實驗室豬精液品質(zhì)檢測新技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-26 17:22 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 線粒體有無功能，丌能區(qū)別膜電位高低。 MITO在精子頭部有非特異性染色。 J C1 染色的特異性最好，僅在線粒體部位發(fā)黃色或綠色熒光。 精子運(yùn)動能力不線粒體的活性密切相關(guān)，整個精子代謝所需的能量主要由線粒體提供 精子線粒體檢測方法 檢測方法： 1. 熒光顯微鏡 2. 流式細(xì)胞儀 最適合的熒光染料：J C1 熒光顯微鏡檢測： a： R123染色，在精子頭部和尾部有非特異性染色，可檢測線粒體有無功能，不能區(qū)別膜電位高低。 b： J C1 染色，其特異性最好，僅在線粒體部位發(fā)黃色或綠色熒光。 c： MITO染色，在精子頭部有非特異性染色。 流式細(xì)胞儀檢測： A： R123/PI染色，箭頭指發(fā)綠色熒光精子； B： J C1 /PI染色，頂端箭頭指發(fā)橙色熒光精子；底端箭頭指發(fā)綠色熒光精子； C： MITO /PI染色，箭頭指發(fā)綠色熒光精子； AC，未被箭頭標(biāo)記的精子屬于死精子，被 PI標(biāo)記。 A B C 獲能和頂體檢測 頂體檢測 獲能檢測 精子膜的獲能狀態(tài)的改變很容易引起頂體反應(yīng)的提前發(fā)生，以及精子受精能力的喪失 1. 頂體反應(yīng)是精子成功穿入卵母細(xì)胞所必需的過程。 2. 頂體內(nèi)富含多種蛋白水解酶（頂體酶），在精子穿過卵子放射冠、透明帶等受精過程中發(fā)揮主要作用。 一 二 獲能檢測 采用金霉素（ CTC）進(jìn)行獲能檢測 CTC 進(jìn)入精子可以結(jié)合游離的鈣離子，這些 CTCCa2+ 復(fù)合物能夠結(jié)合在質(zhì)膜的疏水區(qū)并且在熒光顯微鏡下激發(fā)出黃綠色熒光 ① F型 ，整個精子頭部有均一熒光，為未獲能，頂體完整的精子； ② B型 ，精子頭部頂體后區(qū)，在靠近尾部的部分無熒光或非常弱的熒光，而頭前部為均一熒光，為獲能且頂體完整的精子； ③ AR型 ，整個精子頭部無熒光或非常弱的熒光，為頂體不完整的精子，即發(fā)生了頂體反應(yīng)的精子或頂體缺損的精子。 ① ② ③ 頂體檢測 A) A) H33342 標(biāo)記所有精子細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色熒光； B) PI標(biāo)記死精子的細(xì)胞核呈現(xiàn)紅色熒
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