基因工程的基本原理和技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-26 09:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用同種限制酶切割 二、 “分子縫合針” —— DNA連接酶 種類： 作用部位： 兩類 Ecoli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 是磷酸二酯鍵 （扶手） 不是氫鍵 （梯子） DNA連接酶 可把黏性末端 之間的縫隙“ 縫合 ”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個(gè)重組的 DNA分子就形成了。 DNA連接酶的作用過程 點(diǎn)擊播放 限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果，一種產(chǎn)生黏性末端，一種產(chǎn)生平末端。那么恢復(fù)它們的連接時(shí)，所用 DNA連接酶是否可以不加選擇？ 連接黏性末端 連接黏性末端和平末端 分類 作用 DNA連接酶 連接酶 T4DNA連接酶 DNA聚合酶 DNA連接酶 區(qū)別 1 區(qū)別 2 相同點(diǎn) ? DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎 ?為什么 ? 1)只能將 單個(gè)核苷酸 連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵 形成 磷酸二酯鍵 1)在 兩個(gè) DNA片段之間 形成磷酸二酯鍵 2)以 一條 DNA鏈為模板，將單個(gè)核苷酸 通過磷酸二酯鍵 連接成一條互補(bǔ)的 DNA鏈 2)將 DNA雙鏈上的 兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來，不需要模板 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 要讓一個(gè)從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，首先得將這個(gè)基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去！能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是 載體 。 基因工程的載體被喻為 ： 分子運(yùn)輸車 （三） “分子運(yùn)輸車” 基 因進(jìn)入受體細(xì)胞的載 體 學(xué)生活動(dòng)：閱讀 P70—P71討論完成下列內(nèi)容： 基因工程的載體來源？ 作 為基因工程的載體需要怎樣的條件呢？ 質(zhì)粒 噬菌體 動(dòng)植物病毒 最常用的運(yùn)載體 ——質(zhì)粒 分布：存在于許多 細(xì)菌 以及 酵母菌 等生物中。 最常用的質(zhì)粒是 大腸桿菌的質(zhì)粒 。 本質(zhì)：細(xì)胞染色體 (或擬核 )外 能自主復(fù)制 的小型 環(huán)狀 DNA分子。 質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成。 作為載體的必要條件 ? ? 能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá)； ? ? 能與目的基因結(jié)合 ? ? 便于觀察 ? 、易分離 ? 安全、比較容易得到 基因工程的基本操作程序主要包括 四個(gè)基本步驟： 1）目的基因的獲取 2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 4）目的基因的檢測與鑒定 基因工程的別名 操作環(huán)境 操作對象 操作水平 基本過程
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