pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)說明(編輯修改稿)
2025-05-04 06:25 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 如需處理大分子DNA，應(yīng)具有超聲波水浴儀。 （三） 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 核酸擴(kuò)增儀 微量加樣器（覆蓋11000ul） 可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心） 專用工作服和工作鞋 專用辦公用品 (四)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 視檢驗(yàn)方法不同而定?；緝x器設(shè)備如下： 微量加樣器（覆蓋11000ul） 可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面） 消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭（帶濾心） 專用工作服和工作鞋 專用辦公用品。PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)程中規(guī)定人員和樣品必須單向流動(dòng)。即從 “試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品制備區(qū)，再從樣品制備走向擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)”，絕對(duì)不能反向流動(dòng)，以辟免交叉污染。氣流方向只規(guī)定試劑準(zhǔn)備區(qū)為微正壓或常壓，樣品制備區(qū)為常壓或負(fù)壓，擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)為負(fù)壓，壓力梯度是從試劑準(zhǔn)備到產(chǎn)物分析區(qū)，是高到低的。規(guī)程并沒有規(guī)定要做成全新風(fēng)系統(tǒng)，但是為降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)，建議做成全新風(fēng)系統(tǒng)。1概述臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)，是專門用來檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門的禽疫病診斷。但是，這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對(duì)安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視，因?yàn)樗鼘?duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局，空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制和污染的防制幾個(gè)方面對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中的主要特點(diǎn)進(jìn)行了闡述。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。因此，實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問題進(jìn)行的。下面就對(duì)這幾個(gè)方面分別進(jìn)說明。2PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。PCR實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖如圖1所示。圖1PCR實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖3實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。16
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