免疫檢驗項目標(biāo)準操作程序(編輯修改稿)
2024-09-03 16:02 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 終止后10分鐘內(nèi)完成。若試驗結(jié)果陰陽性對照有疑問，該試驗視為無效，需重做。洗滌液用前需25倍稀釋，若洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶，可置37度使之溶解。不同批號的試劑不可混用。使用試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)，請按傳染病實驗室檢查規(guī)程處理。人類免疫缺陷病毒抗體檢測規(guī)程一、操作步驟：將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。將標(biāo)本對應(yīng)微孔按順序編號。配液：將50ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋至1000ml備用。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照3孔，陽性對照一型、二型各一孔，空白對照一孔。加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品或陰、陽性對照100ul。溫育：覆蓋黏膠紙，置37度孵育30分鐘。取出已孵育完畢的反應(yīng)板，棄去粘膠紙，吸干板內(nèi)液體，將洗滌液注滿各孔（約300微升/孔），吸干，反復(fù)5次，在干凈紗布上將板拍干。每孔加酶結(jié)合物100微升，取新粘膠紙覆蓋放映板，置37度孵育30分鐘。取出已孵育完畢的反應(yīng)板，棄去粘膠紙，吸干板內(nèi)液體，將洗滌液注滿各孔（約300微升/孔），吸干，反復(fù)5次，在干凈紗布上將板拍干。每孔加入底物緩沖液50微升，TMB50微升，混勻，置37度顯色10分鐘。1加終止液50微升震蕩反應(yīng)板5秒鐘，使之充分混勻。1在酶標(biāo)度數(shù)儀上，取波長450nm（建議使用雙波長酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm），儀空白對照孔校零，讀取每孔吸收值（加終止液后，務(wù)必在15分鐘內(nèi)讀數(shù)完畢）二、結(jié)果判斷：。Cutoff Value=陽性對照值乘以10%（）標(biāo)本OD值小于等于Cutoff Value為陰性。標(biāo)本OD值大于Cutoff Value為陽性。三、注意事項：在試劑的使用單位必須使當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門標(biāo)準的HIV初篩試驗室。整個檢測工作必須符合HIV試驗室管理范圍和生物安全守則規(guī)定，嚴格防止交叉感染。操作時必須帶手套，穿工作服，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。HIV檢測結(jié)果的判定不許以酶標(biāo)儀的讀數(shù)為準。標(biāo)本和酶結(jié)合物均應(yīng)用加樣器加注，并經(jīng)常校對其準確性。所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。洗滌液若出現(xiàn)結(jié)晶，可置37度溶解。粘膠紙不能反復(fù)使用。微孔條從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)在室溫平衡至無潮氣方可使用，未用完的須放入有干燥劑的密封袋中保存?？闺p鏈DNA檢測程序一、操作步驟：將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。將標(biāo)本對應(yīng)微孔按順序編號。滴入2滴試劑一（洗滌液）于反應(yīng)板中央孔中，待完全滲入。滴入100ul血清于反應(yīng)板孔中待完全滲入。滴加3滴試劑二（金標(biāo)液）于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。滴入三滴試劑一于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。二、結(jié)果判斷陽性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)2個紅色圓斑，為陽性。陰性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)1個紅色圓斑，為陰性。三、注意事項：若遇冬天室內(nèi)溫度較低時（16度左右），可在37度水浴箱內(nèi)操作。陳舊血清盒高脂血癥血清一般不宜使用。如果質(zhì)控斑點太淺請多加2滴市集二。若膜的背景較深，可多滴幾滴試劑二。若膜的背景較深，可多滴加幾滴試劑一充分洗滌。陽性斑點較弱時，可延長至20分鐘觀察結(jié)果。檢測一旦開始操作，應(yīng)按操作步驟連續(xù)進行，直至結(jié)束?？购丝贵w檢測程序一、操作步驟：將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。將標(biāo)本對應(yīng)微孔按順序編號。滴入2滴試劑一（洗滌液）于反應(yīng)板中央孔中，待完全滲入。滴入100ul血清于反應(yīng)板孔中待完全滲入。滴加3滴試劑二（金標(biāo)液）于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。滴入三滴試劑一于反應(yīng)板孔中，待完全滲入。二、結(jié)果判斷陽性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)2個紅色圓斑，為陽性。陰性：反應(yīng)板孔中央出現(xiàn)1個紅色圓斑，為陰性。三、注意事項：若遇冬天室內(nèi)溫度較低時（16度左右），可在37度水浴箱內(nèi)操作。陳舊血清盒高脂血癥血清一般不宜使用。如果質(zhì)控斑點太淺請多加2滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴幾滴試劑2。若膜的背景較深，可多滴加幾滴試劑1充分洗滌。陽性斑點較弱時，可延長至20分鐘觀察結(jié)果。檢測一旦開始操作，應(yīng)按操作步驟連續(xù)進行，直至結(jié)束。TORCHIgM四聯(lián)檢測規(guī)程一、操作步驟：取出試劑盒，室溫放置5－10分鐘。取出檢測板，在中央孔加A液200ul（四滴），待滲入。加待測血清200ul（四滴），待滲入。加A液洗滌液100ul（2滴），待滲入。加B液檢測液200ul（四滴），待滲入。在加A液150ul（3滴），然后直接觀察結(jié)果。二、結(jié)果判斷：陰性：僅質(zhì)控點出現(xiàn)紅色斑點為陰性反應(yīng)。陽性：除質(zhì)控點出現(xiàn)紅色斑點外，四角的檢測點也有紅色或淺紅色斑點出現(xiàn)。哪一個檢測點出現(xiàn)紅色斑點即為相應(yīng)的IgM抗體陽性。如左上角檢測點TOX出現(xiàn)紅色斑點即為弓形體IgM抗體陽性；左上角TOX和左下角CMV出現(xiàn)紅色斑點為弓形蟲和巨細胞病毒檢測雙陽性；左上角TOX和左下角CMV，和右上角RUV出現(xiàn)紅色斑點為弓形蟲、巨細胞病毒和風(fēng)疹病毒三項陽性；左上角TOX，左下角CMV、右上角RUV、和右下角HSV二出現(xiàn)紅色斑點即為弓形蟲、巨細胞病毒、風(fēng)疹病毒和單純皰疹病毒二型檢測陽性。EB病毒抗體檢測程序一、操作步驟：將試劑盒從冰箱中取出，至室溫中平衡30分鐘后使用。
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