gb18466-xxxx醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放要求doc(編輯修改稿)
2024-08-11 14:12 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 燥滅菌箱。C1．3 培養(yǎng)箱：37℃。C1．4 恒溫水浴箱。C1．5 電爐。C1．6 天平。C1．7 滅菌平皿。C1．8 滅菌刻度吸管。C2 培養(yǎng)基和試劑C2．1 乳糖—膽鹽培養(yǎng)基：同附錄B2．1。C2．2 伊紅美蘭培養(yǎng)基：同附錄B2．2。C2．3 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液：同附錄B2．3。C2．4 革蘭氏染色液，同附錄B2．4。C3 檢驗(yàn)程序C3．1 初發(fā)酵試驗(yàn)：按圖C1所示將污泥稀釋，分別將污泥樣品接種于盛有10mL乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管中(內(nèi)有小倒管)。再將已接種的四支試管置于44℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h。圖C1 污泥的稀釋和接種示意圖C3．2 平板分離：經(jīng)24h培養(yǎng)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的發(fā)酵管培養(yǎng)液分別劃線接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基上。置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h。挑選符合下列特征的菌落，進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，鏡檢?！ ∫良t美蘭培養(yǎng)基上的菌落色澤：深紫黑色，具有金屬光澤的菌落；紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落；淡紫紅色，中心色較深的菌落。C3．3 復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分再接種于內(nèi)有倒管的乳糖發(fā)酵管中，置于44℃恒溫箱培養(yǎng)24h。有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實(shí)有糞大腸菌群存在。表C2 糞大腸菌值檢索表(接種總量1．111g)C4 檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告 根據(jù)經(jīng)證實(shí)的糞大腸菌群陽性管數(shù)，按表C2報(bào)告糞大腸菌值。附 錄 D(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水及污泥中沙門氏菌的檢驗(yàn)D1 儀器和設(shè)備D1．1 高壓蒸汽滅菌器。D1．2 干燥滅菌箱。D1．3 培養(yǎng)箱。D1．4 恒溫水浴箱。D1．5 電爐。D1．6 天平。D1．7 滅菌平皿。D1．8 滅菌刻度吸管。D2 培養(yǎng)基和試劑D2．1 亞硒酸鹽(SF)增菌液D2．1．1 成分 胰蛋白胨(或多價(jià)胨) 10g 磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 16g 磷酸二氫鈉(NaH2PO4) 2．5g 乳 糖 4g 亞硒酸氫鈉 4 g 蒸餾水 1 000mLD2．1．2 制法 除亞硒酸氫鈉外，將以上各成分放于蒸餾水中，加熱溶化。再加入亞硒酸氫鈉，待完全溶解后，調(diào)整pH為7．0～7．1。分裝，于流通蒸汽滅菌器中滅菌15min備用。D2．2 SS培養(yǎng)基D2．2．1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基D2．2．1．1 成分 牛肉膏 5 g 示胨 5 g 三號(hào)膽鹽 3．5 g 瓊脂 17 g 蒸餾水 1 000mLD2．2．1．2 制法 將牛肉膏、示胨和膽鹽溶解于400mL蒸餾水中，將瓊脂加入600 mL蒸餾水中，煮沸使其溶解，再將二者混合，121℃高壓滅菌15min，保存?zhèn)溆?。D2．2．2 完全培養(yǎng)基D2．2．2．1 成分 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 1 000 mL 乳糖 10 g 檸檬酸鈉 8．5 g 硫代硫酸鈉 8．5 g 10％檸檬酸鐵溶液 10mL 1％中性紅溶液 2．5 mL 0．1％煌綠溶液 0．33 mLD2．2．2．2 制法 加熱溶化基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按比例加入上述染色液以外的各成分，充分混合均勻，調(diào)整pH為7．0，加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板?！ ∽ⅲ褐坪玫呐囵B(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存于冰箱內(nèi)于18h內(nèi)使用?；途G溶液配好后應(yīng)在10天以內(nèi)使用。D2．3 亞硫酸鉍瓊脂(BS) D2．3．1 成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 5 g 葡萄糖 5 g 硫酸亞鐵 0．3 g 磷酸氫二鈉 4 g 煌綠 0．025 g 檸檬酸鉍銨 2 g 亞硫酸鈉 6 g 瓊脂 18～20 g 蒸餾水 1 000 mLD2．3．2 制法 將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中；將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解；將瓊脂于600 mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80℃。將前三種溶液混合，補(bǔ)充蒸餾水至1 000mL，調(diào)整pH為7．5，加0．5％煌綠水溶液5 mL，搖勻。冷至50～55℃，傾注平皿?！ ∽ⅲ捍伺囵B(yǎng)基不需高壓滅菌。應(yīng)在臨用前—天制備，貯存于室溫暗處，超過 48 h 不宜使用。D2．4 三糖鐵瓊脂(TSＩ)D2．4．1 成分 蛋白胨 20g 牛肉膏 5 g 乳糖 10g 蔗糖 10g 葡萄糖 1 g 氯化鈉 5 g 硫酸亞鐵銨 0．2 g 硫代硫酸鈉 0．2g 瓊脂 12 g 酚紅 0．025 g 蒸餾水 1 000 mLD2．4．2 制法 將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，調(diào)pH為7．4。加入瓊脂，加熱煮沸，再加A．0．2％酚紅水溶液12．5 mL，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15 min。放置高層斜面?zhèn)溆谩2．4．3 沙門氏菌屬診斷血清D3 檢測程序D3．1 樣品處理和增菌 污水：取250mL污水，用無菌紗布或脫脂棉進(jìn)行初濾，然后再用濾膜進(jìn)行抽濾。將初濾后的紗布或脫脂棉和濾膜，放入到盛有100mL左右的單倍SF增菌液的三角燒瓶中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24 h?！ ∥勰啵河脺缇追Q取污泥30g，放入滅菌容器內(nèi)，加入300mL滅菌水，充分混勻制成1：10混懸液。吸取上述1：10混懸液100mL，加于100mL雙料亞硒酸鹽(SF)增菌液內(nèi)，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24 h。D3．2 平板分離 取上述增菌培養(yǎng)液，分別接種SS平板和BS平板，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24～48h。觀察各平板上生長的菌落特征。D3．3 挑選菌落 挑取在SS平板上呈無色透明或中間有黑心，直徑1～2 mm的菌落；挑取在BS平板上呈黑色有金屬光澤的菌落或灰綠色的菌落?！ ∶總€(gè)平板最少挑取5個(gè)以上168。疑腸道病原菌菌落，轉(zhuǎn)種三糖鐵培養(yǎng)基中，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18～24 h。D3．4 生化試驗(yàn)及血清學(xué)檢驗(yàn) 在三糖鐵培養(yǎng)基中，如不發(fā)酵乳糖，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，一般產(chǎn)生
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