林和萬古霉素 24h 用透射光（平板舉向光源）來檢查明顯抑菌環(huán)內(nèi)有無耐藥菌落的少量生長，抑菌環(huán)內(nèi)任何區(qū)域出現(xiàn)可辨別的生長都判為苯唑西林或萬古霉素耐藥 頭孢西丁 161
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