飼料中有毒有害物質(zhì)的測定(編輯修改稿)
2025-06-08 02:04 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 和致癌性也最強。 ? 在自然條件下， 飼料污染的黃曲霉毒素 主要為 AFB B2 、 G1 、 G2，其中以 AFB1含量最高。 ? 黃曲霉毒素的毒性、致癌性和蓄積性 —— 飼料產(chǎn)品質(zhì)量控制中的 必檢項目 。 二、飼料中黃曲霉毒素 B1的測定 5/25/2022 5:43 PM 14 9 飼料中 有毒有害物質(zhì) 的測定 (二 )檢測方法 ? 酶聯(lián)免疫吸附法 （ enzymelinked immunosorbent assay， ELISA） ? 薄層層析法（ thin layer chromatography， TLC） ? 快速篩選法 二、飼料中黃曲霉毒素 B1的測定 （ P288） 5/25/2022 5:43 PM 15 9 飼料中 有毒有害物質(zhì) 的測定 酶聯(lián)免疫吸附法 原理 ELISA的基礎是抗原或抗體的 固相化 及抗原或抗體的 酶標記 。以待測抗原（或抗體）與酶標抗體（或抗原）的特異結(jié)合反應為基礎，通過酶活力測定來確定抗原（或抗體）含量。 特點： ? 很強的特異性： 建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上。 ? 很高的靈敏度： 酶催化反應。 對于黃曲霉毒素 B1， ELISA法最低可檢出 。 二、飼料中黃曲霉毒素 B1的測定 5/25/2022 5:43 PM 16 9 飼料中 有毒有害物質(zhì) 的測定 酶聯(lián)免疫吸附法 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有 3種必要的試劑： ? 固相的抗原或抗體， ? 酶標記的抗原或抗體， ? 酶作用的底物。 二、飼料中黃曲霉毒素 B1的測定 5/25/2022 5:43 PM 17 酶聯(lián)免疫吸附法 A、抗體 ? 將某種抗原經(jīng)各種途徑免疫動物，成熟的 B細胞克隆受到抗原刺激后，將抗體分泌到血清和體液中。實際上血清中的抗體是多種單克隆抗體的混合物，因此稱之為 多克隆抗體 。 9 飼料中有毒有害物質(zhì)的測定 5/25/2022 5:43 PM 18 ? 單克隆抗體 是由生長在細胞培養(yǎng)物中的同一 B細胞的群體（一個克?。┖铣刹⒎置诘?、均一的、識別同一抗原表位的抗體。 5/25/2022 5:43 PM 19 酶聯(lián)免疫吸附法 B、酶與底物： ? 在 ELISA中，常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和堿性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP)。在少數(shù)商品 ELISA試劑中，應用的酶尚有葡萄糖氧化酶、 βD半乳糖苷酶和脲酶等。 ? 辣根過氧化物酶底物：鄰苯二胺 (Ophenylenediamine,OPD)、四甲基聯(lián)苯胺 (3,339。,5,539。tetramethylbenzidine,TMB)和 ABTS。用 2mol/L硫酸終止酶反應。 ? 堿性磷酸酶底物：一般采用對硝基苯磷酸酯 (pnitrophenyl phosphate, pNPP)作為底物，用 NaOH終止酶反應。 9 飼料中有毒有害物質(zhì)
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