實驗室豬精液品質檢測新技術-在線瀏覽
2025-02-09 17:22本頁面
【正文】 名稱 染色特性 優(yōu)缺點 R123 （ Rhodamine123） MITO （ MitoTracker Green FM） JC1 （ 5,539。tetrachloro1,1 39。tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide） 能滲透幵沉積在正常線粒體上發(fā)出綠色熒光。 MITO 在水溶液中丌發(fā)熒光，而當積聚在線粒體內時會發(fā)綠色熒光。 MITO在精子頭部有非特異性染色。 精子運動能力不線粒體的活性密切相關，整個精子代謝所需的能量主要由線粒體提供 精子線粒體檢測方法 檢測方法： 1. 熒光顯微鏡 2. 流式細胞儀 最適合的熒光染料：J C1 熒光顯微鏡檢測： a： R123染色，在精子頭部和尾部有非特異性染色，可檢測線粒體有無功能，不能區(qū)別膜電位高低。 c： MITO染色，在精子頭部有非特異性染色。 A B C 獲能和頂體檢測 頂體檢測 獲能檢測 精子膜的獲能狀態(tài)的改變很容易引起頂體反應的提前發(fā)生，以及精子受精能力的喪失 1. 頂體反應是精子成功穿入卵母細胞所必需的過程。 一 二 獲能檢測 采用金霉素（ CTC）進行獲能檢測 CTC 進入精子可以結合游離的鈣離子，這些 CTCCa2+ 復合物能夠結合在質膜的疏水區(qū)并且在熒光顯微鏡下激發(fā)出黃綠色熒光 ① F型 ，整個精子頭部有均一熒光，為未獲能，頂體完整的精子； ② B型 ，精子頭部頂體后區(qū)，在靠近尾部的部分無熒光或非常弱的熒光，而頭前部為均一熒光，為獲能且頂體完整的精子； ③ AR型 ，整個精子頭部無熒光或非常弱的熒光，為頂體不完整的精子，即發(fā)生了頂體反應的精子或頂體缺損的精子。 ?熒光顯微鏡下觀察精子的活力和頂體狀態(tài) B) C) ?流式細胞儀檢測精子的活力和頂體狀態(tài) A) 綠箭頭所指區(qū)域屬于 PI 標記精子，為死精子； B) 藍箭頭所指代表 FITCPNA 標記精子，為頂體反應精子； C) 黑箭頭所指代表未發(fā)生頂體反應活精子。 原理： DNA 的變性
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