【文章內(nèi)容簡介】 隨即停止工作，SV2啟動。細胞懸液被吸入小孔，浮球隨著液面向下移動，當?shù)竭_A點時，儀器開始計數(shù)，當?shù)竭_B點時，計數(shù)停止，同時SV2停止工作。儀器吸入的細胞懸液量與定量管內(nèi)A與B之間的容量相等，由此進行定量。 這種定量技術在計數(shù)小孔有輕微堵塞時，浮 球移動的速度減慢，計數(shù)時間延長，保證了計數(shù)量的恒定。 圖5. 浮球定量技術原理示意圖(Sample Rotor Valve)閥定量技術(SYSMEX專利)： 自動吸取標本最初采用機械臂探針式，但由于血液粘度比血清高，所以精密度和準確性都不理想。旋轉(zhuǎn)閥的應用極大地提高了分血精度。 在單旋轉(zhuǎn)閥(SRV)閥中，首先吸入血液標本，然后旋轉(zhuǎn)閥轉(zhuǎn)動，將一定量的標本連接紅細胞稀釋通道，另一部分標本連接白細胞稀釋通道。啟動閥門后，標本和稀釋液通向各自的計數(shù)池。剩余部分用回沖液沖洗出去。這樣，白細胞和紅細胞/血小板的分血、稀釋一次完成。有關原理參見示意圖。 前片 中片 后片 標本泵 至白細胞池 反沖清洗液 自紅細胞分配器 白細胞池 至紅細胞池 紅細胞池吸樣管 白細胞測定 后片 樣本環(huán) 紅細胞稀釋液 自白細胞分配器 標本入口 白細胞稀釋液 前片 紅細胞測定樣本段 反沖液出口 標本吸入示意圖 血液分配示意圖 回沖示意圖圖6. 旋轉(zhuǎn)閥工作原理示意圖四、血液分析各參數(shù)的結(jié)果來源1．白細胞檢測WBC： 由儀器直接檢測；LYM%： 由直方圖、散點圖導出；LYM： LYM = LYM%WBC；MONO%： 由直方圖、散點圖導出；MONO： MONO = MONO%WBC；NEU%： 由直方圖、散點圖導出；NEU： NEU = NEU%WBC；EOS%： 由直方圖、散點圖導出；EOS： EOS = EOS%WBC；BASO%： 由直方圖、散點圖導出；BASO： BASO = BASO%WBC；2．紅細胞檢測RBC： 由儀器直接測量；HGB： 由儀器直接測量；HCT： HCT= RBCMCVMCV： 由RBC直方圖導出；MCH： MCH = HGB / RBC；MCHC： MCHC = HGB / HCT；RDWCV： 由RBC直方圖導出；RDWSD： 由RBC直方圖導出；3．血小板檢測PLT： 由儀器直接檢測；MPV： 由直方圖導出；PCT： PCT = PLTMPV；PDW： 由直方圖導出；PLCR： 由直方圖導出。五、血液分析儀的技術發(fā)展 從血細胞分析儀誕生至今，新技術不斷被采用。從Coulter原理發(fā)展到白細胞屋分類技術，僅僅用了五十年不到的時間。隨著科學技術的發(fā)展，血液分析儀也將在性能、功能、外觀等方面不斷得到發(fā)展。1．檢測項目不斷增加： 最初的Coulter A型只能測RBC。到目前，可測量十幾個、二十幾個參數(shù)的儀器已經(jīng)成為血液分析儀的主流。市場上所見到的某些新型高檔儀器可報告的參數(shù)多達30項以上。2．體積減小、功能增加： 隨著材料科學和微電子技術的發(fā)展，血液分析儀日趨小型化，增加了許多輔助功能，如：178。 病人數(shù)據(jù)的儲存和分析；178。 試劑自動加液系統(tǒng)；178。 試劑有效期記憶與保護；178。 儀器自身校正；178。 多功能質(zhì)量控制和預報；178。 儀器定期自動維護和清洗；178。 儀器故障的自身診斷等。3．白細胞分類不斷完善： 除了傳統(tǒng)的電阻抗原理以外，各類儀器紛紛采用了新的技術和工作原理對WBC進行分類。如激光技術、細胞化學技術、高頻傳導技術、電子技術等。這些技術的運用極大提高了儀器的分辨能力。4．儀器性能不斷提高： 自動化程度更高，操作更簡便； 工作效率更高，計數(shù)更快捷； 準確性、重復性更好； 管道、小孔堵塞機率更低； 使用壽命更長。5．新技術不斷被采用： 三次計數(shù)； 延長計數(shù)； 浮球定量； 重疊校正； 脈沖編輯； 高精度分析； 血小板擬合及掃流技術； VCS技術； 鞘流技術； 燃燒電路與高壓反沖技術； 熱敏電阻； 防返流裝置Von Behrens感應器； 防攜帶污染與抗干擾技術。6．血液分析儀日趨智能化： 在出現(xiàn)異常結(jié)果時，有些儀器在顯示或打印結(jié)果時會出現(xiàn)直方圖含義性報告及其他警告符號，以幫助臨床醫(yī)生盡快作出正確的判斷。儀器可以提示實驗結(jié)果是否正常，并能報告以下結(jié)果異常情況：178。 分布異常；178。 紅細胞大小不均；178。 異型淋巴細胞；178。 原幼細胞；178。 嗜堿性粒細胞異常；178。 嗜酸性粒細胞異常；178。 粒細胞增加；178。 粒細胞減低；178。 低色素性紅細胞；178。 未成熟粒細胞；178。 大血小板；178。 小體積區(qū)域干擾；178。 大和小體積干擾；178。 淋巴細胞增多；178。 淋巴細胞減少；178。 大紅細胞；178。 小紅細胞；178。 有核紅細胞；178。 血小板凝集；178。 小血小板；178。 大體積區(qū)域干擾等內(nèi)容。六、選擇血液細胞分析儀的原則 在用戶選購或業(yè)務人員向用戶推薦血液細胞分析儀時，應對儀器和用戶情況進行考察，以使用戶能選擇符合醫(yī)院技術現(xiàn)狀及發(fā)展方向的儀器。1．儀器的性能情況178。 儀器的選擇的一般標準： 準確性；精密度；攜帶污染率；總重復性；線形范圍；可比性。178。 儀器的選擇的特殊標準： 電腦運用；相關特殊技術的運用(第三部分、五、5.)；關鍵部件的性能、質(zhì)量等。178。 儀器的實用性： 對于一般醫(yī)院而言，儀器較理想的實用性標準可按如下表所示：項 目實 用 性 要 求進樣方式能同時進行預稀釋和全血自動進樣自動化程度全自動測試速度50個/小時故障率因儀器自身因素發(fā)生堵孔(2%)，電路部分，真空系統(tǒng)，管路系統(tǒng)，機械部分等故障率很低，耐用性強并有自身診斷功能數(shù)據(jù)庫病人樣本儲存100個以上，最好能進行簡單的統(tǒng)計處理，報告打印方式可選擇質(zhì)控質(zhì)控文件應大于5個，一般采用XB質(zhì)控并顯示LeveryJennings圖形檢測參數(shù)檢測參數(shù)在15個以上，白細胞三分類以上并至少能顯示、打印WBC、RBC、PLT等三種以上的直方圖抗干擾能力抗干擾能力強，環(huán)境適應能力強售后服務銷售商有較強的營銷、技術服務、維修能力2．用戶情況：178。 大型醫(yī)院： 高檔次、白細胞五分類的儀器較符合這類醫(yī)院的情況，(三級以上) 有的用戶甚至要求儀器具有網(wǎng)織紅細胞、巨幼細胞等檢測功能。178。 中型醫(yī)院： 高質(zhì)量的白細胞三分類儀器較符合這類醫(yī)院的要求。178。 小型醫(yī)院： 普及型儀器可以滿足這類醫(yī)院的需要。對醫(yī)院情況的了解還應包括：醫(yī)院的床位數(shù)、門診量、現(xiàn)有儀器的情況以及醫(yī)院的經(jīng)濟能力等。七、血液細胞分析儀的種類和規(guī)格 血液分析儀種類繁多。根據(jù)細胞計數(shù)原理大致可分為：178。 電阻抗法；178。 光散射法；178。 電阻抗+激光法；178。 電阻抗+射頻法；178。 電阻抗+激光+射頻+組織化學法。根據(jù)白細胞分類可分為：178。 無白細胞分類；178。 白細胞兩分類；178。 白細胞三分類；178。 白細胞五分類。在我國，有不少醫(yī)院已經(jīng)使用了相當先進的儀器進行血液一般檢測。到目前為止，有各種型號、各種檔次共二十多個系列的血液分析儀正在臨床使用之中。血液細胞分析儀的最新應用一、 概 述血液分析儀從面世至今已經(jīng)有50年的歷史了。在我國，各種型號的血液分析儀廣泛應用于醫(yī)院檢驗科之中。血液分析儀的功能，主要包括血細胞計數(shù)和分類,網(wǎng)織紅細胞計數(shù)等內(nèi)容。隨著現(xiàn)代物理學、化學、生物學及電子技術不斷發(fā)展并應用于細胞分析，結(jié)合計算機技術、自動化控制技術，現(xiàn)代血液分析儀在性能、準確性及適用性方面均取得了長足的進步。各大血液分析儀制造商均投入大量的資金和技術力量,開發(fā)更先進, 多功能的血液分析儀，而立足點主要集中在正常標本的準確性、異常標本檢出靈敏度以及準確定量、分析自動化及環(huán)保安全、數(shù)據(jù)處理與聯(lián)網(wǎng)輸出等方面。血液分析儀按照試劑添加的方法可分為半自動和全自動兩種。而實際工作中，人們更多地是按照白細胞分類將血液分析儀分為不分類、二分群（大細胞、小細胞群）、三分群（大、中、小細胞群）和五分類（淋巴、單核、嗜中性、嗜酸性、嗜堿性細胞）。一般來說，不分類和二分群儀器多為半自動，而三分群和五分類儀器則多為全自動?！“胱詣佣秩喝詣尤秩骸∪詣游宸诸愑字伞惓吮緶y定基本原理　　物理原理化學原理化學原理電阻抗電阻抗電阻抗激光散射光射頻（高頻波）特異性溶血酶/顆粒染色核酸染色檢測信號細胞體積細胞體積細胞體積細胞體積和內(nèi)部結(jié)構(gòu)內(nèi)部結(jié)構(gòu)排除干擾增強特異性核酸DNA/RNA染色測量項目WBC 大小分群WBC大中小分群WBC五分類Eo/BasoEo/5diff幼稚白細胞RBCRBCRBCRETNRBCPLTPLTPLT異常PLT（PLT凝集、巨大PLT、細胞碎片）在50年代初，即根據(jù)血細胞的非傳導性以對電解質(zhì)溶液中細胞顆粒通過計數(shù)小孔時所測的電阻變化來反應細胞的大小，被稱為電阻抗原理或庫爾特原理。自此，血細胞計數(shù)通過該原理的應用而實現(xiàn)了自動化，并在此后的幾十年間血液分析儀的均以此作為核心檢測原理。時至今天，市場上在供應和使用的所有半自動、全自動三分群血液分析儀檢測紅細胞、血小板、白細胞分群均按照電阻抗原理通過細胞大小來區(qū)分并計數(shù)。當然，不同儀器在自動化程度、參數(shù)、定量計數(shù)、檢測速度等方面均有不同以適應不同實驗室的實際需求。除了半自動和全自動之分以外，不分類儀器可提供78項參數(shù)，而半自動二分群儀器可提供15項參數(shù)，全自動三分群儀器更可提供1819項參數(shù)及WBC、RBC、PLT三個直方圖和各種報警信息。在分血定量技術上，一般大型、快速的三分群儀器均采用精確耐磨、取中段血的旋轉(zhuǎn)閥分血，如SYSMEX K4500、KX21N、Abbott CD1700等；而小型儀器多采用小血量的注射器或蠕動泵分血，如Beckman Coulter AcT diffSYSMEX pocH100i、ABX MICROS60等。檢測速度方面，適合小標本量實驗室的儀器，如SYSMEX pocH100i、Abbott CD1200每小時檢測約2530個標本，而市場上速度最快的三分群儀器SYSMEX K4500每小時可達80個標本，且可配置自動進樣裝置以滿足大標本量實驗室的需求。此外，為了滿足實驗室對操作方便性的要求，國產(chǎn)的邁瑞B(yǎng)C2000、日本SYSMEX的pocH100i、KX21N均可以實現(xiàn)全中文操作，使得操作人員更加方便地操作使用儀器。由于人體白細胞一共5種，即淋巴、單核、嗜中性、嗜酸性、嗜堿性，二分群和三分群均是以細胞大小作為區(qū)分的標準。正常人群情況下，嗜中性細胞和淋巴細胞最多且相差較大（其它三種相加也不超過10%），二分群即以此相分。而三分群是通過溶血素的脫核作用使細胞體積縮小，由此使單核細胞體積落在淋巴和嗜中性細胞之間，即俗稱的“三分類”。這種以細胞大小區(qū)分白細胞的方法并不精確，嗜酸性細胞和嗜堿性細胞在大細胞群中不能準確區(qū)分。SYSMEX公司的三分群儀器通過特殊的溶血素作用使其相對縮小而分入中間群細胞中，比起其他儀器在一定程度上提高了嗜酸性、嗜堿性細胞異常時的直方圖圖形鑒別靈敏程度，但是還不能根本解決。而且，中間群細胞中往往混有異型淋巴和幼稚粒細胞，使得實驗室必須對報警的標本保持相當高復檢率，否則即可能造成漏診。為了精確定量地檢測白細胞的五種成分，各種五分類血液分析儀開始采用不同于三分群儀器的檢測原理以探明除了細胞體積大小以外的信息，如形態(tài)、內(nèi)容物含量、密度等，從而能夠取得準確的分類結(jié)果。這些新的分類原理，主要包括物理學原理、化學原理和細胞生物學原理。在物理學原理中，除了電阻抗原理之外，用的最多的是光散射技術，以及高頻波技術（也有稱射頻波）。Beckman Coulter公司通過以上各種物理方法的綜合運用來檢測白細胞五項分類，稱為VCSO技術（Volune，Conductivity，Scatter, Opacity）。而Abbott公司則除了采用電阻抗原理檢測白細胞總數(shù)以外，還通過不同角度的散射光技術對五項分類進行檢測，稱為多角度偏振光散射分類（MAPSS）技術。而SYSMEX公司在采用電阻抗原理、射頻技術、光散射技術以外，為了提高在白細胞中比例最小的嗜堿性細胞的分類準確性，在白細胞分類檢測通道以外還單獨設置了嗜堿性細胞檢測通道，通過特異性的化學溶解方法只保留嗜堿性細胞，再通過不同角度的光散射法檢測。對于另外一種比例很小的嗜酸性細胞，還在分類通道中加入細胞顆粒染色以提高光散射信號的辨識能力。Bayer公司在五分類儀器中，除了光散射法以外，也加入了過氧化物酶染色技術進行細胞分類，對于嗜堿性細胞也設置了單獨的檢測通道和特殊溶解技術。對于正常五項分類結(jié)果準確性，各大血液分析儀廠家關注的焦點主要是數(shù)目最少的嗜酸性和嗜堿性細胞。此外，對于外周血中的幼稚成份，過去還依賴于顯微鏡鏡檢。然而，一般血液分析