14基因診斷與基因治療(編輯修改稿)
2025-02-01 23:58 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 60。正確2） 必要的調(diào)控元件（順式作用元件 啟動子、增強子、靜止子） 413） 外源基因進入細胞核轉(zhuǎn)錄，再轉(zhuǎn)移至細胞漿，間隔序 列（內(nèi)含子），剪接信號（ SA,SD） PolyA信號，核 內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子4） 翻譯的起始密碼子、終止密碼子、內(nèi)核糖體進入位點（ IRES）元件5） 外源基因的丟失、失活、甲基化 42基因治療的靶細胞（ targetcell）1） 生殖細胞全世界受嚴格控制2） 體細胞選擇的標(biāo)準：A、 容易取出和移植B、 容易體外培養(yǎng)C、 目的基因高效導(dǎo)入D、 細胞壽命長43常用靶細胞；自體、同種異體、異種、淋巴、骨髓、皮膚、肝、肌、腫瘤細胞等4445基因?qū)氲姆绞剑篹xvivo—— 體外將基因?qū)?targetcell,然后將此修飾過的細胞回輸給病人 。Invivo—— 外源基因直接導(dǎo)入體內(nèi)有關(guān)的組織器官。46? 基因?qū)耄ㄞD(zhuǎn)移）的工具與方法。將外源基因或 DNA片斷導(dǎo)入宿主細胞進行擴增或表達，需要有一個能在該宿主細胞進行復(fù)制和表達的載體（ vector）來攜帶。前者與后者在體外構(gòu)成重組 DNA分子，然后導(dǎo)入宿主細胞 。471）非病毒方法4849（一）磷酸鈣轉(zhuǎn)染技術(shù)磷酸鈣 DNA導(dǎo)入細胞吞噬體轉(zhuǎn)運細胞器瞬時 穩(wěn)定外源基因存在 外源基因非特異于染色體 DNA外 與宿主染色體 DNA重組12小時內(nèi)表達持續(xù)約 34天降解 穩(wěn)定轉(zhuǎn)化細胞株50（二） DEAE葡聚糖轉(zhuǎn)染技術(shù)（略） 51（三）脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法 （ 20% ）聚陽離子脂質(zhì)體 DNA脂質(zhì)體 DNA陽離子復(fù)合物負電荷的細胞膜吸收此復(fù)合物（融合吸收）優(yōu)點：簡便、低毒性、無免疫原性、無病毒產(chǎn)生、化學(xué)成分已知可大量商業(yè)供應(yīng)缺點：轉(zhuǎn)染效率低，短暫表達52（四）電穿孔轉(zhuǎn)染技術(shù)靶細胞（懸浮態(tài)） +外源目的 DNA電穿孔儀 高壓電脈沖靶細胞膜發(fā)生瞬時可逆性破裂形成微孔 外源目的 DNA進入靶細胞53（五）基因槍技術(shù)電子發(fā)射裝置或高壓氣流金或鎢顆粒包裹外源目的 DNA形成 “子彈”打入靶細胞54上述物理、化學(xué)方法轉(zhuǎn)移基因 的缺點：1） 轉(zhuǎn)移效率低，多應(yīng)用于實驗研究2） 維持時間短 病毒方法55 在以基因治療為目
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1