【文章內(nèi)容簡介】 3 38 ? 移植性腫瘤模型： ? 方法 ： 1. 實體瘤移植 腫瘤細胞皮下接種 —— 710d處死荷瘤動物 —— 選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織 ——23mm3+生理鹽水或其它營養(yǎng)液 —— 無菌套管針抽吸 —— 接種同種受體動物右前腋窩皮下。 2. 腹水瘤移植： 腫瘤細胞皮下接種 —— 710d處死荷瘤動物 —— 取腹水 —— 含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當濃度 —— 腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實體瘤）。 2022/6/23 39 ? 評價 : 1. 同時接種同樣量的瘤細胞，生長速度較一致，個體差異較小。 2. 接種成活率近 100%。 3. 對宿主影響相類似。 4. 可連續(xù)傳代，試驗周期短，條件易于控制。 5. 主要問題是 宿主對移植物產(chǎn)生免疫排斥反應 。 2022/6/23 40 第四節(jié) 心血管疾病動物模型 高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 2022/6/23 41 高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模機制： 1. 動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。 2. 高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥 甲基硫氧嘧啶 或 丙基硫氧嘧啶 可進一步加速病變的形成。 2022/6/23 42 ? 造模方法 : ： 用 1％ ～ 2％ 高脂食物飼喂 6個月以上即可形成動脈粥樣硬化病變 。 評價： 形成動脈粥樣硬化 病變特點及分布 都與人類近似 。 ： 選用 ～ ， 3～ 6歲的恒河猴飼喂高脂飼料 (50％ 麥粉 、 8％ 玉米粉 、 8％ 麥麩 、 1％ 膽固醇 、 8％ 蛋黃 、 8％ 豬油 、 17％ 白糖及適量的小蘇打和食鹽 ） 。 1個月后造成猴的實驗性高血脂癥 。 血清膽固醇較正常時升高 ～ 。 評價： 猴的膽固醇代謝 、 血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似 ， 是較理想的模型 。 2022/6/23 43 3. 兔： 選用 2kg左右體重 ， 每天膽固醇 ， 4個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至 ， 3個月 出現(xiàn)斑塊；增至 ， 可縮為 2個月 。 在飼料中加入 15％ 蛋黃粉 、％ 膽固醇 和 5%豬油 ， 3周后 ， 將膽固醇減去再喂 3周 ，可使斑塊發(fā)生率達 100％ ， 血清膽固醇可升高至 2022mg%。 評價： 對喂飼膽固醇非常敏感 ， 在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變 。 因為兔對外源性膽固醇的 吸收率 可高達 75％ ～90％ ， 對高血脂的 清除能力低 (靜脈注射膽固醇后 ， 高脂血癥可持續(xù) 3～ 4天 )。 但兔作模型不夠理想 ， 主要表現(xiàn)為 血源性泡沫細胞增多 ， 且 病變分布 與人的病變也有差異 。 2022/6/23 44 ： 配方一飼料 (1％ 4％ 膽固醇 、 10％ 豬油 ，%甲基硫氧嘧啶 、 89％ 86％ 基礎飼料 )， 喂服7～ 10天 。 可形成高膽固醇血癥 。 配方二飼料 (10％ 蛋黃粉 、 5％ 豬油 、 ％膽鹽 、 85％ 基礎飼料 )， 喂服 7天可形成高膽固醇血癥 。 評價： 飼養(yǎng)方便 、 抵抗力強 、 食性與人相近 。 所形成的病理改變與人早期者相似 ， 不易形成似人體的 后期病變 ， 較易形成血栓 。 2022/6/23 45 ： 雄性小鼠飼以 1％ 膽固醇及 10％ 豬油 的高脂飼料 ， 7天后血清膽固醇即升為 343177。 15mg％ ；若在飼料中再加入 ％ 的膽酸 ， 連飼 7天 ，血清膽固醇可高達 530177。 36mg％ 評價： 容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點 ， 但是取血不便 ， 難做動態(tài)觀察 ， 所以較少采用 。 2022/6/23 46 ： 4～ 8周的萊克亨雞 ， 在飼料中加入 1％ 2％ 膽固醇或 15％ 蛋黃粉 ， 再加 5％ ～ 10％ 豬油 ， 經(jīng)過 6～ 10周 ， 血膽固醇即升至 1000mg％ ～ 4000mg％ ， 胸主動脈斑塊發(fā)生率達 100％ 。 評價： 雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。 病變發(fā)生較快 ，在斑塊中有時伴有 鈣化 和形成 潰瘍 。 2022/6/23 47 非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模方法 : ： 將大鼠主動脈勻漿給兔注射 ， 可引起血膽固醇 、 β —脂蛋白及甘油三酯升高 。 給兔注射馬血清10ml/kg/次 ， 共 4次 ， 每次間隔 17天 。 評價 : 動脈內(nèi)膜損傷率為 88％ ， 冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變 ， 若同時給予高膽固醇飼料 ， 病變更加明顯 。 2022/6/23 48 ： 給兔靜脈滴注去甲腎上腺素 lmg/24h， 時間為30min。 一種方法是先滴 15min， 休息 5min后再滴15min。 另一種方法是每次點滴 5min和休息 5min，反復 6次 。 評價 : 持續(xù)兩周 ， 均可引起主動脈病變 ， 呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長 、 劈裂或斷裂 ， 病變中出現(xiàn)壞死及鈣化 。 2022/6/23 49 ： 給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天20～ 25mg/kg(以 5％ 葡萄糖溶液配成 lmg/ml的濃度 )， 連續(xù) 20～ 25天 。 評價： 成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變 。 冠狀動脈管腔變窄 、 動脈壁內(nèi)膜肌細胞增生 、 纖維狀異物質(zhì) 。 如同時在飼料中加入 20％ 的膽固醇 ， 則出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變 。 2022/6/23 50 ： 給大鼠腹腔注射 Troton WRl339 300mg/kg體重 。 評價 : 給藥 9h后可使血清膽固醇升高 3～ 4倍； 20h后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的 34倍 ， 而雌性大鼠卻為 6倍左右 。 用藥后 24h左右升脂作用達最高點 ， 48h左右恢復正常 。 其中以甘油三酯升高最強 ，其次是磷脂 、 游離膽固醇 ， 對膽固醇酯沒有影響 。 2022/6/23 51 第五節(jié) 呼吸、消化疾病動物模型 肝纖維化動物模型 支氣管哮喘動物模型 2022/6/23 52 肝纖維化動物模型 ? 模型概述： 1. 任何可引起肝損傷的因素 長期、反復作用 于肝臟，均可產(chǎn)生肝細胞 變性、壞死 ，繼而肝細胞 再生 和 纖維組織增生 ，導致肝纖維化。 2. 已有 化學性損傷 、 免疫性 、 生物學 、 酒精性 和 營養(yǎng)性 肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生肝硬化的 機理 、纖維化 出現(xiàn)早晚 、穩(wěn)定性 、 出現(xiàn)率 、 重復性 及機體自然患病過程相似程度等都不盡相同。 2022/6/23 53 ? 造模方法： ： 免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機理是 Ⅲ 型變態(tài)反應引起，白蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進入大鼠體內(nèi)后，刺激其產(chǎn)生相應的抗體，當抗原再次進人機體后抗原抗體結合，形成抗原 —抗體免疫復合物 (IC)， 抗原的反復、長期刺激，過量的免疫復合物來不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷 。反復導致肝細胞變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維化、肝硬化。