正交設(shè)計(jì)優(yōu)化活菌型乳清飲料(編輯修改稿)
2025-07-27 06:34 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 司醫(yī)療設(shè)備101A1型電熱鼓風(fēng)干燥箱 上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠HH2數(shù)顯恒溫水浴鍋 潮州凱普生物儀器有限公司PHS3D pH計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司JY2502電子分析天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司LDZX501LB立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠SWCJ16μ雙人單面凈化工作臺(tái) 蘇州凈化設(shè)備有限公司BCD222E4型冰箱 TCL集團(tuán)股份有限公司 方法 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)主要影響因素為接種量、發(fā)酵溫度、菌種比例、乳清濃度,采用4因素3水平的正交表L9(34), 各因素和水平的選取如表1所示。表1 乳清發(fā)酵液正交試驗(yàn)因素水平Table1 Whey fermentation factor level orthogonal因素及水平菌種比例（A）發(fā)酵溫度（B）乳清濃度（C）接種量（D）11:2:1（::）35℃3%5%21:2:1（::）38℃4%7%31:2:1:1(:::)42℃5%9%表2 乳清發(fā)酵飲料配比方案正交實(shí)驗(yàn)計(jì)劃表Table2 Whey fermented beverages orthogonal matching program schedule試驗(yàn)號(hào)菌種比例（A）發(fā)酵溫度（B）乳清濃度（C）接種量（D）11:2:1（::）35℃3%5%21:2:1（::）38℃4%7%31:2:1（::）42℃5%9%41:2:1（::）35℃4%9%51:2:1（::）38℃5%5%61:2:1（::）42℃3%7%71:2:1:1(:::)35℃5%7%8 1:2:1:1(:::)38℃3%9%91:2:1:1(:::)42℃4%5%按上述正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)計(jì)劃表進(jìn)行發(fā)酵試驗(yàn)。 理化指標(biāo)的測(cè)定 pH值測(cè)定[11]用pHS3D型pH計(jì)直接測(cè)定發(fā)酵后的pH值 活菌數(shù)測(cè)定[12]用稀釋平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定發(fā)酵后的活菌數(shù)在無(wú)菌條件下吸取樣品lmL，轉(zhuǎn)移至9mL無(wú)菌水中，將加有樣品的無(wú)菌水搖勻，再?gòu)闹形mL轉(zhuǎn)移至另一無(wú)菌水中(9mL)，此過(guò)程依次重復(fù)，直至稀釋到所需濃度。吸取一定濃度的菌液1mL涂布在平皿上，35℃培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)菌落數(shù)。樣品菌數(shù)=菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 酸度（滴定酸度）的測(cè)定[13]吸取5mL已攪拌均勻的試樣，置于150 mL錐形瓶中，加40 mL新煮沸放冷至40℃的水，混勻，然后加人5滴酚酞指示液。消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液毫升數(shù)乘以20，即為酸度(0T)。連續(xù)滴定兩次，取平均值。 mL。 氨基氮的測(cè)定甲醛滴定法[14]，加水至刻度，加60mL水,開(kāi)動(dòng)磁力攪拌器。＝，記錄消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)，可計(jì)算總酸含量。加10mL甲醛溶液于燒杯中混勻。同時(shí)取80mL蒸餾水，，做試劑空白試驗(yàn)。結(jié)果計(jì)算：式中 X —樣品中氨基氮的含量（g/100mL） V1—測(cè)定用樣品稀釋液加入甲醛后消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（mL）V2—試劑空白試劑加入甲醛后消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（mL）V3—樣品稀釋液取用量（mL）C —?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol﹒L1）14—氮的摩爾質(zhì)量（g﹒mol1） 乳糖測(cè)定（鄰甲基苯胺法）(1) 乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作① 取干凈試管6支，按表3加入各溶液；② 將各試管內(nèi)溶液搖勻，套上試管帽，置于沸水浴中加熱10 min；③ 取出，用流水冷卻至室溫；④ 用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)635nm下比色，讀取吸光度，將結(jié)果填入表3中；⑤ 以吸光度為橫坐標(biāo)，乳糖的毫克數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：如圖1。表3 乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作Table3 The production of lactose standard curve管號(hào)123456乳糖/mg標(biāo)準(zhǔn)乳糖溶液/mL蒸餾水/mLOTB試劑/mL444444A635圖1 乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Picture1 Standard curve of lactose(2) 發(fā)酵液含糖量的測(cè)定① 稀釋：取2mL發(fā)酵液，先用蒸餾水定容到6mL，充分搖勻，然后取1mL倒入100mL容量瓶中，用蒸餾水沖洗水解液，合并洗液，并定容至刻度，充分搖勻；② 顯色：吸取稀釋后的水解液2mL，置于干凈試管中。再加入OTB試劑，充分搖勻，套上試管帽，置沸水浴加熱10min。取出后用流水冷卻至室溫；③ 比色：以2mL蒸餾水代替水解液作對(duì)照管，在635nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度；④ 計(jì)算：根據(jù)樣品的吸光度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的葡萄糖毫克數(shù)，然后按下列公式算出每100mL發(fā)酵液中的含糖量發(fā)酵液含糖量（g/100mL）= [ (AN)/ (V1000)] 100式中：A為由吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的糖毫克數(shù) N為樣品稀釋倍數(shù) V為測(cè)定時(shí)所取的樣品毫升數(shù)
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