【文章內容簡介】 易發(fā)的癌癥類型依次為乳腺癌、肺癌、前列腺癌、結腸癌、直腸癌和卵巢癌。流行病學研究提示，不僅我國腫瘤死亡率呈明顯上升趨勢，而且兼有發(fā)展中國家和發(fā)達國家高發(fā)譜并存的特點。據(jù)國家衛(wèi)生部信息中心的報道，近年來危害我國民眾的主要癌癥類型依次為胃癌(%)、肝癌(%)、肺癌(%)、食管癌(%)、結腸直腸癌(含肛門腫瘤，%)、白血病(%)、子宮頸癌(%)、鼻咽癌(%)和乳腺癌(%)。據(jù)我國衛(wèi)生部統(tǒng)計，20世紀90年代我國腫瘤發(fā)病率已上升為127例／10萬人。近年來我國每年新增腫瘤患者160170萬人，總數(shù)估計在450萬人左右。西方發(fā)達國家目前約有20%癌癥患者使用紫杉醇類藥品，由于價格昂貴，發(fā)展中國家患者使用還較少。近期研究表明紫杉醇對白血病等其他惡性疾病也有較好效果，在替代新藥出來之前，使用紫杉醇的患者會越來越多?？梢灶A料，今后醫(yī)藥工業(yè)對紫杉醇原料藥的需求量還將陸續(xù)上升。因此由紅豆杉枝葉加工提取的紫杉醇具有良好的市場前景。國內外制劑需求帶動了紫杉醇原料藥市場的火爆，近兩年，全球紫杉醇產量已在上升，外銷競爭激烈，2003年原料藥售價約在22萬美元左右，由于價格的合理性變化，臨床應用的擴人，仍然較大的利潤空間，但是同質化、低水平的重復建設也是商戰(zhàn)中值得我們反思的課題。據(jù)國際醫(yī)藥市場分析員估計，各國對紫杉醇原料的需求量在今后5年中將迅速上升，增加幅度達100%。其理由是，紫杉醇治療晚期腫瘤療效顯著，其它化療藥無法取代；二是美國已開始批準生產紫杉酵的通用名藥制劑產品，這意味著紫杉醇在美國不再是施貴寶獨家產品。此外，意大利、德國的制藥企業(yè)在年內亦將推出各自的紫杉醇通用名藥制劑產品。隨著越來越多紫杉醇通用名藥產品陸續(xù)上市，各制劑廠對爭奪紫杉酵原料藥的競爭將日趨激烈。無容置疑，隨著制劑生產的擴大對紫杉醇原料的需求也會不斷增長。第四章 場址選擇和建設條件一、場址選擇某市、樂業(yè)縣、西林縣、凌云縣，那坡縣、靖西縣、隆林縣、田林縣、德保縣二、建設條件某市地處某西部，某地區(qū)中部，全地區(qū)轄12個縣（市），183個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，云貴高原與南嶺丘陵的過渡地帶，珠江流域西江水系的右江上游，位于東經 106176。07′－106176。56′，北緯23176。33′－24176。18′之間。西部與云南相接，北部與貴州毗鄰，東與首府南寧緊連，南與越南接壤，邊境線長達365公里，是滇、黔、桂三省中心城市，是我國大西南通往太平洋地區(qū)出海通道的黃金走廊，由于地勢西高東低，因此某東西兩地溫差很大。某東部屬副熱帶濕潤氣候，氣候溫暖。冬暖而短，夏悶熱漫長。冬季干燥但陽光低；夏秋相當晴朗。降雨集中在5月~8月。年均降水量 1115 毫米， ℃， ℃，7月均溫 ℃。而某西部由于是地處云貴高原東緣，地勢平均高于海拔500米，而隆林縣和西林縣一帶更高于海拔1000米。氣候情況與云南省中部大部份城市相若，全年溫差較少而氣溫偏低。而某市下轄的樂業(yè)縣，夏天白天不熱，晚上較冷，不開空調，還須蓋被子呢，是旅游、避暑的好地方。樂業(yè)縣還是某唯一一個冬天會下雪的地方，平均每年雪期約3~6天左右，具有小東北之稱。立體多樣的農業(yè)開發(fā)帶。在發(fā)展特色產業(yè)的同時，樂業(yè)縣非常重視打造特色品牌，2012年，該縣創(chuàng)建“全國有機農業(yè)示范基地縣”，通過國家農業(yè)部專家組驗收，成為某惟一一個有機農業(yè)示范縣。某為全國特有的農業(yè)寶地，由于地形地貌復雜，形成某獨特的立體氣候，海拔從100米到近2000米都有農業(yè)的耕作區(qū)，為某農業(yè)的縮影，具有南方河谷平原、丘陵地帶、石山區(qū)、高寒山區(qū)等代表性農業(yè)開發(fā)帶，同時生長著多種熱帶、亞熱帶以及溫帶作物，使某成為地方特色農產品種類和品種繁多的生產區(qū)域。某獨特的地理位置和優(yōu)良的生態(tài)環(huán)境為以上項目的實施提供了堅實基礎。第五章 建設目標與任務一、總體方案設計 項目建設設計如下：年份建設性質名稱規(guī)模2013年新建石斛種植園8000畝2013年新建石斛培育、加工基地1個2013年改造改造老茶園20000畝2013年新建茶園80000畝2013年新建有機茶加工廠3個2013年新建紅豆杉種植園1000000畝2014年新建石斛種植園11500畝2014年新建茶園100000畝2014年新建紅豆杉種植園1000000畝2014年新建紫杉醇提取加工廠1個2015年新建石斛種植園10500畝2015年新建茶園100000畝2015年新建紅豆杉種植園1000000畝二、建設內容與規(guī)模項目建設內容包括：石斛種植園（30000畝），石斛培育、加工基地一個，改造老茶園2萬畝，新建茶園28萬畝，新建有機茶加工廠三座，新建紅豆杉種植園300萬畝，新建紫杉醇提取加工廠一個項目滿產年產廣南種鐵皮石斛干品60萬公斤；有機綠茶產品15000噸；紫杉醇12000公斤（含量≥%）項目安排當?shù)鼐蜆I(yè)10000人。第六章 技術方案鐵皮石斛一、石斛組織培養(yǎng)栽培現(xiàn)狀為了解決市場供求矛盾問題，我國從80年代起，許多科研單位、大專院校紛紛組織攻關石斛的組織培養(yǎng)工作，已在浙江、安徽、上海、廣州、四川、重慶、云南、江蘇、某等獲得了成功，但是在大田種植成功經驗甚微，在上海、浙江等地有小面積鐵皮石斛的栽培，但成本高、周期長，因此推廣的難度大。某作為石斛的主產區(qū)，發(fā)展石斛的野生馴化種植，有著極大的區(qū)位優(yōu)勢。首先某地理位置處在石斛生長緯度的范圍，生態(tài)環(huán)境適宜，從而減少了許多種植基本設施，降低了種植成本。某洋平石斛科技研究所在有關科研單位的支持指導下，經過幾年的反復實驗，攻克了難著并掌握了石斛所需的人工生長環(huán)境，解決了組織培養(yǎng)種苗，莖段繁殖高新種植的技術。并在大田小試、中試均獲成功，而有批量商品問世。在2004年12月現(xiàn)場觀模會上與會的藥用植物栽培專家、教授及某石斛專家一致認為，該所石斛的種植、組織培養(yǎng)等技術均領先全國水平。因此，某發(fā)展大面積石斛種植條件已基本成熟。二、鐵皮石斛良種繁育技術方案二．1．實驗室一般操作規(guī)程（一）洗滌室保持室內有充分的光照，通風。保持洗滌室內的整潔衛(wèi)生。要經常打掃衛(wèi)生，清理水池保證水池的清潔。主要用具的清洗（1）洗刷培養(yǎng)瓶。先將培養(yǎng)瓶培養(yǎng)瓶放在清水浸泡一段時間，用毛刷清洗內部。再泡入洗衣粉水中，再用毛刷刷洗。然后用清水沖洗3～5遍。洗好的瓶子應透亮，內外水膜均一，不掛水珠。（2）把瓶子倒放在塑料筐內，放在通風處晾干。使用過的器皿要及時清洗干凈。然后分類放置。（二）配劑室保持室內有充分的光照，配備冷暖空調。進入配劑室必須穿好工作服，換上專用鞋。保持配劑室內的整潔衛(wèi)生。要經常打掃衛(wèi)生，整理臺面，嚴禁臺面混亂。并保證容器的干凈。 為了方便操作，大量元素母液配制100倍，微量元素、有機物、鐵鹽母液配制50～100倍，植物生長物質配制濃度1mg/ml。配制母液時（包括大量元素、微量元素、鐵鹽、有機成份、植物激素等），必須稱量準確，依次稱量倒入燒杯內。并經過復核無誤并進行記錄后，即行配制，不得中途停止。除大量元素外，保存在冰箱中的冷藏柜中。電子天平必須在規(guī)定的溫度下使用。每次稱量后要對天平內外進行清潔。配制母液后，各種藥品按原位置擺整齊，要及時清洗所用器皿，放回原處。對配劑室的藥品、母液。要設立流水帳，如實填寫，以便經常核對。要經常檢查藥品以及母液的量是否足夠，有無變質，是否出現(xiàn)沉淀或懸浮物，冰箱內存放物質有無結晶沉淀等異常情況。并記錄當天的工作情況。保證藥品的存放安全。嚴格按照要求存放（如避光、低溫保存等）。 （三）培養(yǎng)基配制按生產單準確的稱取瓊脂和白糖，倒入燒杯內備用。依次、分別、準確量取各種母液倒入燒杯內。根據(jù)取量的多少選取適當?shù)囊埔汗埽勘?；并經過復核無誤并進行記錄后，即行配制，不得中途停止。每一種母液必須用專用的移液管取量。如用同一支移液管必需用蒸餾水沖洗內外壁后再取另一母液。取量必須經過復核。配制培養(yǎng)基后，各種母液按原位置擺整齊，要及時清洗所用器皿，放回原處。向鍋內加入三分之二所配培養(yǎng)基升數(shù)的水，加熱至80℃。 分別倒入瓊脂和白糖，不停攪拌使之完全溶化。依次加入大量元素母液、微量元素母液、鐵鹽、有機成份、激素。邊倒邊攪拌，并用水沖洗盛母液的容器兩遍，一起倒入鍋內。 定容至所配升數(shù)的110%。并用HCl或NaOH調整PH值 。趁熱分裝。依據(jù)增殖和生根所需不同的量，向培養(yǎng)瓶內倒入一定量的培養(yǎng)基。然后蓋上瓶蓋。 分裝后應在8小時內滅菌完畢，所以配培養(yǎng)基時應考慮滅菌能力。（四）滅菌檢查高壓鍋水量，加水要達到水位計上的標志線。把培養(yǎng)基裝入高壓鍋。總體積不應超過滅菌室容積的80%。關閉好室門，確認放汽閥關緊，疏水閥打開。接通電源。打開放氣閥,排除冷空氣(此步很重要)反復兩次至完全把冷空氣排除。此時滅菌室壓力表上對應溫度應與溫度表的溫度相同或＜1℃。否則再次排氣。排除冷空氣后,關閉放氣閥，、溫度125℃～126℃時，開始計算滅菌時間（20分鐘），但要注意保持穩(wěn)定壓力和溫度。滅菌結束后，關閉進氣閥，切斷電源。打開放氣閥(注意要逐漸放氣)待滅菌室的為零，溫度下降到90℃以下時。打開熱壓滅菌鍋蓋，把培養(yǎng)基取出，送到培養(yǎng)基儲藏間或接種室緩沖間。滅菌過程中如果出現(xiàn)斷電等原因導致溫度低于滅菌溫度時，應從溫度再次達到滅菌溫度時重新開始計時。每次滅菌必須看鐘，注意各個滅菌鍋通電后至加熱爐壓力上升到要求的壓力和溫度的時間，如有異常，關電并報告管理人員。遇任何異常，切斷電源并報告。（五）接種室開工前準備：（1）進入前，將手洗干凈至肘彎，在緩沖間穿上工作服，戴好帽子、口罩。 （2）開啟超凈工作臺（包括紫外線燈），15分鐘后關閉紫外線燈，用75%的酒精消毒整個超凈工作臺空間（臺面、隔板等），再用酒精紗布擦手至肘彎，然后擦接種工具、工具架和臺面。最后開啟消毒器（或酒精燈）。（3）打開接種盤放置臺面?zhèn)溆?，注意不要用手接觸到接種盤的邊緣和盤面。當消毒器的溫度上升至285℃時，把接種工具插入消毒器，60秒后取出放置工具架上備用。（4）母苗準備：在超凈工作臺外用酒精擦拭母苗瓶，尤其是瓶蓋接口部份（5）培養(yǎng)基準備：檢查所用的培養(yǎng)基類型是否正確，然后放置一部分在工作臺上。接種（1）母苗的取出。用酒精火焰燎一圈瓶蓋接口部份，再打開瓶蓋，取出母苗。取母苗時，母苗、鑷子和手絕對不能接觸瓶口。（2）切割 按照各品種、階段的工藝要求進行操作。（3）接種 擰開瓶蓋，瓶蓋向上放于玻璃瓶上，玻璃瓶要放在工作臺右前方。接好苗后，旋好瓶蓋，鑷子和手絕對不能接觸瓶口。（4）重復以上工作，直至完成當班工作收尾工作（1）切斷工作臺、消毒器電源，清理臺面；用記號筆在已接種的組培瓶的瓶壁上記錄接種日期和批號、品種，然后送至培養(yǎng)室。所用空母苗瓶拿到洗滌室；其它雜物倒入垃圾桶，并馬上提離接種室，及時倒掉垃圾、清潔消毒備用。（2）每天進行一次清潔衛(wèi)生檢查。室內不得有灰塵、昆蟲以及昆蟲尸體等。如有發(fā)現(xiàn)，要隨時進行清潔。接種室專用垃圾桶要在清潔干凈的狀態(tài)下，才能拿進接種室。（3）在記錄部上記錄好當班接種的品種和數(shù)量注意事項（1）。（2）每15天對空調濾網進行一次清洗，對墻體、以及室內的物品進行擦拭；并熏蒸消毒。60天對超凈工作臺進行一次徹底清潔。（3）接種室內除了接種室需要使用的東西，其他任何物品都不允許在接種室內出現(xiàn)。臨時使用物品在使用結束時，馬上拿出接種室。（六）培養(yǎng)室進入培養(yǎng)室必須洗手、穿好工作服，換上專用鞋。除工作人員外，其他任何人員進入培養(yǎng)室必須經過負責人同意。每天上、下午各觀察兩次培養(yǎng)室內溫濕度計的溫度、濕度，并作好記錄。使溫度、相對濕度達到規(guī)定要求。如溫度、濕度按照要求有偏差，要利用空調機進行調整。注意觀察培養(yǎng)室的燈光、空調等電器設備使用情況。如發(fā)現(xiàn)異常，要及時做好記錄，并通知有關人員進行修理。每10天檢查清理污染苗一次，把污染苗拿出培養(yǎng)室，并記錄品種、批號、數(shù)量。每3天進行一次清潔衛(wèi)生檢查。室內不得有灰塵、動物以及昆蟲尸體等。如有發(fā)現(xiàn)，要隨時進行清潔。每7～10天進行一次熏蒸消毒。每14天清洗一次空調濾網。每28天對室內的鐵架、地面等進行一次擦拭。每天對進出培養(yǎng)室的瓶苗進行登記，并綜合成旬報。培養(yǎng)室內除了培養(yǎng)室需要使用的東西，其他任何物品都不允許在培養(yǎng)室內出現(xiàn)。臨時使用物品在使用結束時，馬上拿出培養(yǎng)室。二．2．育苗操作規(guī)程流程：外植體集采 外植體接種 繼代培養(yǎng) 分化培養(yǎng) 生根培養(yǎng) 出瓶 大田移栽 循環(huán)繼代（一）外植體（種源）采集：選用飽滿的果實，忌用畸形或開裂的果實。必須是品種來源確切的野生或人工栽培的石斛種子。在每年的10～12月，將接近成熟的蒴果連莖一起剪下。種子可以馬上使用，也可以將種子用柔軟、吸水的紙包好放在塑料袋內密封。放置5～10℃環(huán)境中保存。種子保存時間不宜超過6個月，否則容易引起開裂。如有蒴果開裂現(xiàn)象不可使用。（二）外植體接種種子（蒴果）消毒取果實用洗衣粉洗干凈，用自來水沖洗15分鐘→%氯化汞溶液浸泡10分鐘→無菌水沖洗4～5次→75%酒精漂洗15秒→放置在酒精燈火焰上迅速轉動燒灼約30秒→冷卻后取出蒴果內種子進行培養(yǎng)。培養(yǎng)光照光周期用11～12小時，光照強度600～800LX 溫度培養(yǎng)室內保持溫度25177。2℃。3．濕度要求室內保持60%～70%的相對濕度。誘導培養(yǎng)基：用MS1作為培養(yǎng)基。每升加蔗糖30 g， g（強度1000g/cm2）?！?。（三）繼代培養(yǎng)在無菌條件下，用無菌的鑷子從培養(yǎng)瓶中取出原球莖，將它們放在無菌的器皿中。用鑷子把成團的原球莖組織分成若干小團（一般10mm10