hiv梅毒檢測(cè)ppt課件(2)(編輯修改稿)
2025-05-25 22:24 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 體和 P24抗原。檢出時(shí)間提前了 ，用于 血源篩查 等。 HIV抗體篩查試驗(yàn)基本要求 ? 篩查試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn) 、 批檢合格 、 臨床評(píng)估質(zhì)量?jī)?yōu)良 、 在有效期內(nèi)的試劑 。 ? 目前常用的篩查試劑有酶聯(lián)免疫 、 顆粒凝集和其它快速診斷試劑 。 ? 建議采用國(guó)家參比室試劑考評(píng)質(zhì)量?jī)?yōu)良的試劑 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性艾中心網(wǎng)站 快速檢測(cè)（ RT）（ 1） ? 常用的主要有以下幾種： ?明膠顆粒凝集試驗(yàn)（ PA） ： PA是 HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡(jiǎn)便方法，是將 HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用，混勻后保溫（一般為室溫）。當(dāng)待檢樣品含有 HIV抗體時(shí)，經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原 抗體反應(yīng)，根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。 ?斑點(diǎn) EIA或稱(chēng)斑點(diǎn) ELISA（ dotEIA） ：以硝酸纖維膜為載體，將 HIV抗原滴在膜上成點(diǎn)狀，即為固相抗原。加血清樣品作用，以后步驟同 ELISA。陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。反應(yīng)時(shí)間在 10 min以?xún)?nèi)，使用抗原量少。 快速檢測(cè)（ RT）（ 2） ?斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn) 金標(biāo)紙條采用雙抗原夾心法免疫測(cè)定原理，選擇經(jīng)純化的基因工程制備的 gp3 gp4 p24抗原作為包被抗原和 gp4 gp36基因工程抗原和 p24合成肽作為膠體金結(jié)合抗原。 當(dāng)待檢標(biāo)本中含有 HIV抗體時(shí)，先和金標(biāo)記抗原結(jié)合，由于層析作用反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維膜向前移動(dòng)，當(dāng)遇到包被抗原時(shí)，形成 AgAbAgAu復(fù)合物而富集在包被線上，形成紅色沉淀線。同時(shí)在包被膜上還有一條質(zhì)控線對(duì)照，故當(dāng)有兩條紅線時(shí)判為陽(yáng)性，只有一條紅線時(shí)，判為陰性。 該方法試劑穩(wěn)定，可室溫長(zhǎng)期保存。試驗(yàn)時(shí)不需任何設(shè)備，迅速、簡(jiǎn)便、特異性較好，敏感性約相當(dāng)于中度敏感的 ELISA，適用于應(yīng)急檢測(cè)、門(mén)診急診個(gè)體檢測(cè)，尤其是基層單位。 樣本要求 ? 血清 或 血漿 ，并避免樣品溶血。 ? 7天內(nèi)檢測(cè)，樣品須放在 28℃ 保存，如果大于 7天則須冷凍（ 20℃ ）保存。 ? ，需使用 EDTAK2或EDTAK3抗凝，使用其他抗凝劑的血漿樣本可能會(huì)得到不正確的結(jié)果。 【 建議最好不使用肝素鈉抗凝劑的血漿標(biāo)本 】 。 膠體金快速試驗(yàn) 操作步驟 ? 將待測(cè)標(biāo)本從儲(chǔ)存條件下取出，平衡至室溫并編號(hào)。 ? 將所需數(shù)量的測(cè)試卡從包裝盒中取出平衡至室溫，打開(kāi)鋁箔包裝袋，平置于臺(tái)面上。 ? 用微量加樣器取 50181。I檢測(cè)樣本，加到測(cè)試卡的加樣處。 【 也可以用試劑包裝中自帶的一次性滴管滴加測(cè)試標(biāo)本 2滴 】 。 ? 加樣后， 30分鐘內(nèi)（從加樣后計(jì)時(shí)起）最終觀察并記錄測(cè)試結(jié)果。 膠體金快速試驗(yàn) 結(jié)果判斷 陽(yáng)性： 測(cè)試卡在檢測(cè)區(qū)（ T）和對(duì)照區(qū) (C)位置各出現(xiàn)一條紫紅色條帶（共 2條紅色帶），判為陽(yáng)性。 【 特別注意：測(cè)試區(qū)（ T）內(nèi)的紫紅色條帶可呈現(xiàn)顏色深淺的現(xiàn)象。在規(guī)定的觀察時(shí)間內(nèi)，不論該色帶顏色深淺，即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判定為陽(yáng)性結(jié)果。檢測(cè)線顏色的深淺的程度與樣品中抗體的滴度沒(méi)有一定的必然聯(lián)系。陽(yáng)性標(biāo)本必須使用其他方法確認(rèn)。 】 陰性 ：測(cè)試卡只在對(duì)照區(qū) (C)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶。 失效： 對(duì)照區(qū) (C)未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過(guò)程或試劑盒已變質(zhì)損壞或者是樣本中抗體的含量過(guò)高。在此情況下用新的測(cè)試卡重新測(cè)試。如果問(wèn)題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號(hào)試劑。 陰性反應(yīng) 陽(yáng)性反應(yīng) 失效（無(wú)意義） 注意事項(xiàng)（一） ? 金標(biāo)快速測(cè)試卡僅用于 HIV抗體的現(xiàn)場(chǎng)初篩，對(duì)于所有使用本測(cè)試卡檢測(cè)
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