菊花莖段快繁技術(shù)生物技術(shù)及應用(編輯修改稿)
2025-05-01 23:51 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 缺刻及鋸齒。頭狀花序頂生或腋生，一朵或數(shù)朵簇生。舌狀花為雌花，筒狀花為兩性花。舌狀花分為下、匙管、畸四類，色彩豐富，有紅、黃、白、墨、紫、綠、橙、粉、棕、雪青、淡綠等。筒狀花發(fā)展成為具各種色彩的托桂瓣，花色有紅、黃、白、紫、綠、粉紅、復色、間色等色系。花序大小和形狀各有不同，有單瓣，有重瓣；有扁形，有球形；有長絮，有短絮，有平絮和卷絮；有空心和實心；有挺直的和下垂的，式樣繁多，品種復雜。在我國有著悠久的栽培歷史[2] 。菊花主要靠扦插繁殖,也可進行嫁接繁殖。但扦插和嫁接繁殖均需較多的母株材料,且受季節(jié)和外界環(huán)境條件的限制,繁殖速度較慢,對于一些名貴菊花品種和母株來源不足的品種,更不能及時滿足生產(chǎn)和市場的需要。研究和利用組織培養(yǎng)方法來繁殖菊花，可以在短期內(nèi)大量繁殖，使得工廠化育苗成為可能，且利于新品種選育、脫毒復壯、種質(zhì)資源保存等。菊花利用植物組培技術(shù)，可以使用菊花的莖尖、莖段和側(cè)芽作為主選外植體,在不同激素水平的培養(yǎng)基上誘導產(chǎn)生愈傷組織、叢生芽和根,完成植株再生。本文以在脫毒實驗中成功移栽上盆且長勢健壯的普通觀賞菊花的帶腋芽莖段為研究材料，從菊花叢生芽誘導、繼代、生根培養(yǎng)著手研究，以期尋求低成本、高效、穩(wěn)定的菊花莖段增殖方法，提高其商品化生產(chǎn)效率，滿足菊花種苗商品化生產(chǎn)的要求[9]。 材料及預培養(yǎng) 材料：供試材料為脫毒實驗中成功移栽上盆且長勢健壯的普通觀賞菊花。 預培養(yǎng)：將供試盆栽菊花移至室內(nèi)陽光充足處正常恒溫培養(yǎng)5~7天。均以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，附加不同生長激素等配置而成。根據(jù)實際要求，培養(yǎng)基制作[7]見下表：表1 培養(yǎng)基制作配比培養(yǎng)基配比蔗糖瓊脂pH叢生芽誘導MS++3%%繼代培養(yǎng)MS++3%%生根培養(yǎng)1/2MS+3%%將已配好的培養(yǎng)基，趁熱分裝在培養(yǎng)瓶中（每瓶35~50ml），用專用透性膜封好后放入高壓滅菌鍋中滅菌、待用。、器械及超凈工作臺滅菌[6]接種室的地面、墻壁要擦洗干凈，接種前用甲醛或高錳酸鉀稀溶液熏蒸，也可以采用紫外燈滅菌。所需器械先用70%酒精浸泡，待接種前在酒精燈下用火灼燒到變紅，冷卻待用。超凈工作臺啟動前，先用70%酒精擦拭臺面，再打開紫外燈照射20min,同時打開風機。接種前關(guān)閉紫外燈，打開日光燈。選用菊花的帶腋芽莖段作為外植體。選取生長健壯的嫩莖先用洗衣粉水沖洗2次，再用自來水沖洗2次，以洗去表面泥土雜質(zhì)為標準。然后移至超凈工作臺上, 用 75 %酒精處理 20～30 秒, 再用無菌水沖洗 3～5 次, 轉(zhuǎn)入 %升汞溶液浸泡 8～10 分鐘, 再用無菌水沖洗 4～6 次, 用濾紙吸干水分，最后將材料放入無菌的錐形瓶中封口待用。 接種在超凈工作臺內(nèi)，點燃酒精燈,并在酒精燈旁邊工作,注意手和衣袖與酒精燈保持適當?shù)木嚯x,以免燒傷。在酒精燈上將操作用具燒紅,待溫度降至常溫時進行操作。~1厘米左右?guī)в幸秆康男《?。用鑷子夾取切好的外殖體材料,按極性方向直立迅速接種到錐形瓶的培養(yǎng)基中,深約2~3mm,注意培養(yǎng)瓶口始終在火焰下方,盡量使切口接觸培養(yǎng)基。每個錐形瓶可接種3～4 塊外殖體。接種時錐形瓶應保持傾斜,接種后要迅速將瓶口在酒精燈上轉(zhuǎn)動灼燒一遍進行消毒,然后迅速蓋上專用透性膜封好。最后在瓶壁上上標簽,注明接種材料的名稱、編號和接種日期。（叢生芽誘導）培養(yǎng)接種完成后即轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室，即進行初代（叢生芽誘導）培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度22~28℃，光強1000~4000Lux。外植體接種到培養(yǎng)基上７天左右，莖段開始變粗，基部逐漸增大，并在其切口周圍出現(xiàn)少量嫩綠色、質(zhì)地緊密的愈傷組織，同時莖尖也逐漸伸長，腋芽開始萌動展開。經(jīng)過10~15天的培養(yǎng)后，腋芽伸長，并形成叢生芽，逐漸長成苗叢。當叢生芽長至1厘米長時，在超凈工作臺上將芽從中的小芽切割開，分別轉(zhuǎn)入相同的新鮮培養(yǎng)基上繼代增值，每一個小芽又會以同樣的繁殖系數(shù)產(chǎn)生芽從。培養(yǎng)溫度22~25℃，光強2500~4000Lux。一般繼代培養(yǎng)的次數(shù)越多，從接種到長出叢生芽所需的時間越短，但不短于7天，若不及時轉(zhuǎn)接，芽
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