正交設計優(yōu)化活菌型乳清飲料(編輯修改稿)
2025-07-27 06:34 本頁面
【文章內容簡介】 司醫(yī)療設備101A1型電熱鼓風干燥箱 上海市實驗儀器總廠HH2數(shù)顯恒溫水浴鍋 潮州凱普生物儀器有限公司PHS3D pH計 上海精密科學儀器有限公司JY2502電子分析天平 上海精密科學儀器有限公司LDZX501LB立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠SWCJ16μ雙人單面凈化工作臺 蘇州凈化設備有限公司BCD222E4型冰箱 TCL集團股份有限公司 方法 正交實驗設計主要影響因素為接種量、發(fā)酵溫度、菌種比例、乳清濃度,采用4因素3水平的正交表L9(34), 各因素和水平的選取如表1所示。表1 乳清發(fā)酵液正交試驗因素水平Table1 Whey fermentation factor level orthogonal因素及水平菌種比例（A）發(fā)酵溫度（B）乳清濃度（C）接種量（D）11:2:1（::）35℃3%5%21:2:1（::）38℃4%7%31:2:1:1(:::)42℃5%9%表2 乳清發(fā)酵飲料配比方案正交實驗計劃表Table2 Whey fermented beverages orthogonal matching program schedule試驗號菌種比例（A）發(fā)酵溫度（B）乳清濃度（C）接種量（D）11:2:1（::）35℃3%5%21:2:1（::）38℃4%7%31:2:1（::）42℃5%9%41:2:1（::）35℃4%9%51:2:1（::）38℃5%5%61:2:1（::）42℃3%7%71:2:1:1(:::)35℃5%7%8 1:2:1:1(:::)38℃3%9%91:2:1:1(:::)42℃4%5%按上述正交實驗設計計劃表進行發(fā)酵試驗。 理化指標的測定 pH值測定[11]用pHS3D型pH計直接測定發(fā)酵后的pH值 活菌數(shù)測定[12]用稀釋平板菌落計數(shù)法測定發(fā)酵后的活菌數(shù)在無菌條件下吸取樣品lmL，轉移至9mL無菌水中，將加有樣品的無菌水搖勻，再從中吸取lmL轉移至另一無菌水中(9mL)，此過程依次重復，直至稀釋到所需濃度。吸取一定濃度的菌液1mL涂布在平皿上，35℃培養(yǎng)48小時，計菌落數(shù)。樣品菌數(shù)=菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 酸度（滴定酸度）的測定[13]吸取5mL已攪拌均勻的試樣，置于150 mL錐形瓶中，加40 mL新煮沸放冷至40℃的水，混勻，然后加人5滴酚酞指示液。消耗的氫氧化鈉標準滴定溶液毫升數(shù)乘以20，即為酸度(0T)。連續(xù)滴定兩次，取平均值。 mL。 氨基氮的測定甲醛滴定法[14]，加水至刻度，加60mL水,開動磁力攪拌器。＝，記錄消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)，可計算總酸含量。加10mL甲醛溶液于燒杯中混勻。同時取80mL蒸餾水，，做試劑空白試驗。結果計算：式中 X —樣品中氨基氮的含量（g/100mL） V1—測定用樣品稀釋液加入甲醛后消耗氫氧化鈉標準溶液的體積（mL）V2—試劑空白試劑加入甲醛后消耗氫氧化鈉標準溶液的體積（mL）V3—樣品稀釋液取用量（mL）C —氫氧化鈉標準溶液的濃度（mol﹒L1）14—氮的摩爾質量（g﹒mol1） 乳糖測定（鄰甲基苯胺法）(1) 乳糖標準曲線的制作① 取干凈試管6支，按表3加入各溶液；② 將各試管內溶液搖勻，套上試管帽，置于沸水浴中加熱10 min；③ 取出，用流水冷卻至室溫；④ 用分光光度計在波長635nm下比色，讀取吸光度，將結果填入表3中；⑤ 以吸光度為橫坐標，乳糖的毫克數(shù)為縱坐標，繪制標準曲線：如圖1。表3 乳糖標準曲線的制作Table3 The production of lactose standard curve管號123456乳糖/mg標準乳糖溶液/mL蒸餾水/mLOTB試劑/mL444444A635圖1 乳糖標準曲線圖Picture1 Standard curve of lactose(2) 發(fā)酵液含糖量的測定① 稀釋：取2mL發(fā)酵液，先用蒸餾水定容到6mL，充分搖勻，然后取1mL倒入100mL容量瓶中，用蒸餾水沖洗水解液，合并洗液，并定容至刻度，充分搖勻；② 顯色：吸取稀釋后的水解液2mL，置于干凈試管中。再加入OTB試劑，充分搖勻，套上試管帽，置沸水浴加熱10min。取出后用流水冷卻至室溫；③ 比色：以2mL蒸餾水代替水解液作對照管，在635nm波長下測定吸光度；④ 計算：根據(jù)樣品的吸光度值，在標準曲線上查出相應的葡萄糖毫克數(shù)，然后按下列公式算出每100mL發(fā)酵液中的含糖量發(fā)酵液含糖量（g/100mL）= [ (AN)/ (V1000)] 100式中：A為由吸光度查標準曲線所得的糖毫克數(shù) N為樣品稀釋倍數(shù) V為測定時所取的樣品毫升數(shù)
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