【文章內(nèi)容簡介】 粒體外膜通透化，從而阻止細胞色素 C的釋放，抑制細胞凋亡。l 促凋亡成員： 包括 Bid、 Bim、 Bad等 “ BH3only”蛋白質 和 Bax、 Bak、 Bok等 “多 BH”蛋白質　　　機制 ： 影響 APAF1的功能 影響線粒體的結構與功能434445u IAP（（ inhibitor of apoptosis，細胞凋亡抑制因子），細胞凋亡抑制因子） IAP超家族的成員較多，共同的特征是含有一個或多個７０個氨基酸的重復序列（ BIR），類似于zinc指狀的結構。　　　 BIR功能域和之間的連接區(qū)域介導對 caspase的抑制作用，而環(huán)指狀結構則具有泛素化蛋白連接酶的作用，介導 caspase３和 ７的泛素化降解作用。 4647l (3) Smac/Dablol 在細胞凋亡過程中它可以從線粒體釋放進入細胞質。l 成熟的 Smac蛋白產(chǎn)生一個新的 N基端 ,這個N基端的前面 4個氨基酸可以與 lAP的 BIR結構域結合。l Smac的功能就是 拮抗活化胱解酶 9與 lAP的結合 。 Smac 與 BIR2的結合可以中和 XlAP對胱解酶 9的抑制， 促進凋亡 。 48(4) AIF(apoptosisinducing factor) Endo G 兩者均由線粒體釋放，可以非 Caspase依賴方式介導染色質的濃集和 DNA片段化，促進凋亡。49216。顆粒酶 B途徑凋亡l 顆粒酶 B屬絲氨酸蛋白酶l 可作用于底物的天冬氨酸殘基位點l 是 CTL殺傷靶細胞的主要效應分子。l 機制 :(1)顆粒酶 B直接剪切并激活 Caspase3,后者作用于胞內(nèi)底物介導凋亡l 　 　 (2)顆粒酶 B剪切 Bid而產(chǎn)生 tBid,后者與Bax轉位于線粒體，介導細胞色素 C釋放，激活 Caspase級聯(lián)反應。50l 細胞凋亡發(fā)生于在 淋巴細胞分化、發(fā)育成熟 及增殖和行使免疫學效 應的全過程中；l 細胞凋亡在 免疫系統(tǒng)成熟、受體多樣性選擇 以及 免疫自穩(wěn) 等方面均有重要作用；l 研究免疫系統(tǒng)凋亡機制將為探討包括 腫瘤、自身免疫病、艾滋病等免疫相關疾病 的 發(fā)生機理進而發(fā)展有效的 防治方案 提供依據(jù)。51二　細胞凋亡與免疫生理二　細胞凋亡與免疫生理l T細胞l （ 1）凋亡與 T細胞在胸腺的分化發(fā)育：52（ 2）凋亡與成熟 T細胞 ：活化 T細胞表面高表達 fas及fasL。 AICDl T細胞53l B細胞l （ 1）凋亡與骨髓中 B細胞發(fā)育：l （ 2）凋亡與成熟 B細胞54l ：l 　有胞毒作用的淋巴細胞主要有 CTL、 NK、 LAK細胞等。它們產(chǎn)生效應的機制相似：l Ca+內(nèi)流 → 釋放穿孔素 → 616nm孔 → 靶細胞死亡l 　　　　　靶細胞凋亡l 　　　　　　 ↑l 顆粒酶（絲氨酸酶） → 激活 caspase←TNF 相關蛋白l 　　　　　　 ↑l 　　　　　　　　　　 Tc高表達 FasL55三　細胞凋亡與免疫病理細胞凋亡細胞凋亡 不足不足 及細胞凋亡及細胞凋亡 過度過度 都會造成都會造成 疾病疾病2022 0481proliferation apoptosishomeostasis time 57與凋亡與凋亡 不足不足 有關的疾病有關的疾病 與凋亡與凋亡 過度過度 有關的疾病有關的疾病1 腫瘤腫瘤 1 AIDS濾泡型淋巴瘤濾泡型淋巴瘤 2 神經(jīng)變性疾病神經(jīng)變性疾病激素依賴性腫瘤（乳瘤）激素依賴性腫瘤（乳瘤） 巴金森氏病巴金森氏病2 自身免疫病自身免疫病 色素性視網(wǎng)膜炎色素性視網(wǎng)膜炎系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡 3 再生障礙性貧血再生障礙性貧血免疫介導的腎小球腎炎免疫介導的腎小球腎炎 4 缺血性損傷缺血性損傷3 病毒感染病毒感染 心肌梗死，中風心肌梗死，中風皰疹病毒，腺病毒皰疹病毒，腺病毒 5 酒精中毒性肝病酒精中毒性肝病 57凋亡不足與過度并存： 動脈粥樣硬化（內(nèi)皮細胞凋亡過度，血管平滑肌細胞凋亡不足）針對疾病種類的不同，可以通過抑制或者增強細胞針對疾病種類的不同，可以通過抑制或者增強細胞凋亡的措施治療有關的疾病凋亡的措施治療有關的疾病 ：：1 誘導細胞凋亡治療因凋亡受抑而致的疾病誘導細胞凋亡治療因凋亡受抑而致的疾病　放療和化療能激活腫瘤自殺程序，導致瘤細胞凋亡。改變細胞凋亡狀態(tài)用于疾病治療的許多措施尚屬試用階段改變細胞凋亡狀態(tài)用于疾病治療的許多措施尚屬試用階段。一個十分誘人的設想是。一個十分誘人的設想是 基因治療基因治療 ———— 通過通過 載體導入凋亡載體導入凋亡相關基因相關基因 干預細胞的凋亡調控來實現(xiàn)。干預細胞的凋亡調控來實現(xiàn)。2 抑制細胞凋亡治療因凋亡過量而致的疾病抑制細胞凋亡治療因凋亡過量而致的疾病　　 神經(jīng)生長因子治療神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，可以延緩神經(jīng)元凋亡。58四　細胞凋亡研究方法l 形態(tài)學方法l 生物化學方法l 免疫學方法l 組織化學方法l 分子生物學方法5960l l 1） 　 光學顯微鏡觀察l 　　 樣品涂片或組織切片經(jīng)常規(guī)處理、樣品涂片或組織切片經(jīng)常規(guī)處理、 HE染色后染色后 ,即可放即可放在油鏡下觀察。在油鏡下觀察。l 　　該方法簡便　　該方法簡便 ,缺點是只有在發(fā)現(xiàn)了具有缺點是只有在發(fā)現(xiàn)了具有 特征性的凋亡小特征性的凋亡小體時體時 才能確定為才能確定為 熒光結果陽性熒光結果陽性 ,因而因而 不易檢出早期的凋亡細不易檢出早期的凋亡細胞胞 ,而且某些類型的細胞壞死而且某些類型的細胞壞死 (如凝固性壞死如凝固性壞死 )與細胞凋亡形與細胞凋亡形態(tài)相似態(tài)相似 ,兩者不易區(qū)分。因此兩者不易區(qū)分。因此 ,該方法只能作為該方法只能作為 細胞凋亡初細胞凋亡初步推測的手段步推測的手段 。6162l l 2） 熒光顯微鏡觀察：l 　　熒光染料吖啶橙 (AO)、碘化丙啶 (PI)、溴化乙錠 (EB)等染色 ,在熒光顯微鏡下可觀察到凋亡細胞的細胞核改變和凋亡小體的形成。l 　　這種方法 適用于對體外培養(yǎng)細胞懸液 的檢測 ,組織脫蠟切片經(jīng) RNA酶作用后也可用此法染色觀察。l 　　熒光顯微鏡檢查法方便易行 ,現(xiàn)已成為細胞凋亡檢查的常用手段。63 　　 On this slide the easiest and historically first way of ide