研究技術(shù)報(bào)告ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-28 22:21 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 5最具相關(guān)性的病理改變?yōu)榻Y(jié)締組織增生與平滑肌肥厚，這兩種改變皆屬氣道重建之改變，提示小氣道重建是小氣道病變患者 V50及 V25降低的主要病理改變，此與何氏報(bào)道有所不同 [3]。 三組對(duì)比發(fā)現(xiàn)：小氣道病變患者炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、平滑肌肥厚均明顯高于正常組，而 COPD組其管腔狹窄及粘膜潰瘍較其他兩組更為明顯，說明在 COPD患者，其小氣道病變更加嚴(yán)重，這可能是COPD患者氣流阻塞的主要原因。此與王柏岑的結(jié)論相符 [11]，王柏岑等通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：肺氣腫并有小氣道炎癥的大鼠其 PaO2明顯低于單純肺氣腫的大鼠，其肺動(dòng)脈壓力也較高，這提示即使已發(fā)生的 COPD的患者，對(duì)小氣道病變的防治也有益于減輕氣流阻塞。 關(guān)于小氣道病變炎性細(xì)胞分布特點(diǎn)的報(bào)道較少，本文發(fā)現(xiàn)：小氣道病變及COPD患者其小氣道粘膜層均以淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主，明顯高于正常組，而中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞在三組之間無(wú)差異顯著性，僅有少數(shù)病例氣道中見到嗜酸性粒細(xì)胞，提示小氣道病變及 COPD患者小氣道粘膜層均存在以淋巴細(xì)胞為主的炎癥，而嗜酸性粒細(xì)胞在 COPD中作用不大。 本文未發(fā)現(xiàn)吸煙組與非吸煙組小氣道粘膜層炎性細(xì)胞浸潤(rùn)有明顯差異。 Ⅲ 小氣道病變患者小氣道 粘膜層免疫病理的研究 材料與方法 對(duì)象 本研究病例選擇標(biāo)準(zhǔn) [3]：（ 1）因肺局限性病變需行全肺切除或肺葉切除者；（ 2）無(wú)明顯心、肝、腎及其他重要病史；（ 3）術(shù)前 2周內(nèi)無(wú)急性呼吸道感染史；（ 4）無(wú)哮喘及其它過敏性疾患史；（ 5）肺局限性病灶位于段支氣管以下，以減少局部病灶對(duì)肺功能檢查的影響。 按以上標(biāo)準(zhǔn)選擇病例 86例，年齡 24~70歲，男性 53例，女性 33例。其中肺癌 72例，炎性假瘤 6例，結(jié)核球 4例，支氣管擴(kuò)張 2例，錯(cuò)構(gòu)瘤 1例，胸膜間皮瘤 1例。12便為單側(cè)全肺切除， 74例肺葉切除。 根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)會(huì) COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)將上述患者分為 3組 [10， 13]：（ 1）正常組 30例：%預(yù)計(jì)值 80%； 70%； V50和 V25%預(yù)計(jì)值 70%；（ 2）小氣道病變組 34例：%預(yù)計(jì)值 80%； 70%； V50和（或） V25%預(yù)計(jì)值 70%；（ 3） COPD組 22例： %70%和或 %預(yù)計(jì)值 80%；△ 15%?；颊咭话闱闆r見表 7。 表 7 患者一般情況（－ χ177。 S） 正常組 小氣道病變組 COPD組 例數(shù) 30 34 22 年齡 （ 歲 ） 53177。 7 52177。 9 54177。 6 男 /女 18/12 20/14 15/7 吸煙者 17 20 16 FEV%Pred 103177。 16 86177。 7 57177。 15 FEV 177。 177。 177。 V50%Pred 93177。 18 61177。 13 36177。 19 V25%Pred 95177。 22 60177。 14 30177。 15 表 I表明三組間年齡、性別、吸煙者比例均無(wú)差異，具有可比性。 肺標(biāo)本處理 （ 一 ） 收集術(shù)后肺標(biāo)本 ， 于距病變邊緣 4cm以外處取 1 1 2塊 ， 以 10%中性甲醛浸泡固定 ， 脫水 ， 石臘包埋 ， 切片厚度 5mm。 （二）免疫組化染色：采用生物素標(biāo)記的第二抗體與鏈霉素抗生物素蛋白連接的過氧化物酶及底物色素混合液測(cè)定細(xì)胞表面分化抗原，測(cè)定外周氣道粘膜層內(nèi) CD3+、 CD8+、 CD68+、CD20+、 CD45RA+、 CD45RO+細(xì)胞： CD3： T淋巴細(xì)胞 CD8： T淋巴細(xì)胞中與 MCH Ⅱ 結(jié)合的亞群 ， 包括抑制性 T淋巴細(xì)胞 （ Ts） 及殺傷性 T淋巴細(xì)胞 （ Tc） . CD20： B淋巴細(xì)胞 CD68：?jiǎn)魏司奘杉?xì)胞 CD45RA：未成熟 T淋巴細(xì)胞 、 B細(xì)胞 、 NK細(xì)胞 CD45RO：活化 T淋巴細(xì)胞 、 B細(xì)胞 、 粒細(xì)胞 、 單核細(xì)胞 （三）免疫組化染片：每例患者取完整的小氣道（內(nèi)徑 2mm， TD2022測(cè)得） 2個(gè)，每個(gè)小氣道由上皮內(nèi)緣向外取 4個(gè)油鏡視野（ 10 100倍，直徑 140μm），計(jì)數(shù)視野中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（ CD3+、CD8+、 CD20+、 CD68+、 CD45RA+、 CD45RO+）取均數(shù)，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù) /mm2表示。陽(yáng)性細(xì)胞為細(xì)胞膜部位染色，呈均勻棕色，每種均做陽(yáng)性及陰性對(duì)照片。 40例測(cè)定大氣道粘膜下層炎性細(xì)胞。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用 SPSS軟件分析。組間 CD3+、 CD8+、CD20+、 CD68+、 CD45RA+、 CD45RO+細(xì)胞比較采用秩合檢驗(yàn)；與 、 V50、 V25相關(guān)性采用 Spearman’s等級(jí)相關(guān)分析；以P，數(shù)據(jù)表示：中位數(shù)（全距） 結(jié) 果 一 、 小氣道粘膜層 CD3+、 CD8+陽(yáng)性細(xì)胞等特點(diǎn) 表 8 小氣道粘膜層 CD系列陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（個(gè) /mm2），中位數(shù)（全距） 正常組 小氣道病變組 COPP組 CD3 726() 990(81914)* 1188(5282178)* CD8 (1321466) (1651155)* (1321172)* CD68 (01864) (02316)* 792(3301980)* CD45RO 891(03465) (03630) 664(1
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