【文章內(nèi)容簡介】 粒體外膜通透化，從而阻止細(xì)胞色素 C的釋放，抑制細(xì)胞凋亡。l 促凋亡成員： 包括 Bid、 Bim、 Bad等 “ BH3only”蛋白質(zhì) 和 Bax、 Bak、 Bok等 “多 BH”蛋白質(zhì)　　　機(jī)制 ： 影響 APAF1的功能 影響線粒體的結(jié)構(gòu)與功能434445u IAP（（ inhibitor of apoptosis，細(xì)胞凋亡抑制因子），細(xì)胞凋亡抑制因子） IAP超家族的成員較多，共同的特征是含有一個或多個７０個氨基酸的重復(fù)序列（ BIR），類似于zinc指狀的結(jié)構(gòu)?！　　?BIR功能域和之間的連接區(qū)域介導(dǎo)對 caspase的抑制作用，而環(huán)指狀結(jié)構(gòu)則具有泛素化蛋白連接酶的作用，介導(dǎo) caspase３和 ７的泛素化降解作用。 4647l (3) Smac/Dablol 在細(xì)胞凋亡過程中它可以從線粒體釋放進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。l 成熟的 Smac蛋白產(chǎn)生一個新的 N基端 ,這個N基端的前面 4個氨基酸可以與 lAP的 BIR結(jié)構(gòu)域結(jié)合。l Smac的功能就是 拮抗活化胱解酶 9與 lAP的結(jié)合 。 Smac 與 BIR2的結(jié)合可以中和 XlAP對胱解酶 9的抑制， 促進(jìn)凋亡 。 48(4) AIF(apoptosisinducing factor) Endo G 兩者均由線粒體釋放，可以非 Caspase依賴方式介導(dǎo)染色質(zhì)的濃集和 DNA片段化，促進(jìn)凋亡。49216。顆粒酶 B途徑凋亡l 顆粒酶 B屬絲氨酸蛋白酶l 可作用于底物的天冬氨酸殘基位點(diǎn)l 是 CTL殺傷靶細(xì)胞的主要效應(yīng)分子。l 機(jī)制 :(1)顆粒酶 B直接剪切并激活 Caspase3,后者作用于胞內(nèi)底物介導(dǎo)凋亡l 　 　 (2)顆粒酶 B剪切 Bid而產(chǎn)生 tBid,后者與Bax轉(zhuǎn)位于線粒體，介導(dǎo)細(xì)胞色素 C釋放，激活 Caspase級聯(lián)反應(yīng)。50l 細(xì)胞凋亡發(fā)生于在 淋巴細(xì)胞分化、發(fā)育成熟 及增殖和行使免疫學(xué)效 應(yīng)的全過程中；l 細(xì)胞凋亡在 免疫系統(tǒng)成熟、受體多樣性選擇 以及 免疫自穩(wěn) 等方面均有重要作用；l 研究免疫系統(tǒng)凋亡機(jī)制將為探討包括 腫瘤、自身免疫病、艾滋病等免疫相關(guān)疾病 的 發(fā)生機(jī)理進(jìn)而發(fā)展有效的 防治方案 提供依據(jù)。51二　細(xì)胞凋亡與免疫生理二　細(xì)胞凋亡與免疫生理l T細(xì)胞l （ 1）凋亡與 T細(xì)胞在胸腺的分化發(fā)育：52（ 2）凋亡與成熟 T細(xì)胞 ：活化 T細(xì)胞表面高表達(dá) fas及fasL。 AICDl T細(xì)胞53l B細(xì)胞l （ 1）凋亡與骨髓中 B細(xì)胞發(fā)育：l （ 2）凋亡與成熟 B細(xì)胞54l ：l 　有胞毒作用的淋巴細(xì)胞主要有 CTL、 NK、 LAK細(xì)胞等。它們產(chǎn)生效應(yīng)的機(jī)制相似：l Ca+內(nèi)流 → 釋放穿孔素 → 616nm孔 → 靶細(xì)胞死亡l 　　　　　靶細(xì)胞凋亡l 　　　　　　 ↑l 顆粒酶（絲氨酸酶） → 激活 caspase←TNF 相關(guān)蛋白l 　　　　　　 ↑l 　　　　　　　　　　 Tc高表達(dá) FasL55三　細(xì)胞凋亡與免疫病理細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡 不足不足 及細(xì)胞凋亡及細(xì)胞凋亡 過度過度 都會造成都會造成 疾病疾病2022 0481proliferation apoptosishomeostasis time 57與凋亡與凋亡 不足不足 有關(guān)的疾病有關(guān)的疾病 與凋亡與凋亡 過度過度 有關(guān)的疾病有關(guān)的疾病1 腫瘤腫瘤 1 AIDS濾泡型淋巴瘤濾泡型淋巴瘤 2 神經(jīng)變性疾病神經(jīng)變性疾病激素依賴性腫瘤（乳瘤）激素依賴性腫瘤（乳瘤） 巴金森氏病巴金森氏病2 自身免疫病自身免疫病 色素性視網(wǎng)膜炎色素性視網(wǎng)膜炎系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡 3 再生障礙性貧血再生障礙性貧血免疫介導(dǎo)的腎小球腎炎免疫介導(dǎo)的腎小球腎炎 4 缺血性損傷缺血性損傷3 病毒感染病毒感染 心肌梗死，中風(fēng)心肌梗死，中風(fēng)皰疹病毒，腺病毒皰疹病毒，腺病毒 5 酒精中毒性肝病酒精中毒性肝病 57凋亡不足與過度并存： 動脈粥樣硬化（內(nèi)皮細(xì)胞凋亡過度，血管平滑肌細(xì)胞凋亡不足）針對疾病種類的不同，可以通過抑制或者增強(qiáng)細(xì)胞針對疾病種類的不同，可以通過抑制或者增強(qiáng)細(xì)胞凋亡的措施治療有關(guān)的疾病凋亡的措施治療有關(guān)的疾病 ：：1 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡治療因凋亡受抑而致的疾病誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡治療因凋亡受抑而致的疾病　放療和化療能激活腫瘤自殺程序，導(dǎo)致瘤細(xì)胞凋亡。改變細(xì)胞凋亡狀態(tài)用于疾病治療的許多措施尚屬試用階段改變細(xì)胞凋亡狀態(tài)用于疾病治療的許多措施尚屬試用階段。一個十分誘人的設(shè)想是。一個十分誘人的設(shè)想是 基因治療基因治療 ———— 通過通過 載體導(dǎo)入凋亡載體導(dǎo)入凋亡相關(guān)基因相關(guān)基因 干預(yù)細(xì)胞的凋亡調(diào)控來實現(xiàn)。干預(yù)細(xì)胞的凋亡調(diào)控來實現(xiàn)。2 抑制細(xì)胞凋亡治療因凋亡過量而致的疾病抑制細(xì)胞凋亡治療因凋亡過量而致的疾病　　 神經(jīng)生長因子治療神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，可以延緩神經(jīng)元凋亡。58四　細(xì)胞凋亡研究方法l 形態(tài)學(xué)方法l 生物化學(xué)方法l 免疫學(xué)方法l 組織化學(xué)方法l 分子生物學(xué)方法5960l l 1） 　 光學(xué)顯微鏡觀察l 　　 樣品涂片或組織切片經(jīng)常規(guī)處理、樣品涂片或組織切片經(jīng)常規(guī)處理、 HE染色后染色后 ,即可放即可放在油鏡下觀察。在油鏡下觀察。l 　　該方法簡便　　該方法簡便 ,缺點(diǎn)是只有在發(fā)現(xiàn)了具有缺點(diǎn)是只有在發(fā)現(xiàn)了具有 特征性的凋亡小特征性的凋亡小體時體時 才能確定為才能確定為 熒光結(jié)果陽性熒光結(jié)果陽性 ,因而因而 不易檢出早期的凋亡細(xì)不易檢出早期的凋亡細(xì)胞胞 ,而且某些類型的細(xì)胞壞死而且某些類型的細(xì)胞壞死 (如凝固性壞死如凝固性壞死 )與細(xì)胞凋亡形與細(xì)胞凋亡形態(tài)相似態(tài)相似 ,兩者不易區(qū)分。因此兩者不易區(qū)分。因此 ,該方法只能作為該方法只能作為 細(xì)胞凋亡初細(xì)胞凋亡初步推測的手段步推測的手段 。6162l l 2） 熒光顯微鏡觀察：l 　　熒光染料吖啶橙 (AO)、碘化丙啶 (PI)、溴化乙錠 (EB)等染色 ,在熒光顯微鏡下可觀察到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核改變和凋亡小體的形成。l 　　這種方法 適用于對體外培養(yǎng)細(xì)胞懸液 的檢測 ,組織脫蠟切片經(jīng) RNA酶作用后也可用此法染色觀察。l 　　熒光顯微鏡檢查法方便易行 ,現(xiàn)已成為細(xì)胞凋亡檢查的常用手段。63 　　 On this slide the easiest and historically first way of ide