基因表達調(diào)控及重組dna技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-25 18:06 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 苷酶 Y: 透酶 A: 乙?；D(zhuǎn)移酶 結(jié)構(gòu)基因 O:操縱序列 （阻遏蛋白結(jié)合部位） P:啟動序列 CAP結(jié)合位點 調(diào)控區(qū) 33 1. 阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié) （無乳糖） * 阻遏蛋白與 O序列結(jié)合 , 抑制轉(zhuǎn)錄 , lac操縱子 關(guān)閉 阻遏蛋白 mRNA CAP結(jié)合位點 P I I P O Z Y A RNA聚合酶 34 誘導(dǎo)劑結(jié)合于阻遏蛋白，阻遏蛋白與 O序列解離，轉(zhuǎn)錄抑制解除， lac操縱子開啟 乳糖 別乳糖 CAP結(jié)合位點 P I I P O Z Y A mRNA 阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié) （ 有乳糖 ） * 35 CAP: 分解代謝基因激活蛋白 catabolite gene activator protein 同二聚體 cAMP 結(jié)合區(qū) DNA 結(jié)合區(qū) 36 2. CAP的正性調(diào)節(jié) （ 無葡萄糖 ） * cAMP CAP蛋白 P I I P O Z Y A CAP結(jié)合位點 mRNA 無葡萄糖， cAMP濃度高 cAMP與 CAP結(jié)合 與 CAP結(jié)合位點結(jié)合 轉(zhuǎn)錄活性提高約 50倍 37 CAP的正性調(diào)節(jié) （ 有葡萄糖 ） * cAMP CAP蛋白 P I I P O Z Y A CAP結(jié)合位點 mRNA 有葡萄糖， cAMP濃度低 cAMP與 CAP結(jié)合受阻 轉(zhuǎn)錄活性下降 38 阻遏蛋白 mRNA CAP結(jié)合位點 P I I P O Z Y A RNA聚合酶 3. 阻遏蛋白與 CAP的協(xié)調(diào)調(diào)節(jié) * （ 1）無乳糖時 , 阻遏蛋白封閉轉(zhuǎn)錄， CAP無作用 39 （ 2） 有乳糖時 , 乳糖操縱子去阻遏 , 雖可轉(zhuǎn) 錄 , 但活性很低 , 必須由 CAP的正性調(diào)節(jié)來加強 P I I P O Z Y A CAP結(jié)合位點 mRNA 40 乳糖操縱子 強 的轉(zhuǎn)錄活性 既需要乳糖存在 又需要缺乏葡萄糖 41 （一）真核基因結(jié)構(gòu)特點 1. 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子 一個基因 —— 一條 mRNA—— 一條多肽鏈 2. 重復(fù)序列 高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、單拷貝序列 3. 基因不連續(xù)性 非編碼序列 內(nèi)含子 1 2 3 5’ 3’ 三、真核基因表達調(diào)控 42 （二） 真核基因轉(zhuǎn)錄特點 1. 活性染色體結(jié)構(gòu)變化 2. 對核酸酶敏感、甲基化程度降低、 組蛋白乙酰化修飾 2. 正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo) 真核 RNA聚合酶對啟動子的親和力極小或根本沒有 實質(zhì)的親和力 ， 轉(zhuǎn)錄起始需依賴多種激活蛋白的作用 3．轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進行 轉(zhuǎn)錄在核內(nèi)進行，翻譯在胞漿進行 43 轉(zhuǎn)錄（起始）調(diào)節(jié)實質(zhì)上是調(diào)節(jié)蛋白與DNA的相互作用 順式作用元件： 反式作用因子： mRNA轉(zhuǎn)錄激活及其調(diào)節(jié) （三）真核基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié) 44 1. 順式作用元件 * 指結(jié)構(gòu)基因兩側(cè)或內(nèi)部具有調(diào)節(jié)功能的DNA序列 ， 因其作用于自身分子并發(fā)揮作用 ，所以稱 順式作用元件 。 根據(jù)位置 、 性質(zhì)及作用方式的不同分為 啟動子 、 增強子和抑制子 。 45 真核生物 —— 順式作用元件 結(jié)構(gòu)基因序列 啟動子 (promoter) P 抑制子 (silencer) 增強子 (enhancer) 增強子 (enhancer) 46 RNA聚合酶 II啟動位點周圍一 組轉(zhuǎn)錄控制組件 常見組件： TATA盒 （ TATAAA） 25bp ~ 30bp GC盒 （ GGGCGG） CAAT盒 （ CCAATC） CAAT盒 GC盒 TATA盒 轉(zhuǎn)錄起始點 30bp ~ 110bp 啟動子 promoter 47 ? 增強子 * ： 遠離轉(zhuǎn)錄起始點、決定組織特異性表達、增強啟動子轉(zhuǎn) 錄活性的特異 DNA序列，其發(fā)揮作用的方式與方向、距 離無關(guān)。 ? 抑制子 * ： 對啟動子轉(zhuǎn)錄活性起抑制作用的 DNA序列 負性調(diào)節(jié)元件 48 反式作用因子（轉(zhuǎn)錄因子） 轉(zhuǎn)錄因子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)
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