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正文內(nèi)容

pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)說明-文庫吧資料

2025-04-13 06:25本頁面
  

【正文】 1各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局下面就對這幾個(gè)方面分別進(jìn)說明。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。近年來對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視,因?yàn)樗鼘z測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。由于該檢測方法可以測出普通檢驗(yàn)難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點(diǎn),因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn),是專門用來檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。概述規(guī)程并沒有規(guī)定要做成全新風(fēng)系統(tǒng),但是為降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),建議做成全新風(fēng)系統(tǒng)。即從 “試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品制備區(qū),再從樣品制備走向擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)”,絕對不能反向流動(dòng),以辟免交叉污染。 專用辦公用品。 專用工作服和工作鞋 消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭(帶濾心) 可移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面) 微量加樣器(覆蓋11000ul)基本儀器設(shè)備如下: 如需處理大分子DNA,應(yīng)具有超聲波水浴儀。 專用辦公用品 專用工作服和工作鞋 消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 生物安全柜 可移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面) 微量加樣器(覆蓋11000ul) 水浴箱或加熱模塊 混允器 高速臺(tái)式冷凍離心機(jī) 28C冰箱、20C或80C冰箱 (二) 標(biāo)本制備區(qū) 專用辦公用品 專用工作服和工作鞋 消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 移動(dòng)紫外燈(近工作臺(tái)面) 微量加樣器(覆蓋11000ul) 混勻器 28C和15C冰箱 (一) 試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)樣本處理區(qū)三、工作區(qū)域及設(shè)備要求●嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。 照明燈具要選用凈化燈具,能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。 地面地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面,整體性好。在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈,對實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的.分析區(qū)擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。標(biāo)本制備區(qū)實(shí)驗(yàn)室的墻體,包括頂棚,應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。 各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。需要指出的是在減少室內(nèi)
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