緒論和細胞ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-29 08:46 本頁面
【文章內容簡介】 ansmission electron microscope） 透射電鏡觀察的組織須用戍二醛或鋨酸固定，樹脂包埋，切厚50～ 80nm超薄切片，經鉛鹽等重金屬鹽染色后鏡下觀察。 電鏡下所見結構稱 超微結構（ ultrastructure） 。 超微結構被金屬所染部位，在熒光屏上顯得暗，圖象較黑，稱為 電子密度高 ；反之則稱為 電子密度低 。 ? 被檢結構與重金屬鹽相結合的稱 正染色 ；被檢結構本身不與重金屬鹽結合，而其周圍著重金屬鹽的稱 負染色 。一般染色都是 正染色 。 掃描電子顯微鏡技術 （ scanning electron microscope） 掃描電子顯微鏡技術要觀察的組織不需制成切片。 ? 固定后的標本，在其表面 噴鍍金 ，在熒光屏上即可顯示細胞或組織表面的立體結構，如細胞表面的突起、微絨毛、纖毛等。 （四）其他技術 冷凍切片技術 冷凍蝕刻復型術 組織化學技術 免疫組織化學技術 原位雜交技術 體外培養(yǎng)技術 其他標本制作技術 冷凍切片技術 為避免細胞、組織內的某些物質不被固定液所破壞，又要使組織變硬，便于將其切成薄片，同時又要快速得到切片，可將獲取的新鮮組織立即投入 液氮 (196℃) 內快速凍結，然后用 恒冷箱切片機（ cryostat） 制成 冷凍切片 （ frozen section） 。 ? 冷凍切片技術 （ frozen section method） 制片迅速，細胞內酶活性保存較好，常用于酶組織化學染色。 冷凍蝕刻復型術 該技術包括 冷凍 、 斷裂 、 鍍鉑 、 分離復制面 等主要步驟。 冷凍蝕刻術 既可以看到細胞膜外表面，又可見細胞膜的內表面，也可探測細胞膜斷面的結構。 ? 冷凍蝕刻復型術 (freeze etch replica) ： 組織化學技術 組織化學 （ histochemistry） 方法： 是利用 化學試劑 與組織 細胞內的某些物質 呈現化學反應，在局部形成 有色沉淀物 ，通過顯微鏡觀察而對組織細胞內的化學成分進行定位、定性和定量的研究。 如過碘酸希夫反應，簡稱 PAS(period acid Schiff reaction)。 該方法 是顯示細胞內糖原或多糖的一種方法，其化學反應的基本過程是通過過碘酸的氧化作用，使多糖釋放出醛基，醛基與無色鹼性品紅結合反應，于多糖存在的部位形成紫紅色沉淀物，從而證明細胞內含有糖原或粘多糖成分。 免疫組織化學技術 免疫組織化學 （ immunohistochemistry） 是利用 抗原、抗體 特異性結合，檢測組織中多肽、蛋白質等物質。 – 該方法先將蛋白質或多肽作為 抗原 ，注入動物體內，使其產生相應的 抗體 。 – 從血清中提取該抗體，并用熒光染料、鐵蛋白或辣根過氧化物酶等
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