魚腥草莖在不同時期多糖含量比較學士學位論文(編輯修改稿)
2025-07-19 08:58 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 以致細胞壁被破壞，植物內(nèi)的物質(zhì)成分會釋放出來從而會提高相應物質(zhì)的提取率。除此之外，超聲波還有些像熱效應，乳化等等，也會相應的提高物質(zhì)的提取率[5,15]。2 材料儀器和實驗方法 . 1 材料的準備和處理魚腥草是分不同時期（2012年4月20日,5月3日，5月28日，6月10日）在黃山學院南區(qū)內(nèi)挖得，洗凈后將根莖葉分開取莖，放入干燥相中恒溫70℃干燥24小時，直至恒重，然后在粉碎機中粉碎放置在干燥的地方備用。 實驗試劑95%乙醇（上海振企化學試劑有限公司），濃硫酸（上海振企化學試劑有限公司），葡萄糖（天津博迪化工股份有限公司），石油醚（新隴化工股份有限公司），乙醚（揚州滬寶化學試劑有限公司），蒸餾水，蒽酮（上?？曝S化學試劑有限公司）。 實驗器材微型植物試樣粉碎機 (金壇市杰瑞爾電器有限公司 ) ；電子天平（上海越平科學儀器有限公司）；紫外可見分光光度計（上海奧普勒儀器有限公司）；超聲波清洗機（曙峰企業(yè)制造）；索氏提取器（上海新嘉電子有限公司）；電熱恒溫鼓風干燥箱（上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市杰瑞爾電器有限公司）；RE52AA旋轉蒸發(fā)儀(上海亞榮有限公司產(chǎn)品)；粉碎機；試管；量筒；燒杯；容量瓶等。 實驗方法. 1 多糖含量測定原理利用苯酚濃硫酸法測定多糖的含量[3]，因多糖在濃硫酸作用下，分子內(nèi)脫水生成羥甲基糠醛或者羥甲基糠醛，其與苯酚縮合生成一種橙紅色化合物，在490nm波長下有最大的吸收峰，所以可以用比色法在此波長下測定吸光度[2]，進而算出多糖的含量。此法靈敏度高，基本不受蛋白質(zhì)的存在干擾。而本次試驗的基本流程是：材料的脫脂脫色，干燥，精確稱量，加酒精，超聲波浸提，水浴加熱，靜置，過濾取上清液，在旋轉蒸發(fā)儀中蒸發(fā)濃縮，靜置，離心，取沉淀物加蒸餾溶解水并加熱，過濾去除雜質(zhì)，然后醇析離心，得到粗多糖，再定溶，最后按照苯酚濃硫酸法測相應多糖的吸光度A值[2,15]，進而得出結論。 標準曲線的繪制[3,9],然后再取1ml定容至10ml容量瓶中。取11支試管按0到11編號，0號作對照；1,；3,；5,；7,；9,；；%（濃硫酸加入一定要緩慢），搖勻，靜置30分鐘。最后以0號試管為參照，在490nm波長下測吸光度A值[3,9]。做好登記，以橫坐標為糖含量，吸光度A值為縱坐標，繪制標準曲線并進行線性回歸的的求解見圖31。 魚腥草粉末的脫脂脫色將不同時期的魚腥草莖用電子天平精確稱各取6包，每包1g，再稱任一時期的材料9包，均用濾紙包好并做好標記。然后在索氏提取器中用石油醚脫脂脫色4小時，提取溫度恒定在70℃。然后取出放入電熱恒溫鼓風干燥箱中在70℃下干燥12個小時以上，使之達到恒重。之后放入干燥箱中作為實驗材料。脫脂脫色對其多糖的提取是很重要的步驟，脂類和色素的存在是很影響多糖的測定的，所以脫脂脫色要充分。 單因子實驗每次實驗均取同一時期的“”中的材料四包，即每次取同一時期的4克，分別放入4個試管中，按下圖表21，表22，表23和表24中依次編號，每支試管中均加20ml的乙醇，并且按下面表格添加試劑和進行實驗[13,15]。表21 乙醇濃度的選擇實驗table 21 Choice experiment ethanol concentration實驗條件試管編號乙醇濃度60%70%80%90%水浴溫度70℃70℃70℃70℃水浴時間30min30min30min30min超聲波浸提時間30min30min30min30min表22 水浴溫度選擇的實驗Table 22 bath temperature selection experiment實驗條件試管編號乙醇濃度70%70%70%70%水浴溫度60℃70℃80℃90℃水浴時間30min30min30min30min超聲波浸提時間30min30min30min30min表23 水浴時間選擇的實驗Table 23 bath time selection experiment實驗條件試管編號乙醇濃度70%70%70%70%水浴溫度60℃70℃80℃90℃水浴時間30min60min90min120min超聲波浸提時間30min30min30min30min表24 超聲波浸提時間的選擇實驗table 24 Choice experiment ultrasonic extraction time實驗條件試管編號乙醇濃度70%70%70%70%水浴溫度60℃70℃
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