小鼠脾臟細(xì)胞原代培養(yǎng)及觀察計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告-山東大學(xué)doc-免費(fèi)閱讀
【正文】 ）B. 細(xì)胞死活鑒定結(jié)果：C. 細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果：用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，分別計(jì)算了紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域的五個(gè)小方格，計(jì)數(shù)結(jié)果如下：項(xiàng)目12345細(xì)胞總數(shù)715151219活細(xì)胞數(shù)588912每個(gè)中格平均細(xì)胞總數(shù)為13平均活細(xì)胞數(shù)為 8活細(xì)胞率=活細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)100%=42/68100%=%細(xì)胞密度=中格平均活細(xì)胞數(shù)510000稀釋倍數(shù)=851000010=10^6/ml【注意事項(xiàng)】 小鼠一定要將血放干凈并且在酒精中充分浸泡3min，防止雜菌污染無(wú)菌操作臺(tái)； 為近一步保證無(wú)菌操作臺(tái)的無(wú)菌環(huán)境，可在玻璃擋板口點(diǎn)一酒精燈，一般操作都在酒精燈火焰旁操作； 取小鼠脾時(shí)注意保持其完整，注入緩沖液要慢而準(zhǔn)且適量，不要撐破脾臟，保證細(xì)胞分散游離出來(lái)，也不能使游離的細(xì)胞中含有塊兒狀物質(zhì)； ～，其中加有酚酞，正常狀況細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程代謝物使PH下降，培養(yǎng)液的顏色改變呈黃色，因此可通過(guò)培養(yǎng)液顏色變化初步判斷細(xì)胞生長(zhǎng)狀況； 生長(zhǎng)狀況良好的細(xì)胞膜和核完整，細(xì)胞質(zhì)透明，而細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)較多顆粒狀或空泡證明細(xì)胞衰老。取上述離心后的Eppendorf管，在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)棄去上清液，用“槍（200μl）”吸取塑料皿中的培養(yǎng)液400ul，加入棄去上清液的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細(xì)胞，然后吸取200ul脾細(xì)胞懸液接種于上述塑料培養(yǎng)皿中，混勻，然后放入37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。計(jì)數(shù)室的刻度有兩種：一種是大方格分為16個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成25個(gè)小方格；另一種是一個(gè)大方格分成25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格。② 代謝上的差異：活細(xì)胞中新陳代謝作用強(qiáng)，細(xì)胞內(nèi)的酶具有較強(qiáng)的活性和還原能力。細(xì)胞培養(yǎng)的意義:具有其他生物技術(shù)無(wú)可比擬的優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)條件易改變和
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