研究技術(shù)報告ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-28 22:21 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 5最具相關(guān)性的病理改變?yōu)榻Y(jié)締組織增生與平滑肌肥厚，這兩種改變皆屬氣道重建之改變，提示小氣道重建是小氣道病變患者 V50及 V25降低的主要病理改變，此與何氏報道有所不同 [3]。 三組對比發(fā)現(xiàn)：小氣道病變患者炎性細胞浸潤、平滑肌肥厚均明顯高于正常組，而 COPD組其管腔狹窄及粘膜潰瘍較其他兩組更為明顯，說明在 COPD患者，其小氣道病變更加嚴重，這可能是COPD患者氣流阻塞的主要原因。此與王柏岑的結(jié)論相符 [11]，王柏岑等通過動物實驗發(fā)現(xiàn)：肺氣腫并有小氣道炎癥的大鼠其 PaO2明顯低于單純肺氣腫的大鼠，其肺動脈壓力也較高，這提示即使已發(fā)生的 COPD的患者，對小氣道病變的防治也有益于減輕氣流阻塞。 關(guān)于小氣道病變炎性細胞分布特點的報道較少，本文發(fā)現(xiàn)：小氣道病變及COPD患者其小氣道粘膜層均以淋巴細胞浸潤為主，明顯高于正常組，而中性粒細胞、單核細胞及嗜酸性粒細胞在三組之間無差異顯著性，僅有少數(shù)病例氣道中見到嗜酸性粒細胞，提示小氣道病變及 COPD患者小氣道粘膜層均存在以淋巴細胞為主的炎癥，而嗜酸性粒細胞在 COPD中作用不大。 本文未發(fā)現(xiàn)吸煙組與非吸煙組小氣道粘膜層炎性細胞浸潤有明顯差異。 Ⅲ 小氣道病變患者小氣道 粘膜層免疫病理的研究 材料與方法 對象 本研究病例選擇標準 [3]：（ 1）因肺局限性病變需行全肺切除或肺葉切除者；（ 2）無明顯心、肝、腎及其他重要病史；（ 3）術(shù)前 2周內(nèi)無急性呼吸道感染史；（ 4）無哮喘及其它過敏性疾患史；（ 5）肺局限性病灶位于段支氣管以下，以減少局部病灶對肺功能檢查的影響。 按以上標準選擇病例 86例，年齡 24~70歲，男性 53例，女性 33例。其中肺癌 72例，炎性假瘤 6例，結(jié)核球 4例，支氣管擴張 2例，錯構(gòu)瘤 1例，胸膜間皮瘤 1例。12便為單側(cè)全肺切除， 74例肺葉切除。 根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)會 COPD診斷標準將上述患者分為 3組 [10， 13]：（ 1）正常組 30例：%預(yù)計值 80%； 70%； V50和 V25%預(yù)計值 70%；（ 2）小氣道病變組 34例：%預(yù)計值 80%； 70%； V50和（或） V25%預(yù)計值 70%；（ 3） COPD組 22例： %70%和或 %預(yù)計值 80%；△ 15%。患者一般情況見表 7。 表 7 患者一般情況（－ χ177。 S） 正常組 小氣道病變組 COPD組 例數(shù) 30 34 22 年齡 （ 歲 ） 53177。 7 52177。 9 54177。 6 男 /女 18/12 20/14 15/7 吸煙者 17 20 16 FEV%Pred 103177。 16 86177。 7 57177。 15 FEV 177。 177。 177。 V50%Pred 93177。 18 61177。 13 36177。 19 V25%Pred 95177。 22 60177。 14 30177。 15 表 I表明三組間年齡、性別、吸煙者比例均無差異，具有可比性。 肺標本處理 （ 一 ） 收集術(shù)后肺標本 ， 于距病變邊緣 4cm以外處取 1 1 2塊 ， 以 10%中性甲醛浸泡固定 ， 脫水 ， 石臘包埋 ， 切片厚度 5mm。 （二）免疫組化染色：采用生物素標記的第二抗體與鏈霉素抗生物素蛋白連接的過氧化物酶及底物色素混合液測定細胞表面分化抗原，測定外周氣道粘膜層內(nèi) CD3+、 CD8+、 CD68+、CD20+、 CD45RA+、 CD45RO+細胞： CD3： T淋巴細胞 CD8： T淋巴細胞中與 MCH Ⅱ 結(jié)合的亞群 ， 包括抑制性 T淋巴細胞 （ Ts） 及殺傷性 T淋巴細胞 （ Tc） . CD20： B淋巴細胞 CD68：單核巨噬細胞 CD45RA：未成熟 T淋巴細胞 、 B細胞 、 NK細胞 CD45RO：活化 T淋巴細胞 、 B細胞 、 粒細胞 、 單核細胞 （三）免疫組化染片：每例患者取完整的小氣道（內(nèi)徑 2mm， TD2022測得） 2個，每個小氣道由上皮內(nèi)緣向外取 4個油鏡視野（ 10 100倍，直徑 140μm），計數(shù)視野中陽性細胞數(shù)（ CD3+、CD8+、 CD20+、 CD68+、 CD45RA+、 CD45RO+）取均數(shù)，以陽性細胞數(shù) /mm2表示。陽性細胞為細胞膜部位染色，呈均勻棕色，每種均做陽性及陰性對照片。 40例測定大氣道粘膜下層炎性細胞。 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用 SPSS軟件分析。組間 CD3+、 CD8+、CD20+、 CD68+、 CD45RA+、 CD45RO+細胞比較采用秩合檢驗；與 、 V50、 V25相關(guān)性采用 Spearman’s等級相關(guān)分析；以P，數(shù)據(jù)表示：中位數(shù)（全距） 結(jié) 果 一 、 小氣道粘膜層 CD3+、 CD8+陽性細胞等特點 表 8 小氣道粘膜層 CD系列陽性細胞數(shù)（個 /mm2），中位數(shù)（全距） 正常組 小氣道病變組 COPP組 CD3 726() 990(81914)* 1188(5282178)* CD8 (1321466) (1651155)* (1321172)* CD68 (01864) (02316)* 792(3301980)* CD45RO 891(03465) (03630) 664(1
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