細(xì)胞工程-動(dòng)物細(xì)胞工程(編輯修改稿)
2024-09-11 20:38 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 一樣。你聽(tīng)明白了嗎？這不是天方夜譚，巨大的前景就在眼前，你還在等什么呢？趕緊加入到生命科學(xué)的研究中來(lái)吧！ 看書(shū) P4950頁(yè) 動(dòng)物細(xì)胞融合 回憶已學(xué)知識(shí)，你是否已經(jīng)見(jiàn)到過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)例？ 人鼠細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn) 定義： 也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指用自然或人工方法使兩個(gè)或多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 ◆ 雜交細(xì)胞： 融合后形成的具有原來(lái) 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息 的 單核細(xì)胞 成為雜交細(xì)胞 。 基因型相同的細(xì)胞融合成的雜交細(xì)胞稱(chēng)為 同核體 。 來(lái)自不同基因型的雜交細(xì)胞則稱(chēng)為 異核體。 同種細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí) 2個(gè)靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并，稱(chēng) 自發(fā)融合 ； 異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合，稱(chēng) 誘發(fā)融合。 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng) 兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用 動(dòng)物細(xì)胞融合 誘導(dǎo)融合的因素 ? 生物法： 滅活的病毒 誘導(dǎo)融合 .(利用 滅活仙臺(tái)病毒 是動(dòng)物細(xì)胞融合所特有的。 這是由于病毒的磷脂外殼與動(dòng)物細(xì)胞的膜十分相似的緣故。病毒外殼上的某些糖蛋白 可能還有促進(jìn)細(xì)胞融合的功能。 ) ? 化學(xué)法： 聚乙二醇 (PEG)誘導(dǎo)融合 . ? 物理法： 電激 融合 病毒顆粒黏 附細(xì)胞表面 細(xì)胞膜連接 細(xì)胞膜被 病毒顆粒穿通 細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞 思考討論： 為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？ 因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂 質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合，不滅 活的話(huà)會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用 ? 細(xì)胞融合技術(shù)突破了 有性雜交 的局限，使遠(yuǎn)緣雜交 成為可能。 ? 利用 雜交瘤技術(shù)， 制備 單克隆抗體。 植物體細(xì)胞雜交 動(dòng)物細(xì)胞融合 理論基礎(chǔ) 融合前處理 誘導(dǎo)方法 結(jié)果 應(yīng)用 相同點(diǎn) 制備單克隆抗體 培育新品種 雜交細(xì)胞 雜交植株 突破了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離 電激、振動(dòng)、離心、聚乙二醇 纖維素酶、果膠酶 胰蛋白酶 (或膠原蛋白酶） 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、 細(xì)胞的全能性 電激、 滅活的病毒 、聚乙二醇 融合的原理相同，誘導(dǎo)方法相似 植物細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較 ? 人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法是 ? – 將抗原注入動(dòng)物體 ,然后從動(dòng)物血清中提取抗體 ? 這種方法的缺點(diǎn)是什么 ? – 效率低，產(chǎn)量有限，純度低，動(dòng)物抗體注入人體可能產(chǎn)生嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)。 ? 能否用單個(gè) B淋巴細(xì)胞通過(guò)克隆形成的細(xì)胞群來(lái)產(chǎn)生單一類(lèi)型的抗體呢？ B淋巴細(xì)胞在體外不能無(wú)限增殖。 二：動(dòng)物細(xì)胞融合的成功應(yīng)用 —— 單克隆抗體的制備 思考 抗原 吞噬細(xì)胞攝取處理 T細(xì)胞 暴露、呈遞 B細(xì)胞 直接刺激 漿細(xì)胞 增殖、分化 抗體 產(chǎn)生 從動(dòng)物血清中分離 淋巴因子 獲取抗體的傳統(tǒng)方法 該方法的缺點(diǎn)是？ 傳統(tǒng)獲得抗體方法的缺點(diǎn)： 產(chǎn)量低，純度低，特異性差 如何獲得大量的、特異性強(qiáng)的抗體？ 利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 克隆單一的經(jīng)免疫的 B細(xì)胞 這就是 “ 單克隆抗體 ” 單克隆抗體的制備 — 極富創(chuàng)造性的方案 將能夠產(chǎn)生特定抗體的 B淋巴細(xì)胞 和具有無(wú)限增殖能力的 骨髓瘤細(xì)胞 融合在一起，形成雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能在體外快速生長(zhǎng)，又能持續(xù)分泌成分單一的特異性抗體。這種 單一類(lèi)型的只針對(duì)某一特定抗原決定簇的抗體分子，就是單克隆抗體。 ? 米爾斯坦 (阿根廷 )和科勒 (德國(guó) )因此在 1984年獲諾貝爾獎(jiǎng)。 B淋巴細(xì)胞？ B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞放在一起，有幾種融合方式？ ? ? ？ 制備過(guò)程提示 : 制備單克隆抗體 ◆ 每一個(gè) 只分泌一種特異性抗體。 ◆ 具有無(wú)限增殖的特性。 ◆ 技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能 ，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的 。 ◆ 利用 技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 大量增殖 特定抗體 單克隆抗體制備過(guò)程 注射特
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