【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 左室收縮和舒張功能均有顯著提高作用，主要作用靶點(diǎn)為細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)類、細(xì)胞防御與炎性反應(yīng)等相關(guān)基因[73〕。在家兔心肌缺氧復(fù)氧損傷模型，SalB具有負(fù)性頻率、增加冠脈流量和降低冠脈流出液中肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)水平的作用，可減輕心肌細(xì)胞損傷「74]。SalB具有減輕H2O2所致內(nèi)皮細(xì)胞的氧化性損傷，降低血管內(nèi)皮細(xì)胞表面細(xì)胞勃附分子表達(dá)和抑制中性粒細(xì)胞勃附的作用[75〕。. 抗肝、腎纖維化的作用：肝星狀細(xì)胞(HSC)的活化和增殖是肝纖維化形成和發(fā)展的關(guān)鍵因素。TGF一β1是促肝纖維化主要的細(xì)胞因子之一，HSC獲得增殖能力并活化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞，血小板生長(zhǎng)因子 (PDGF)是最強(qiáng)的刺激HSC增殖因子?；罨腍SC增殖加速并合成分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)沉積于肝臟形成肝纖維化。 SalB可抑制TGF一印及其受體蛋白的表達(dá)【76]，還可以通過(guò)抑制Hsc表面PDGF受體的表達(dá)而抑制PDGF或MDA兩種病理性因素導(dǎo)致的Hsc增殖[771，SalB在抑制Hsc細(xì)胞增殖的同時(shí)也降低了細(xì)胞內(nèi)氧化水平【78]。王清蘭等研究發(fā)現(xiàn)SalB能明顯減輕HgC12，長(zhǎng)期口服誘導(dǎo)腎間質(zhì)纖維化模型大鼠腎小管炎癥壞死與腎間質(zhì)膠原沉積，減輕腎組織輕脯氨酸(HyP)含量，降低異常增高的血清尿素氮與肌醉水平，升高谷膚甘肚 (GsH)含量，并降低MDA含量，其機(jī)制為增強(qiáng)機(jī)體抗氧化損傷能力與減輕脂質(zhì)過(guò)氧化損傷[79]。：SalB容易通過(guò)血腦屏障，并能選擇性擴(kuò)張腦血管而不影響外周血管，改善缺血區(qū)血流量而無(wú)竊血。. 腦缺血性疾病自由基生成：病理情況下如腦缺血時(shí)，細(xì)胞內(nèi)NO濃度顯著升高，達(dá)到能與SOD競(jìng)爭(zhēng)超氧化物的水平，因?yàn)镹O含有一個(gè)未配對(duì)電子，有超氧陰離子存在時(shí)，迅速與其反應(yīng)生成過(guò)氧亞硝酸根離子(ONOOˉ)后者質(zhì)子化后進(jìn)一步生成過(guò)氧亞硝酸(ONOOH)，并在酸性環(huán)境中分解為OH和NO2。其中，硝基過(guò)氧化物的直接氧化作用的毒性遠(yuǎn)大于OH的毒性，因?yàn)橄趸^(guò)氧化物不僅是一種很強(qiáng)的氧化劑，更重要的是它對(duì)反應(yīng)具有很高的選擇性，如過(guò)氧化亞硝基能夠直接氧化脂質(zhì)、DNA以及蛋白質(zhì)的琉基、鋅/硫中心等，上述反應(yīng)的速率大約是過(guò)氧化亞硝基分解產(chǎn)生OH速率的1000倍。由此可見(jiàn)，硝基過(guò)氧化物可能是NO途徑中產(chǎn)生的一種非常重要的OFR。缺血缺氧使浸潤(rùn)于腦血管上的白細(xì)胞激活，白細(xì)胞與血小板相互作用，代謝產(chǎn)生AA，進(jìn)一步代謝后產(chǎn)生OFR。此外，在缺血期，細(xì)胞內(nèi)堆積的乳酸能夠解離蛋白結(jié)合的FZe+，促使更多的OH產(chǎn)生。①丹酚酸具有很強(qiáng)的抗腦缺血作用，可縮小腦梗塞面積和腦水在同等劑量下，作用強(qiáng)于viEt。②丹酚酸在原代培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞上具有保護(hù)腦細(xì)胞免受低糖低過(guò)氧化氫，谷氨酸所致神經(jīng)細(xì)胞損傷的作用。③丹酚酸具有明顯的抗氧化作用，在體外能抗脂質(zhì)過(guò)氧化，清除氧陰離子及輕自由基，在體內(nèi)能抑制腦缺血后高氧化水平，減抗氧化物質(zhì)的損失。④丹酚酸能對(duì)抗NO的毒性抑制腦缺血后遲發(fā)性NO的升高，抑誘導(dǎo)性NOS的活性。⑤丹酚酸可抑制體內(nèi)血栓形成，選擇性抑制TXA2含量，從而提PGZIT/XAZ比值，改善缺血后體內(nèi)異常的凝血機(jī)制。⑥丹酚酸具有對(duì)抗大鼠腦突觸體谷氨酸釋放的作用，尤其是鈣非賴性過(guò)程，對(duì)減輕缺血性損傷有重要意義。⑦對(duì)腦能量代謝的影響:觀察SalB對(duì)腦缺血小鼠腦能量代謝變化的影響，發(fā)現(xiàn)在腦缺血早期，SalB可有通過(guò)降低腦缺血損傷時(shí)線粒體膜電位的升高、腦組織水腫，增加磷酸肌酸含量、腦能荷值、Na+K+ATPase、Ca2+ATPase的活性，從而穩(wěn)定線粒體膜電位，維持線粒體正常的功能和結(jié)構(gòu)，保證腦組織所需的能量代謝，緩解腦水腫，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞[80]。SalB對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠皮層神經(jīng)元缺糖缺氧損傷的實(shí)驗(yàn)表明，SalB通過(guò)維持細(xì)胞Ca2+穩(wěn)態(tài)，穩(wěn)定線粒體膜電位及降低細(xì)胞凋亡率，起到保護(hù)皮層神經(jīng)元的作用。⑧丹酚酸B腦缺血再灌注損傷腦水腫的影響: 腦水腫是腦缺血再灌注損傷的重要病理過(guò)程，分為細(xì)胞毒性、血管源性和間質(zhì)性3類，均表現(xiàn)為腦組織水分增加、體積增大、顱內(nèi)壓升高，是威脅中風(fēng)患者生命的嚴(yán)重并發(fā)癥之一。缺血性腦水腫為混合性腦水腫，缺血早期為細(xì)胞毒性水腫，其機(jī)制與神經(jīng)元或/和內(nèi)皮細(xì)胞的。缺血后數(shù)分鐘，缺血區(qū)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及其周圍的膠質(zhì)細(xì)胞即開始腫脹，持續(xù)腫脹引起血腦屏障破壞、毛細(xì)血管通透性增加。此時(shí)即由細(xì)胞毒性水腫過(guò)渡到血管源性水腫。缺血早期，鈣超載、Na+KATP酶和Ca2+Mg2+ATP酶活性下降、興奮性氨基酸的神經(jīng)毒作用均可使細(xì)胞內(nèi)滲透壓增高，水分進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水腫。隨后，促炎癥細(xì)胞因子、活性氧、AA、MMP等的過(guò)量產(chǎn)生損傷EC，造成BBB開放，此時(shí)即由細(xì)胞毒性水腫過(guò)渡到血管源性水腫。腦組織內(nèi)水分持續(xù)增多，聚集于腦間質(zhì)內(nèi)或聚集于神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，引起腦組織含水量增加，故腦含水量及腦指數(shù)的測(cè)定可反映腦水腫的程度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，腦缺血再灌注不同時(shí)間點(diǎn)，腦含水量與腦指數(shù)均顯著上升(P)。腦組織HE染色也可見(jiàn)隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)，腦皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)元水腫及壞死加重，間質(zhì)水腫，血管周間隙顯著增大。SalB組和Nim組腦含水量與腦指數(shù)下降，IR12h尤為明顯(P)，形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為神經(jīng)元水腫和血管水腫明顯減輕，神經(jīng)元壞死減少，表明應(yīng)用SalB和Nim能有效緩解缺血再灌后的腦水腫。⑨對(duì)腦缺血再灌注小鼠腦組織細(xì)胞因子含量的影響：現(xiàn)代研究認(rèn)為，炎癥反應(yīng)是腦缺血再灌注損傷的重要的病理過(guò)程。過(guò)度的炎癥反應(yīng)不僅影響局部的血液供應(yīng)，而且可以直接破壞組織結(jié)構(gòu)，是造成缺血腦組織損傷的主要原因之一。在腦缺血后一些具有免疫活性的細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞、多形核白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞均能產(chǎn)生細(xì)胞因子和粘附分子，而這些物質(zhì)反過(guò)來(lái)又能激活上述細(xì)胞，通過(guò)正反饋?zhàn)饔眉訌?qiáng)炎性反應(yīng)，引起血腦屏障通透性增加，導(dǎo)致腦水腫形成。SalB能夠減輕神經(jīng)細(xì)胞的水腫、壞死，可能與減少TXBILlβ、TNFα含量的釋放，以及粘附分子ICAMP選擇素的表達(dá)，從而維持了TXB2/6ketoPGF1α平衡，抑制了再灌后的炎癥反應(yīng)有關(guān)。SalB能夠減輕腦缺血再灌注損傷，其作用機(jī)制可能為:①通過(guò)抑制炎性細(xì)胞因子的活化和白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，從而維持血腦屏障的完整性，達(dá)到緩解腦水腫的作用。②通過(guò)維持血管活性物質(zhì)穩(wěn)態(tài)，起到改善微循環(huán)的作用。⑩對(duì)缺血神經(jīng)元及內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響:SalB能改善缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能，減少抗氧化酶的消耗，促進(jìn)自由基的清除，并減輕脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)[82]。增加缺血再灌注后bcl2表達(dá)，同時(shí)顯著降低bax表達(dá)，從而調(diào)節(jié)它們抗凋亡和促凋亡作用[83]。復(fù)制腦缺血再灌注模型，觀察SalB對(duì)腦缺血再灌注30min、 60min內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能、腦水腫等變化的影響，發(fā)現(xiàn)SalB在急性腦缺血早期可以起到改善內(nèi)皮細(xì)胞功能，緩解腦水腫的作用，初步表明維持缺血區(qū)微血管結(jié)構(gòu)和功能完整性對(duì)于干預(yù)腦缺血病理?yè)p傷進(jìn)程、促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)的重要意義。⑾對(duì)腦血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的影響：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是內(nèi)皮細(xì)胞特異性的有絲分裂原，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，提高血管通透性等生物學(xué)特性。腦缺血后，低氧可激活VEGF誘導(dǎo)大量新生血管形成，減少神經(jīng)元的凋亡和死亡。提高 VEGFmRNA表達(dá)，促進(jìn)新生血管形成，并能較好地抑制VEGF誘導(dǎo)血管通透性增加的作用[85]。綜上所述，SalB在多方面表現(xiàn)出藥理活性，尤其是它的抗氧化作用在心腦血管疾病的防治中具有重要意義。以上研究通過(guò)不同機(jī)制證明SalB對(duì)腦缺血再灌注有保護(hù)作用，對(duì)于防治腦缺血和老年癡呆等急慢性神經(jīng)退行性疾病具有良好的前景。四、氧化應(yīng)激知識(shí) 自由基概念? 自由基（Free Radical）是指獨(dú)立帶有不配對(duì)價(jià)電子（即奇數(shù)電子）的原子、分子、或化學(xué)基團(tuán)，因含有一個(gè)未成對(duì)電子而具有順磁性和很高的反應(yīng)活性。自由基都有一個(gè)對(duì)電子，具有強(qiáng)烈的配對(duì)傾向，所以大多數(shù)自由基都很活潑，很容易與其它分子或自由應(yīng)生成新的自由基，由此引發(fā)連鎖反應(yīng)。? 多數(shù)自由基反應(yīng)性很強(qiáng)，壽命很短，如羥基自由基的壽命只有106秒；但也有少數(shù)自由基反應(yīng)性不強(qiáng)，壽命較長(zhǎng)，并相當(dāng)穩(wěn)定，如多環(huán)芳烴自由基和醌類自由基以及自由基自旋標(biāo)記物(吡啶類自旋標(biāo)記物、吡咯啉類標(biāo)記物)等。? 生物體內(nèi)常見(jiàn)的自由基是氧自由基，是指含有氧且不配對(duì)價(jià)電子位于氧原子上的自由基。研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)自由基95％屬于氧自由基，它往往是其它自由基產(chǎn)生的起因。? 生物體自由基主要包括超氧陰離子自由基（O2）、羥自由基OH）、分子氧（O2）、單線態(tài)氧（1O2過(guò)氧化氫（H2O2）以及脂質(zhì)過(guò)氧化物（R、RO、ROO、ROOH）等，其中，O2形成最早，作用最強(qiáng)、毒性最大，ROOH鏈鎖反應(yīng)循環(huán)最持久（趙保路，1999；龐戰(zhàn)軍等，2000；方允中等，2002；鄭榮梁，2001）。自由基的產(chǎn)生途徑O2。，H2O2可以與?O2 在Fe 2+或Cu+存在下反應(yīng)生成OH?。, 反應(yīng)中有O2 生成。, 如輔酶Q的代謝產(chǎn)物可在氧化還原中生成半醌自由基, 后者將單電子交給O2生成O2 “呼吸爆發(fā)”：在補(bǔ)體、Ca 2+、白三烯或內(nèi)毒素等的刺激下，吞噬細(xì)胞的氧攝取量增加，其胞膜下NADPH 氧化酶活性增高, 將O2還原為O2 。:黃嘌呤氧化酶(XO)的前身是黃嘌呤脫氫酶, 存在于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi), 正常人只有10% 的XO形式存在, 90%為黃嘌呤脫氫酶(XD)。缺血時(shí)由于ATP 減少, 膜泵功能失靈, Ca2+依賴蛋白水解酶大量轉(zhuǎn)變XD為XO, 缺血時(shí)ATP不能用來(lái)釋放能量, 而且還依次降解為ADP、AMP 和次黃嘌呤, 結(jié)果黃嘌呤大量堆集。再灌注時(shí)，大量的分子氧隨血液進(jìn)入缺血組織，此時(shí)大量增加的黃嘌呤氧化酶在催化次黃嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)辄S嘌呤，進(jìn)而黃嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩岬膬刹椒磻?yīng)中都同時(shí)以分子氧為電子接受體， 從而產(chǎn)生大量的O2 和H2O2，后者再在金屬離子參與下形成OH?。因此，再灌注時(shí)組織內(nèi)O2等氧自由基大量增加。7. 兒茶酚胺的增加：交感腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)是肌體在應(yīng)激時(shí)的重要調(diào)節(jié)系統(tǒng)，在各種應(yīng)激情況下，此系統(tǒng)分泌大量的兒茶酚胺。兒茶酚胺一方面具有重要的代償調(diào)節(jié)作用，但另一方面過(guò)多的兒茶酚胺特別是它的氧化產(chǎn)物，往往又成為對(duì)機(jī)體有害的產(chǎn)物。實(shí)驗(yàn)表明，大量的異丙腎上腺素、去甲腎上腺素、腎上腺素均能損傷細(xì)胞。兒茶酚胺的氧化產(chǎn)物會(huì)損傷心肌。兒茶酚胺氧化能產(chǎn)生具有毒性的氧自由基。腎上腺素代謝產(chǎn)生腎上腺素紅的過(guò)程中有O2 的產(chǎn)生。8. 磷脂花生四烯酸途徑：胞漿Ca 2+激活磷脂酶A2，使膜磷脂降解，釋放花生四烯酸(AA), AA在環(huán)氧化酶的作用下依次生成PGEPGHPGI2等， 同時(shí)伴有自由基的產(chǎn)生；在5脂加氧酶的作用下，生成白三烯等，在12脂加氧酶作用下生成12HETE。脂質(zhì)過(guò)氧化氧自由基引起過(guò)氧化有一特點(diǎn), 即氧化為鏈鎖反應(yīng), 包括啟動(dòng)和蔓延兩個(gè)階段。PUFA（不飽和脂肪酸）分子結(jié)構(gòu)雙鍵上的氫原子易受氧自由基的攻擊, 奪取氫原子而形成脂自由基(R ?), R ?自發(fā)地與氧起反應(yīng)而形成脂過(guò)氧基(ROO?) 吸引一個(gè)氫原子而使另一分子PUFA過(guò)氧化, 從而形成一種穩(wěn)定的脂氫過(guò)氧化物(ROOH)及一分子脂自由基(R ?)。如此不斷循環(huán), 使許多分子過(guò)氧化。這種鏈鎖反應(yīng)很難自動(dòng)終止, 除非加入氧自由基捕捉劑方可終止反應(yīng)。脂氫過(guò)氧化物經(jīng)過(guò)過(guò)氧化物酶分解, 生成丙二醛(MDA)及戊烷等。細(xì)胞膜、線粒體、微粒體均富含PUFA, 在Fe+2 半胱氨酸作用下, 發(fā)生明顯的脂質(zhì)過(guò)氧化。氧化應(yīng)激與疾病氧化應(yīng)激概念：氧對(duì)于需氧環(huán)境下的生命是必不可缺的物質(zhì)。哺乳動(dòng)物的呼吸系統(tǒng)從大氣攝人的氧氣中80％～90％用于體內(nèi)線粒體的能量代謝過(guò)程，在三羧酸循環(huán)中，以4次脫氫的方式為后續(xù)的氧化磷酸化提供還原當(dāng)量(H+和e)，脫下的氫3次由煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)接受，1次由黃素腺苷二核苷酸(FAD+)接受，然后H+及e經(jīng)呼吸鏈(電子傳遞鏈)和ATP合成酶進(jìn)行氧化磷酸化。最后氧接受H+和e還原成H2O，并產(chǎn)生ATP。如果各種病理因素使呼吸鏈傳遞e的效能下降，氧化磷酸化過(guò)程減弱，ATP生成減少。機(jī)體正常的還原／氧化平衡狀態(tài)被破壞，可造成機(jī)體的代謝、功能紊亂。并且由于呼吸鏈傳遞e的效能降低，沒(méi)有足夠的e使氧還原生成H2O，而是生成多種活性氧分子。O2接受不同數(shù)量e后的4種還原產(chǎn)物，其中羥自由基(OH),超氧陰離子(),及過(guò)氧化氫(H2O2).為活性氧(reactive oxygen species，ROS)。E 2e，2H O2——— (超氧陰離子自由基) O2———H2O2 (過(guò)氧化氫) 3e，3H 4e，4HO2——— H2O+OH(羥自由基) O2———2 H2O 機(jī)體中有作為清除系統(tǒng)的超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)，過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化還原蛋白(peroxyredoxln)等抗氧化酶和谷胱甘肽、硫氧還蛋白、維生素A、維生素E等低分子抗氧化物來(lái)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。但若因某種因素使得活性氧的生成超過(guò)清除系統(tǒng)，即達(dá)