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基因工程的基本原理和技術(編輯修改稿)

2025-01-26 09:24 本頁面
 

【文章內容簡介】 用同種限制酶切割 二、 “分子縫合針” —— DNA連接酶 種類: 作用部位: 兩類 Ecoli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 是磷酸二酯鍵 (扶手) 不是氫鍵 (梯子) DNA連接酶 可把黏性末端 之間的縫隙“ 縫合 ”起來,即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來,這樣一個重組的 DNA分子就形成了。 DNA連接酶的作用過程 點擊播放 限制酶切割后有兩種不同的結果,一種產生黏性末端,一種產生平末端。那么恢復它們的連接時,所用 DNA連接酶是否可以不加選擇? 連接黏性末端 連接黏性末端和平末端 分類 作用 DNA連接酶 連接酶 T4DNA連接酶 DNA聚合酶 DNA連接酶 區(qū)別 1 區(qū)別 2 相同點 ? DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎 ?為什么 ? 1)只能將 單個核苷酸 連接到已有的核酸片段上,形成磷酸二酯鍵 形成 磷酸二酯鍵 1)在 兩個 DNA片段之間 形成磷酸二酯鍵 2)以 一條 DNA鏈為模板,將單個核苷酸 通過磷酸二酯鍵 連接成一條互補的 DNA鏈 2)將 DNA雙鏈上的 兩個缺口同時連接起來,不需要模板 基因進入受體細胞的載體 要讓一個從甲生物細胞內取出來的基因在乙生物體內進行表達,首先得將這個基因送到乙生物的細胞內去!能將外源基因送入細胞的工具就是 載體 。 基因工程的載體被喻為 : 分子運輸車 (三) “分子運輸車” 基 因進入受體細胞的載 體 學生活動:閱讀 P70—P71討論完成下列內容: 基因工程的載體來源? 作 為基因工程的載體需要怎樣的條件呢? 質粒 噬菌體 動植物病毒 最常用的運載體 ——質粒 分布:存在于許多 細菌 以及 酵母菌 等生物中。 最常用的質粒是 大腸桿菌的質粒 。 本質:細胞染色體 (或擬核 )外 能自主復制 的小型 環(huán)狀 DNA分子。 質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用,但復制只能在宿主細胞內成。 作為載體的必要條件 ? ? 能進入受體生物細胞并在受體生物細胞內復制并表達; ? ? 能與目的基因結合 ? ? 便于觀察 ? 、易分離 ? 安全、比較容易得到 基因工程的基本操作程序主要包括 四個基本步驟: 1)目的基因的獲取 2)基因表達載體的構建 3)將目的基因導入受體細胞 4)目的基因的檢測與鑒定 基因工程的別名 操作環(huán)境 操作對象 操作水平 基本過程
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