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正文內(nèi)容

實驗管理手冊(編輯修改稿)

2025-05-09 06:19 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 無菌物品使用;(3)培養(yǎng)基或方式劑等,應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態(tài),未達到者應廢棄,啟閉式容器,在取出時應將篩孔關閉;(1)取出的物品掉落在地或誤放不潔之處,或沾有水液,均視為受到污染,不可作為無菌物品使用;(2)取出的合格滅菌物品,應存放于貯藏室或防塵柜內(nèi),嚴禁與未滅菌物品混紡;(3)凡屬合格物品,應標有滅菌日期及有效期限。每批滅菌處理完成后,記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。、有毒有菌污物處理要求微生物檢驗所用檢驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理,一律不得帶出實驗室經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物集中存放在制定地方,待統(tǒng)一進行高壓滅菌;或放嚴密大鍋里一起進行水煮沸騰30min,才可處理染菌后的吸管,使用后放入150PPM消毒液或石炭酸液中,最少浸泡4h(消毒液體不得低于浸泡物的高度),再經(jīng)121℃30min高壓滅菌;染片染色洗片的液體,一般可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中,經(jīng)高壓滅菌后方可到入下水道,染色的玻片放入5%酚酞皂溶液中浸泡24h后,煮沸洗滌,做凝集試驗用的玻片或平皿,必須高壓滅菌后再洗滌;打碎的培養(yǎng)物,立即用5%酚酞皂溶液或石炭酸噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭干凈;污染的工作服或進行烈性菌試驗所穿的工作服、帽、口罩等,應放入專用消毒袋內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。、菌種保管要求所保存之菌株要定期傳代,注意無菌操作,使菌株死亡,不污染、不丟失;應設專人妥善保管,菌株保存箱應加鎖放置適宜環(huán)境,取出時應登記;所保存的菌株建冊登記,基本項目應包括菌種名稱、分離來源、分離日期、傳代日期、保存方法、主要性狀、保管者等;保存之菌種,經(jīng)傳代數(shù)次后,應進行一次系統(tǒng)生化反映性狀及血清學特性、毒力測定等主要生物學性狀觀察,以檢查其是否發(fā)生變異;所保管之菌種,不能隨意轉(zhuǎn)讓其它單位和個人,需要時應有單位證明和批準手續(xù)方可供應;菌種保存有多種方法,較常用的有半固體穿刺或瓊脂斜面培養(yǎng),一般37℃培養(yǎng)18h左右,在試管上表清菌種編號,進入適量滅菌液體石蠟或用半固體瓊脂,液面高于接種培養(yǎng)物1cm左右,然后用固體石蠟封管面塞或橡皮塞、登記后置4℃冰箱,可保存3-6個月傳代一次,該方法簡便易行,但菌株易發(fā)生生物學性狀變異,最好是冷凍真空干燥保存,可達到長期保存效果。、培養(yǎng)基置備要求培養(yǎng)基置備的質(zhì)量將直接影響微生物生長,因為各種微生物對基培養(yǎng)要求不完全相同,培養(yǎng)目的不同,各種培養(yǎng)基置備要求如下:根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對應用的試劑藥品應進行質(zhì)量檢驗;PH測定及調(diào)節(jié):PH測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進行,因為熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當測定好時,按計算量加入堿或酸混勻后,應再測試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準確,否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察,但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)過多,以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,指示劑、去癢膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完PH后再加入;培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用的瓊脂條要洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度;盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)為玻璃容器為好;培養(yǎng)的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價值,一般121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入;每批培養(yǎng)基置備好后,應做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗,如果是生化培養(yǎng)基,使用標準菌株接種培養(yǎng),觀察生化反應結(jié)果,應呈正常反應,培養(yǎng)基不應貯存過久,必要時可置4℃冰箱存放;目前各種干燥培養(yǎng)基較多,每批需用標準菌株進行生長試驗或生化反應觀察,各種培養(yǎng)基用相應菌株生長試驗良好后方可應用,新購進的或存放過久的干燥培養(yǎng)基,在配制時也應測PH,使用時需根據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法進行;每批置備的培養(yǎng)基所用化學試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結(jié)果、制作人員等應做好記錄,以備查詢。、樣品采集及處理要求所采集的檢驗樣品一定要具有代表性,采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進行詳細調(diào)查,檢查是否有污染源存在;根據(jù)食品的種類及數(shù)量,采樣數(shù)量及方法應按標準檢驗方法的要求進行;采用應注意無菌操作,容器必須滅菌,避免環(huán)境中微生物污染,容器不得使用酚酞皂溶液、新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌,更不能含有此類消毒藥物或抗生素藥物,以避免殺死樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可應有;樣品采集后應立即送往實驗室進行檢驗,送檢過程中一搬不超過3h,如路程較遠,可保存在1-5℃環(huán)境中,如需冷凍者,則在凍存狀態(tài)下送檢;實驗室收到樣品后,進行登記(樣品名稱、地址、數(shù)量、日期、編號等),觀察樣品的外觀,如果發(fā)現(xiàn)有下列情況之一者,可拒絕檢驗:(1)樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其它方法殺菌者,失去代表原食品檢驗意義者,(2)瓶、袋裝食品已啟開者,熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整折(食物中毒樣品除外);(3)按規(guī)定采樣數(shù)量不足者對送檢符合要求的樣品,實驗室收到后,應立即進行檢查,如果條件不具備,應置4℃冰箱存放,及時準備創(chuàng)造條件,然后進行檢查。第七章 檢驗檢測、目的確保檢驗檢測工作按標準要求實施、使用范圍、適用于以本企業(yè)原料、半成品、成品,加工用水、冰,環(huán)境、工器具等到的檢驗、規(guī)定了出口水產(chǎn)品的檢驗場所、設備、抽樣、品質(zhì)、規(guī)格、重量、包裝、感官物理檢驗方法、職責實驗員負責檢驗檢測工作的實施、工作程序、凡出口食品的微生物學檢驗,必須按出口食品微生物學檢驗方法標準執(zhí)行、在檢驗中和食品及其稀釋液、試劑、培養(yǎng)基接觸的一切器皿必須經(jīng)過有效的滅菌,所有檢驗操作,必須嚴格遵循無菌操作程序。、置備試劑和培養(yǎng)基所用的水,應為無離子水或玻璃器皿蒸餾的蒸餾水,水的質(zhì)量應符合以下規(guī)格:a;b;c、-;d、實驗室所用儀器、設備的性能,應定期檢查和校正;、新購的試劑和脫水合成培養(yǎng)基,在使用前應用已知菌進行試驗,被測菌能正常在其中生長時,方可使用。、每次檢驗都應用已知陽性菌和陰性菌作對照;、檢驗結(jié)束后,所有帶菌的培養(yǎng)基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快滅菌和洗刷,清洗過的器皿,不應殘留洗滌劑痕跡、檢驗方法與標準、檢測和校準方法及方法的確認所有與實驗室工作有關的指導書、標準、手冊和參考資料應保持現(xiàn)行有效并易于員工取閱(),對檢測和校準方法的偏離,僅應在該偏離已被文件規(guī)定、經(jīng)技術判斷、授權(quán)和客戶同意的情況下才允許發(fā)生。注:如果國際的、區(qū)域的或國家的標準,或其它公認的規(guī)范已包含了如何進行檢測和/或校準的見面和足夠信息,并且這些標準是以可被實驗室操作人員作為公開文件使用的方式書寫的時,則不需要進行補充或改寫為內(nèi)部程序,對方法中的可選擇,可能有必要制定附加或補充文件。、方法的選擇實驗室應采用滿足需要并適用于所進行的檢測和/或校準的方法,包括抽樣的方法,應優(yōu)先使用以國際、區(qū)域或國家標準發(fā)布的方法,實驗室應確保使用標準的有效版本,除非該版本不適宜或不可能使用,必要時,應采用附加細則對標準加以補充,以確保應用的一致性。當客戶未指定所用方法時,實驗室應選擇以國際、區(qū)域或國家標準發(fā)布的,或由知名的技術組織或有關科學書籍和期刊公布的,或由設備制造商制定的方法,實驗室制定的或采用的方法如能滿足實驗室的預期用途并經(jīng)過驗證,也可使用,所選用的方法應通知客戶,在當認為客戶提出的方法不適合或已過期時,實驗室應通知客戶。、實驗室制定的方法實驗室為其應用而制定檢測和校準方法的過程應是有計劃的活動,并應指定具有足夠資源的有資格的人員進行計劃應隨方法制定的進度加以更新,并確保所有有關人員之間的有效溝通、非標準方法當必須使用標準方法中未包含的方法時,應征得客戶的同意,包括對客戶要求的明確說明以及檢測和/或校準的目的,所制定的方法在使用前應經(jīng)適當?shù)拇_認注:對新的檢測和/或校準方法,在進行檢測和/或校準之前需制成程序,程序中至少需包含下列信息:a)適當?shù)淖R別;b)范圍;c)被檢測或校準物品類型的描述;d)被測定的參數(shù)或量的范圍;e)裝置和設備,包括技術性能要求;f)所需的參考標準和標準物質(zhì)(參考物質(zhì));g)要求的環(huán)境條件和所需的穩(wěn)定周期;h)程序的描述,包括:——物品的附加標識標志、處置、運輸、存儲和準備;——工作開始前進行的校核;——檢查設備工作是否正常,需要時,在每次使用之前對設備進行校準和調(diào)整;——觀察和結(jié)果的記錄方法;——需遵循的安全措施;i)接受(或拒絕)的準則和(或)要求;j)需記錄的數(shù)據(jù)以及分析和表達的方法;k)不確定度或評定不確定度的程序、方法的確認確認是通過核查并提供客觀證據(jù),以證實某一特定預期用途的特殊要
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