小鼠脾臟細胞原代培養(yǎng)及觀察計數(shù)實驗報告-山東大學(xué)doc(編輯修改稿)
2025-08-14 02:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 。亞甲基藍是一無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。活細胞因具有較強的還原能力，能使亞甲藍從藍色的氧化型變成無色的還原型，故活的酵母細胞在用亞甲基藍染色后顯示無色；死亡酵母細胞或代謝緩慢的衰老酵母細胞，因無還原能力或還原能力極弱，使亞甲藍仍處于氧化態(tài)，故呈現(xiàn)藍色或淡藍色。3. 血球計數(shù)板的使用血球計數(shù)板是一塊特制的厚載玻片，載玻片上有4條槽而構(gòu)成3個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽分隔成兩半，每個半邊上面各有一個方格網(wǎng)(如圖3)。每個方格網(wǎng)共分9大格，其中間的一大格(又稱為計數(shù)室)常被用作微生物的計數(shù)。計數(shù)室的刻度有兩種：一種是大方格分為16個中方格，而每個中方格又分成25個小方格；另一種是一個大方格分成25個中方格，而每個中方格又分成16個小方格。但是不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個共同特點，即每個大方格都由400個小方格組成(圖4)。每個大方格邊長為1mm，則每一大方格的面積為1mm2，每個小方格的面積為1／400mm2，蓋上蓋玻片后，所以每個計數(shù)室(大方格)，每個小方格的體積為l／4000mm3。使用血球計數(shù)板直接計數(shù)時，先要測定每個小方格(或中方格)中微生物的數(shù)量，再換算成每毫升菌液(或每克樣品)中微生物細胞的數(shù)量。圖1 血球計數(shù)板的構(gòu)造（a、平面圖；b、側(cè)面圖）圖2 血球計數(shù)板網(wǎng)格的分區(qū)和分格【實驗用品】1. 材料小鼠脾臟；2. 試劑PBS緩沖溶液、培養(yǎng)液、臺盼藍、伊紅；3. 器材解剖剪、解剖鑷、眼科剪、眼科鑷、培養(yǎng)皿、紗布塊、吸管、橡皮頭、燒杯、移液槍、注射器、針頭、Eppendorf管（上述器具徹底清洗、消毒、烤干、包裝好）；倒置相差顯微鏡、酒精燈、酒精棉球、試管架、解剖板等?！静僮鞑襟E】A. 原代脾細胞培養(yǎng) 取材：取小白鼠一只，采用斷頭法處死，清水洗凈小白鼠并浸于75%酒精中滅菌3m
規(guī)章制度相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1