第十章微生物分類及鑒定幫助你理清基本概念，規(guī)律(編輯修改稿)
2025-05-04 04:00 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 累了不少新的資料。伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊第二版中更多地采用了核酸序列資料對分類群進行新的調(diào)整，無疑這是細菌系統(tǒng)發(fā)育分類的重大進展. 二. 微生物分類鑒定的特征和技術(shù)1987年, Wayne等提出:一個種的所有菌株DNA的相似性接近或大于70%, DTm≤5℃(一個正式的微生物種的分子學(xué)定義)1990年, Murry等提出,再確切的分類應(yīng)該依據(jù)于分子學(xué)特征.1. 形態(tài)學(xué)特征(1)培養(yǎng)特征: 最重要是菌落特征：如菌落的形狀、大小、顏色、隆起、表面狀況、質(zhì)地、光 澤、水溶性色素等 .(2)細胞形態(tài): 形態(tài)(球形、桿狀、弧形、螺旋形、絲狀、分枝及特殊形狀)大小(其中最重要的是細胞的寬度或直徑)排列(單個、成對、成鏈或其他特殊排列方式)(3)特殊的細胞結(jié)構(gòu): 鞭毛(有無鞭毛、著生位置及其數(shù)量)。芽孢(有無芽孢、形狀、著生位置、孢囊是否膨大)孢子(孢子形狀、著生位置、數(shù)量及排列)。其他(莢膜、細胞附屬物為柄、絲狀物、鞘、藍細菌的異形胞、靜止細胞和連 銷體等)。超微結(jié)構(gòu)(細胞壁、細胞內(nèi)膜系統(tǒng)、放線菌孢子表面特征等)(4)細胞內(nèi)含物: 異染顆粒、聚β羥丁酸等類脂顆粒、硫粒、氣泡、伴孢晶體等(5)染色反應(yīng): 革蘭氏染色、抗酸性染色 (6)運動性: 鞭毛泳動、滑行、螺旋體運動方式 2. 生理生化特征以實用為主要目的表型分類中，大量原核生物的屬和種，僅僅根據(jù)形態(tài)學(xué)特征是難以區(qū)分和鑒別的，所以生理生化特征往往是這些醫(yī)學(xué)上或其他應(yīng)用領(lǐng)域中重要細菌分類鑒定的主要特征。(1)營養(yǎng)類型: 光能自養(yǎng)、光能異養(yǎng)、化能自養(yǎng)、化能異養(yǎng)及兼性營養(yǎng)型(2)對氮源的利用能力: 對蛋白質(zhì)、蛋白胨、氨基酸、含氮無機鹽、N2等的利用(3)對碳源的利用能力: 對各種單糖、雙糖、多糖以及醇類、有機酸等的利用(4)對生長因子的需要: 對特殊維生素、氨基酸等的依賴性(5)需氧性: 好氧、微好氧、厭氧及兼性厭氧 (6)對溫度的適應(yīng)性: 最適、最低及最高生長溫度及致死溫度(7)對pH的適應(yīng)性: 在一定pH條件下的生長能力及生長的pH范圍 (8)對滲透壓的適應(yīng)性: 對鹽濃度的耐受性或嗜鹽性(9)對抗生素及抑菌劑的敏感性: 對抗生素、氰化鉀(鈉)、膽汁、弧菌抑制劑或某些染 料的敏感性(10)代謝產(chǎn)物:各種特征性代射產(chǎn)物 (11)與宿主的關(guān)系: 共生、寄生、致病性等值得強調(diào)的是，由于不少生理生化特征是染色體外遺傳因子編碼的、加上影響生理生化特征表達的因素比較復(fù)雜，所以根據(jù)生理生化特征來判斷親緣關(guān)系進行系統(tǒng)分類時，必須與其他特征特別是基因型特征綜合分析，否則就可能導(dǎo)致錯誤的結(jié)論。 3. 血清型和噬菌體型(1).血清型: 細菌細胞和病毒等都含有蛋白質(zhì)、脂蛋白、脂多糖等具有抗原性的物質(zhì)方法:凝集反應(yīng)。沉淀反應(yīng)(凝膠擴散、免疫 電泳)。 補體結(jié)合。直接或間接的免疫熒光抗體技術(shù)。酶聯(lián)免疫等抗原性組分:全細胞、細胞壁、鞭毛、莢膜或粘液層、純化的蛋白質(zhì) (以比較不同細菌同源蛋白質(zhì)之間的結(jié)構(gòu)相似性) 。 血清學(xué)試驗用于微生物分類鑒定主要適用于抗原結(jié)構(gòu)同源程度高(蛋白質(zhì)同源序列70%以上)的微生物種內(nèi)血清型的分類鑒定。例如，根據(jù)鞭毛抗原(H抗原)蘇云金芽孢桿菌分成40多個血清型；根據(jù)莢膜抗原肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)分成近百個血清型；根據(jù)菌體(O)抗原、H抗原和表面(Vi)抗原將沙門氏菌屬細菌分成約2000個血清型等等。血清型的劃分在流行病的研究中有重要意義。(2) 噬菌體型噬菌體對宿主的感染和裂解作用常具有高度的特異性，即一種噬菌體往往只能感染和裂解某種細菌，甚至只裂解種內(nèi)的某些菌株。但也存在宿主范圍較廣泛的噬菌體，是否反映屬種間的系統(tǒng)發(fā)育相關(guān)性及其相關(guān)程度，目前尚沒有明確的解析。 噬菌斑測定 4. 蛋白質(zhì)分析，就會產(chǎn)生特征性的電泳區(qū)帶組成的電泳圖譜，親緣關(guān)系相近的菌株，它們的圖譜也應(yīng)相似。蛋白質(zhì)指紋圖(protein profiles，protein fingerprinting)，已成功地應(yīng)用于種和種以下分類和鑒定。對于屬以上分類單元的分類或鑒定效果較差。 由于蛋白質(zhì)的表達受環(huán)境因素的影響
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