沈陽(yáng)藥科大學(xué)成人教育本科畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2024-07-25 15:41 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 置：小鼠 MDTB 實(shí)驗(yàn)裝置為一不銹鋼制成的橢圓形跑道，總長(zhǎng) 600 cm，寬 40 cm，高 30 cm，包括兩個(gè) 200 cm 長(zhǎng)的直段，兩頭各連接一個(gè) 40 cm 的彎曲段，直跑道中間用隔墻（200306 cm3）分開。實(shí)驗(yàn)時(shí)將裝置抬高 80 cm，以便實(shí)驗(yàn)者容易操作大鼠，同時(shí)盡量減少小鼠與大鼠的接觸。跑道底部每 20 cm 作一劃線標(biāo)記，以便測(cè)量距離。裝置上方有一攝像機(jī)，用于記錄小鼠的活動(dòng)。小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)裝置：小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)裝置為 60 cm 60 cm 35 cm 有機(jī)玻璃箱，頂部敞開。箱底部畫有 15 cm 15 cm 的方格。裝置上方有一攝像機(jī)，用于記錄小鼠的活動(dòng)。 小鼠對(duì)天敵防御反應(yīng)的實(shí)驗(yàn) (the mouse defense test battery) [20]昆明種小鼠，雄性，初始體重 18 177。 2 g，單籠飼養(yǎng) 30 天。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠按體重分為 8 組，每組 12 只。實(shí)驗(yàn)前 60 min 灌胃給藥，給15 / 32藥容積均為 10 ml/kg。 給藥組分別為(A) Tween80 Distilled Water 組；(B) DZ mg/kg 組；(C) DZ mg/kg 組；(D) DZ mg/kg 組；(E) DAP 30 mg/kg 組；(F) DAP 60 mg/kg 組；(G) DAP 120 mg/kg 組；（H）DAP 240 mg/kg 組。實(shí)驗(yàn)前 1 天將動(dòng)物移至實(shí)驗(yàn)室，使之熟悉環(huán)境。實(shí)驗(yàn)于每天 9：00～15：00 進(jìn)行，以紅燈照明。實(shí)驗(yàn)步驟如下所示：（1） 預(yù)實(shí)驗(yàn)(pretest)(第 13 min)：小鼠置于跑道熟悉 3 min，記錄無(wú)天敵時(shí)其越線、倚墻站立、及跳躍逃避等的次數(shù)。（2） 天敵回避實(shí)驗(yàn)(predator avoidance test)(第 4－6 min)：3 min 熟悉期結(jié)束后，緊接著在跑道放一只深麻醉的大鼠，并用手使之以大約 m/s 的速度朝小鼠移動(dòng)，當(dāng)要接近小鼠或小鼠跑開時(shí)則停止移動(dòng)。如果小鼠逃走，則記錄回避距離(avoidance distance, 從大鼠到小鼠逃跑點(diǎn)之間的距離)，重復(fù)測(cè)量 5 次，記錄總的回避距離和回避次數(shù)。（3） 追趕/逃跑實(shí)驗(yàn)(chase/flight test)(第 7－8 min)：使大16 / 32鼠以大約 2 m/s 的速度朝小鼠移動(dòng)，記錄追趕小鼠 15 m 所花的時(shí)間。由此計(jì)算出總的逃跑速度(m/s)。另外，記錄下列參數(shù)：停的次數(shù)(stop 運(yùn)動(dòng)暫停)、調(diào)頭次數(shù)(reversal 小鼠停下，將頭調(diào)回朝大鼠)、反跑次數(shù)(orientation 小鼠停下朝相反的方向跑)。這三個(gè)指標(biāo)代表小鼠對(duì)危險(xiǎn)的評(píng)估(risk assessment)。（4） 直通道實(shí)驗(yàn)(straight alley test)(第 911 min)：將跑道的兩端的門關(guān)閉成直通道，在這個(gè)不可逃避的跑道中使大鼠在距小鼠 m 處放置 15s，記錄小鼠不動(dòng)時(shí)間(immobility)。最后將大鼠與小鼠接觸，記錄每次接觸時(shí)小鼠咬(biting)、驚叫(vocalization)、直立姿勢(shì)(upright posture)和跳躍攻擊(jumping)等行為，即防御行為，重復(fù)接觸三次，每次 5 s，取平均值。（5） 關(guān)聯(lián)防御實(shí)驗(yàn)(posttest)(第 1214 min)：天敵撤離后再次將小鼠置于跑道中活動(dòng) 3 min，記錄其越線、倚墻站立、及跳躍逃避等的次數(shù)。 小鼠自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn) (the lootor activity test)[21]17 / 32昆明種小鼠，雄性，體重 25 177。 2 g，隨機(jī)分為 4 組，每組 10 只。給藥組分別為(A) Tween80 Distilled Water 組； (B) DAP 30 mg/kg 組；(C) DAP 60 mg/kg 組；(D) DAP 120 mg/kg 組。各組均灌胃給藥。給藥前觀察記錄小鼠的一般行為、瞳孔、姿勢(shì)、步態(tài)、有無(wú)流涎、肌顫等情況，并將小鼠放入自主活動(dòng)箱內(nèi)記錄其在 5 min 內(nèi)的活動(dòng)次數(shù)，用同樣方法測(cè)定給藥后 60、90、120 min 的自主活動(dòng)次數(shù)。測(cè)定給藥前自發(fā)活動(dòng)時(shí)，先將小鼠放入自主活動(dòng)箱中熟悉環(huán)境 5 min，然后觀察5 min，即為該時(shí)間點(diǎn)的自主活動(dòng)次數(shù)。3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 DAP對(duì)小鼠天敵防御反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的影響 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，與空白對(duì)照組相比，DAP各劑量和DZ 各劑量對(duì)實(shí)驗(yàn)前3 min小鼠的越線數(shù)，站立次數(shù)，逃脫行為（跳躍和爬墻） ，沒有顯著性影響。表 1 Comment [專專專專1]: 圖、表中統(tǒng)一用中文。18 / 32DrugDose (mg/kg, ig)Line Crossings Rearing Escape attemptsVeh 177。 177。 177。DZ 1 177。 177。 177。2 177。 177。 177。4 177。 177。 0177。0DAP 30 177。 177。 177。60 177。 177。 177。120 177。 177。 0177。0240 177。 177。 177。Data represent mean 177。 SEM.. n=1112. 天敵回避實(shí)驗(yàn)由圖1可知，在天敵回避實(shí)驗(yàn)中，DZ（4 mg/kg）及DAP（60、1240 mg/kg）均可以顯著性縮短小鼠對(duì)天敵的逃避距離，DZ（4 mg/kg）可以顯著減少小鼠對(duì)天敵的逃避次數(shù)，但DAP對(duì)逃避次數(shù)沒有影響。19 / 32 Avoidance Distance0501001502000 1 2 4 30 60 120 240Avoidance Distance(cm) Veh Diazepam(mg/kg) DAP(mg/kg)******* aNumber of Avoidance0360 1 2 4 30 60 120 240Number of Avoidance* Veh
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