梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷(編輯修改稿)
2025-01-26 05:19 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 準(zhǔn)化過程中的錯誤并增加其可讀性及重復(fù)性 由于該試驗(yàn)需有優(yōu)質(zhì)的熒光顯微鏡和技術(shù)熟練的操作人員才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果，故常不被臨床實(shí)驗(yàn)室作為常規(guī)方法開展 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（二） FTAABS IgG抗體陽性（ 400） FTAABS IgM抗體陽性（ 400） 梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（ TPHA） 原理： 用超聲裂解的梅毒螺旋體為抗原，致敏經(jīng)醛化、 鞣化的羊或禽類紅細(xì)胞，此致敏紅細(xì)胞與人血清 或血漿中的梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可觀 察的凝集反應(yīng) 優(yōu)點(diǎn)：該方法比 FTAABS易操作且穩(wěn)定性好，它的敏感 性除早期梅毒外與 FTAABS相似，對大樣本進(jìn)行 批量檢測時(shí)， TPHA也比 FTAABS易操作 不足：由于紅細(xì)胞具有生物活性，可能產(chǎn)生非特異性凝 集，且保存時(shí)間較短，批間差較大，故實(shí)際使用中 也存在一些問題 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（三） TPHA凝集圖像 梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（ TPPA） 原理： TPPA的原理與 TPHA基本相同，但它以人工合 成的惰性明膠顆粒代替 TPHA中的紅細(xì)胞作為載 體，是 TPHA的升級產(chǎn)品 優(yōu)點(diǎn)： 試劑穩(wěn)定，批間差小 結(jié)果判讀更為清晰明確 敏感性和特異性較 TPHA進(jìn)一步提高 不足：較難實(shí)現(xiàn)自動化，結(jié)果判定主觀 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（四） 明膠顆粒的制備 明 膠 阿拉伯膠 醋 酸 染料 /色素 偏 磷 酸 乙 醇 水 Φ 表面電荷 ~ 明膠顆粒（電鏡照片） 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（五） TPPA凝集圖像 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ TPELISA） 原理：以梅毒螺旋體抗原包被聚丙乙烯板，再加入待檢 血清以及酶標(biāo)記抗原，形成雙抗原夾心，同時(shí)檢 測 IgG和 IgM抗體。少數(shù)試劑采用間接法，使用 酶標(biāo)記抗人 IgG或 IgM，分開檢測 IgG或 IgM 優(yōu)點(diǎn)： 敏感性和特異性較高 價(jià)格較低，適合于對大量樣品的篩查 可實(shí)現(xiàn)操作的自動化、客觀化 不足： ELISA試劑盒品牌眾多，各家采用的抗原和工藝 不同，使敏感性和特異性產(chǎn)生較大的差異，臨床 實(shí)驗(yàn)室在選用 ELISA試劑前應(yīng)認(rèn)真進(jìn)行評估 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（五） 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測梅毒螺旋體 IgM抗體 原理： ELISA間接法或捕獲法，以捕獲法的敏感性和特 異性為佳。由于血液中 IgG 的量大大高于 IgM， 為避免交叉反應(yīng)所引起的假陽性，一般須對樣本 進(jìn)行預(yù)處理，先去除其中的 IgG 然后再進(jìn)行 IgM 測定。分離去除 IgG 的常用方法為柱層析法或免 疫沉淀法（沉淀劑為抗人 IgG等） 用途： 先天性梅毒的診斷 活動性梅毒（新近感染）的診斷及療效觀察 梅毒再感染的診斷 結(jié)果解釋： IgM陽性是先天性梅毒或活動性梅毒的重要證 據(jù)，但陰性結(jié)果并不能排除感染的可能性 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（六） 梅毒螺旋體化學(xué)發(fā)光免疫測定（ TPCLIA） 原理：目前以微孔板式的化學(xué)發(fā)光免疫測定最為常見，其原理與 ELISA方法基本相同，只是以化學(xué)發(fā)光底物取代了發(fā)色底物，檢測的信號則由光密度（ A值）變?yōu)楣庾訑?shù) 優(yōu)點(diǎn)：較之 ELISA方法，其分析 敏感性更低，可報(bào)告范圍更寬 不足：與 ELISA試劑盒的不足基本相同 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（七） 梅毒螺旋體快速檢測試驗(yàn) （ TPRT） 原理：雙抗原夾心免疫層析試驗(yàn)或間接法免疫滲濾試驗(yàn)， 多采用膠體金進(jìn)行標(biāo)記，同時(shí)檢測 IgG、 IgM抗體 （雙抗原夾心法）或單測 IgG抗體（間接法） 優(yōu)點(diǎn)： 簡便、快速，不需要特殊的儀器 適合于單人份操作，可用于較緊急和實(shí)驗(yàn)室條 件差的場合 不足： 臨床評估資料不多，敏感性、特異性尚有待進(jìn) 一步考查 無法實(shí)現(xiàn)自動化，結(jié)果判斷主觀 測定結(jié)果受溫度和時(shí)間的影響較大 價(jià)格較高 特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)（八） 免疫印跡試驗(yàn) 梅毒的免疫印跡試驗(yàn)（ Western blot）與作為 HIV抗體確認(rèn)的免疫印跡試驗(yàn)采用相同的原理和技術(shù) 既可檢測 IgG抗體，也可檢測 IgM抗體 目前已有商品化的試劑盒供應(yīng)，但價(jià)格高昂 檢測特異性的梅毒抗體條帶，其分子量分別為 、1 47kd 梅毒 IgG免疫印跡試驗(yàn)的敏感性和特異性均可達(dá)到甚至超過
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