【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ml 的白色念珠菌菌液）1ml 按照下表，分別接入到盛有 %新潔爾滅溶液（或 %新潔爾滅溶液）的試管中（已進(jìn)行 10 倍稀釋） ，輕輕搖動(dòng)，混合均勻，并立即開始計(jì)時(shí)。5 分鐘組 10 分鐘組 15 分鐘組金黃色葡萄球菌 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支白色念珠菌 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支（c） 消毒劑的稀釋分別在 5 分鐘、10 分鐘和 15 分鐘時(shí)迅速吸取 1ml 菌藥混合液，加入到 ％硫代硫酸鈉中和劑中，迅速混勻中和 10 分鐘，分別取上述經(jīng)中和的“5 分鐘組” 、 “10分鐘組”和“15 分鐘組”的接種細(xì)菌的消毒液，傾入過濾杯濾過，然后各用 %無菌生理鹽水 50ml 清洗濾膜，濾過，重復(fù)用 %無菌生理鹽水的洗滌共 3 次。取下濾膜，含細(xì)菌的膜放入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板內(nèi)，含真菌的膜放入玫瑰紅鈉瓊脂平板內(nèi)，含菌膜面向上。細(xì)菌于 ℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 72h，真菌于 25℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)72h。培養(yǎng) 72h 后在明亮處，對(duì)平板上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄計(jì)數(shù)結(jié)果。d 陽性對(duì)照分別將 106cfu/ml 金黃色葡萄球菌液、10 6cfu/ml 的白色念珠菌菌液用無菌注射用水進(jìn)行梯度稀釋至濃度為 10～100cfu/ml，取稀釋液體 1ml 于平皿中，傾注冷卻至45℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基混勻，待凝固后于細(xì)菌于 ℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 48h，真菌于 25℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 72h。培養(yǎng)結(jié)束后對(duì)平板上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄計(jì)數(shù)結(jié)果。消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn)表七 %新潔爾滅溶液消毒效力的確認(rèn)試驗(yàn)組菌落數(shù)（cfu/ml ）101與消毒劑作用時(shí)間 菌種名稱1 2 3平均菌落數(shù)（cfu/ml）殺菌率金黃色葡萄球菌5 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌10 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌15 分鐘白色念珠菌 稀釋級(jí)菌種名稱 103 104 105平均菌落數(shù)（cfu/ml）金黃色葡萄球菌陽性對(duì)照白色念珠菌確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：操作人： 日期： 年 月 日 復(fù)核人： 日期： 年 月 日表八 ％新潔爾滅溶液消毒效力的確認(rèn)消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn)試驗(yàn)組菌落數(shù)（cfu/ml）101與消毒劑作用時(shí)間 菌種名稱1 2 3平均菌落數(shù)（cfu/ml）殺菌率金黃色葡萄球菌5 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌10 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌15 分鐘白色念珠菌 稀釋級(jí)菌種名稱 103 104 105平均菌落數(shù)（cfu/ml）金黃色葡萄球菌陽性對(duì)照白色念珠菌確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：操作人： 日期： 年 月 日 復(fù)核人： 日期： 年 月 日消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn) %醋酸洗必泰溶液、%醋酸洗必泰溶液消毒效力確認(rèn)目的：由于 %醋酸洗必泰溶液、%醋酸洗必泰溶液是通過浸泡或液封消毒，采用將消毒劑置于無菌具塞試管中通過定量懸浮試驗(yàn)法，確定其消毒效力是否符合要求。程序：（1）菌種選擇 由于 %醋酸洗必泰、%醋酸洗必泰溶液為高效消毒劑，能殺滅芽孢，故定量懸浮試驗(yàn)用菌為金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草芽孢桿菌。（2）菌液制備：取金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌分別接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于30～35℃培養(yǎng) 18～24h 即得，培養(yǎng)后微生物濃度應(yīng)不少于 106cfu/ml。取白色念珠菌接種于改良馬丁液體培養(yǎng)基中，于 23～28℃培養(yǎng) 24～48h 即得，培養(yǎng)后微生物濃度應(yīng)不少于 106cfu/ml。（3）消毒劑的配制：按照《清潔劑、消毒劑配制使用程序》進(jìn)行配制 %醋酸洗必泰溶液、%醋酸洗必泰溶液；現(xiàn)配現(xiàn)用。（4）試驗(yàn)方法：（a） 在室溫條件下將配制好的 %醋酸洗必泰溶液（或 %醋酸洗必泰溶液）按 9ml/支分注于 27 支無菌具塞試管中，按照“5 分鐘組” 、 “10 分鐘組”和“15 分鐘組”共 3 組每組 9 支，進(jìn)行分組編號(hào)。（b） 取兩種供試菌液（10 6cfu /ml 的金黃色葡萄球菌菌液，10 6cfu /ml 的白色念珠菌菌液和 106cfu /ml 的枯草芽胞桿菌菌液）1ml 按照下表，分別接入到盛有 %醋酸洗必泰溶液（或 %醋酸洗必泰溶液）的試管中（已進(jìn)行 10 倍稀釋） ，輕輕搖動(dòng)，混合均勻，并立即開始計(jì)時(shí)。5 分鐘組 10 分鐘組 15 分鐘組金黃色葡萄球菌 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支白色念珠菌 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支枯草桿菌黑色變種芽胞 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支 1ml/支，共 3 支（c）消毒劑的稀釋分別在 5 分鐘、10 分鐘和 15 分鐘時(shí)迅速吸取 1ml 菌藥混合液，加入到 ％硫代硫酸鈉中和劑中，迅速混勻中和 10 分鐘，分別取上述經(jīng)中和的“5 分鐘組” 、 “10分鐘組”和“15 分鐘組”的接種細(xì)菌的消毒液，傾入過濾杯濾過，然后各用 %無菌生理鹽水 50ml 清洗濾膜，濾過，重復(fù)用 %無菌生理鹽水的洗滌共 3 次。取下濾膜，含細(xì)菌的膜放入營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板內(nèi)，含真菌的膜放入玫瑰紅鈉瓊脂平板內(nèi)，含菌膜面向上。細(xì)菌于 ℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 72h，真菌于 25℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn)72h。培養(yǎng) 72h 后在明亮處，對(duì)平板上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄計(jì)數(shù)結(jié)果。（d）陽性對(duì)照分別將 106cfu/ml 金黃色葡萄球菌液、10 6cfu/ml 的白色念珠菌菌液用無菌注射用水進(jìn)行梯度稀釋至濃度為 10～100cfu/ml，取稀釋液體 1ml 于平皿中，傾注冷卻至45℃營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基混勻，待凝固后于細(xì)菌于 ℃的生化培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 48h，真菌于 25℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 72h。培養(yǎng)結(jié)束后對(duì)平板上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，記錄計(jì)數(shù)結(jié)果。表九 %醋酸洗必泰溶液消毒效力的確認(rèn)試驗(yàn)組菌落數(shù)（cfu/ml ）101與消毒劑作用時(shí)間 菌種名稱1 2 3平均菌落數(shù)（cfu/ml）殺菌率金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌5 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌10 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌15 分鐘白色念珠菌 稀釋級(jí)菌種名稱 103 104 105平均菌落數(shù)（cfu/ml）金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌陽性對(duì)照白色念珠菌確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn)操作人： 日期： 年 月 日 復(fù)核人： 日期： 年 月 日表十 ％醋酸洗必泰溶液消毒效力的確認(rèn)試驗(yàn)組菌落數(shù)（cfu/ml ）101與消毒劑作用時(shí)間 菌種名稱1 2 3平均菌落數(shù)（cfu/ml）殺菌率金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌5 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌10 分鐘白色念珠菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌15 分鐘白色念珠菌 稀釋級(jí)菌種名稱 103 104 105平均菌落數(shù)（cfu/ml）金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌陽性對(duì)照白色念珠菌消毒劑消毒效果及有效期確認(rèn)確認(rèn)結(jié)果評(píng)價(jià)：操作人： 日期： 年 月 日 復(fù)核人： 日期： 年 月 日 75%乙醇溶液、%新潔爾滅溶液消毒效力的確認(rèn)目的:由于 75%乙醇溶液、%新潔爾滅溶液是通過擦拭消毒，故選用不銹鋼載片、鍍鋅片及玻璃裁片進(jìn)行表面試驗(yàn)法，確定其消毒效力是否符合要求。程序：（1）菌種選擇：由于 75%乙醇、%新潔爾滅溶液中低效消毒劑，且不能殺滅芽孢，故表面試驗(yàn)用菌為金黃色葡萄球菌、白色念珠菌。（2）工作菌液制備 取金黃色葡萄球菌分別接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于 30～35℃培養(yǎng) 18～24h 即得，培養(yǎng)后微生物濃度應(yīng)不少于 106cfu/ml。取白色念珠菌接種于改良馬丁液體培養(yǎng)基中，于 23～28℃培養(yǎng) 24～48h 即得，培養(yǎng)后微生物濃度應(yīng)不少于106cfu/ml。（3）染菌不銹鋼載片制備：將經(jīng)滅菌的不銹鋼載片平鋪于無菌平皿內(nèi)，滴加金黃色葡萄球菌、白色念珠菌含菌量為 1108~5108CFU/ml 的菌液 ，并均勻涂布于整個(gè)載體表面。滴染菌液后，載片置超凈工作臺(tái)晾干后備用。每種菌平行制備兩個(gè)染菌不銹鋼載片；染菌鍍鋅載片制備：將經(jīng)滅菌的鍍鋅載片平鋪于無菌平皿內(nèi)，滴加金黃色葡萄球菌、白色念珠菌含菌量為 1108~5108CFU/ml 的菌液 ，并均勻涂布于整個(gè)載體表面。滴染菌液后，載片置超凈工