微生物計數(shù)方法(編輯修改稿)
2025-08-21 16:21 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 不更換刮鏟。將涂抹好的平板平放于桌上20—30min，使菌液滲透入培養(yǎng)基內(nèi)，然后將平板倒轉(zhuǎn)，保溫培養(yǎng)，至長出菌落后即可計數(shù)。五、實驗作業(yè)： 將實驗結(jié)果填入下表中稀釋度107108109菌落數(shù)123平均123平均12 3平均 1g樣品活菌數(shù) 計算結(jié)果時，常按下列標準從接種后的3個稀釋度中選擇一個合適的稀釋度，求出每克菌劑中的含菌數(shù)。 （1）同一稀釋度各個重復(fù)的菌數(shù)相差不太懸殊。 （2）細菌、放線菌、酵母菌以每皿30—300個菌落為宜，霉菌以每皿10—100個菌落為宜。選擇好計數(shù)的稀釋度后，即可統(tǒng)計在平板上長出的菌落數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果按下式計算?；旌掀桨逵嫈?shù)法：每克樣品的菌數(shù)=同一稀釋度幾次重復(fù)的菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)涂抹平板計效法： 每克樣品的菌數(shù)=同一稀釋度幾次重復(fù)的菌落平均數(shù)10稀釋倍數(shù)稀釋培養(yǎng)測數(shù)法（MPN）一、實驗?zāi)康耐ㄟ^對好氣性自生固氮菌的計數(shù)，了解稀釋培養(yǎng)計數(shù)（MPN）的原理和方法。二、實驗原理 最大或然數(shù)(most probable number，MPN)計數(shù)又稱稀釋培養(yǎng)計數(shù)，適用于測定在一個混雜的微生物群落中雖不占優(yōu)勢，但卻具有特殊生理功能的類群。其特點是利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾，并通過該生理功能的表現(xiàn)來判斷該類群微生物的存在和豐度。本法特別適合于測定土壤微生物中的特定生理群（如氨化、硝化、纖維素分解、固氮、硫化和反硫化細菌等。見附表231）的數(shù)量和檢測污水、牛奶及其他食品中特殊微生物類群（如大腸菌群）的數(shù)量，缺點是只適于進行特殊生理類群的測定，結(jié)果也較粗放，只有在因某種原因不能使用平板計數(shù)時才采用。 MPN計數(shù)是將待測樣品作一系列稀釋，一直稀釋到將少量（如lm1）的稀釋液接種到新鮮培養(yǎng)基中沒有或極少出現(xiàn)生長繁殖。根據(jù)沒有生長的最低稀釋度與出現(xiàn)生長的最高稀釋度，采用“最大或然數(shù)”理論，可以計算出樣品單位體積中細菌數(shù)的近似值。具體地說，菌液經(jīng)多次10倍稀釋后，一定量菌液中細菌可以極少或無菌，然后每個稀釋度取3—5次重復(fù)接種于適宜的液體培養(yǎng)基中。培養(yǎng)后，將有菌液生長的最后3個稀釋度（即臨界級數(shù)）中出現(xiàn)細菌生長的管數(shù)作為數(shù)量指標，由最大或然數(shù)表（見附錄九）上查出近似值，再乘以數(shù)量指標第一位數(shù)的稀釋倍數(shù)，即為原菌液中的含菌數(shù)。如某一細菌在稀釋法中的生長情況如下； 稀釋度 lO3 104 105 lO6 107 108 重復(fù)數(shù) 5 5 5 5 5 5 出現(xiàn)生長的管數(shù) 5 5 5 4
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