生物醫(yī)用高分子微球的制備與應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-05-01 23:38 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 發(fā)色團(tuán)，通過(guò)測(cè)定其發(fā)光度的變化加以判斷。張文軍[22]等用有封閉活性的抗鈣粘蛋白(Ncadherin)單抗包被的PS微球與表達(dá)鈣粘蛋白的人胚肺細(xì)胞接觸后，誘導(dǎo)細(xì)胞膜上的鈣粘蛋白聚集在微球周?chē)Ｍㄟ^(guò)分子免疫熒光定位分析，揭示細(xì)胞內(nèi)粘著斑分子間相互作用的鏈條關(guān)系及相關(guān)的信號(hào)通路。這是一種將細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)定位與功能研究有機(jī)結(jié)合的新技術(shù)。 生物大分子的純化分離 利用高分子微球?qū)ι锎蠓肿拥奈?解吸來(lái)達(dá)到純化分離的目的。PNIPAAm微球在其LCST上下流體動(dòng)力學(xué)尺寸和親水/疏水性發(fā)生變化，這種熱敏特性已被用來(lái)純化分離一些生物大分子，如肌紅蛋白(MG)、a乳清蛋白(LA)、溶菌酶(LZ)和核糖核酸酶A(RNase)等。將含熱敏性PNIPAAm的微球在溫度低于LCST條件下加入到待分離的生物大分子(如蛋白質(zhì))混合液中,此時(shí)微球因水合作用而膨脹，然后升溫至LCST以上，微球又因脫水而收縮，于是大量的生物大分子就吸附到微球上。將微球分離出來(lái)后，再在LCST 以下將吸附在微球上的生物大分子解吸下來(lái)。如此反復(fù)操作，即可達(dá)到分離純化生物大分子的目的[23]。 核酸雜交的固定 將固定在固相載體上的核酸作為探針進(jìn)行核酸雜交在核酸技術(shù)中占有十分重要的地位。其原理是，固定化的單鏈核酸在溶液中與具有互補(bǔ)堿基序列的多核苷酸片段冷卻時(shí)形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，從而達(dá)到對(duì)特定DNA的檢測(cè)和序列分析的目的。姚萍[24]等將寡聚核苷酸的539。端定向聯(lián)接到或直接將單鏈的DNA的5′端聯(lián)接到表面帶有甲胺基(CH2NH2)官能團(tuán)的PS微球上，制得了長(zhǎng)鏈的DNA探針。這種探針在較高溫度下仍有相當(dāng)高的聯(lián)接效率。所以功能化的高分子微球是一種較為理想的核酸雜交的固定載體。 酶的固定化 把酶固定在微球上有物理吸附和化學(xué)結(jié)合兩種方式。通常化學(xué)結(jié)合有由共價(jià)鍵偶聯(lián)和由多功能基化合物交聯(lián)等，而直接的物理吸附力比較弱，通常還需用雙功能基化合物(如戊二醛，e氨基己酸等)交聯(lián)。固定在功能性微球上的酶不僅具有較高的pH穩(wěn)定性，熱穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性，而且易與反應(yīng)物分離，可以重復(fù)使用，提高使用效率。同時(shí)，多酶聯(lián)合固定化的微球可以促進(jìn)多酶反應(yīng)。柏正武[25]等用聚丁二酰亞胺和3氨基丙基硅膠制得微球，用作固定化酶的載體，其中聚丁二酰亞胺和3氨基丙基硅膠之間以共價(jià)鍵相連，這種酶的固定化實(shí)用性強(qiáng)，便于工業(yè)化。3 微球在醫(yī)學(xué)診治中的應(yīng)用 免疫細(xì)胞檢查 利用表面帶有COOH官能團(tuán)的高分子微球在較溫和的條件下與免疫細(xì)胞物質(zhì)中的NH2發(fā)生偶聯(lián)的特性，把抗原固定到單分散微球的表面，然后加入抗體，利用抗體使固定抗原的微球發(fā)生凝聚的原理，再用分光光度計(jì)測(cè)定凝聚的有無(wú)和多少來(lái)測(cè)定免疫細(xì)胞量[26]。 病毒脫除 其原理與生物大分子的純化分離類(lèi)似。結(jié)合有一定生物活性分子的高分子微球?qū)δ承┎《揪哂泻芨叩淖R(shí)別和親和能力。利用這種特性，就可以用它來(lái)分離除去一些較難用藥物治愈的病毒。Akashi[5]等利用功能性高分子微球用于脫除HIV1病毒(Human Immunodeficiency Virus1,又稱(chēng)愛(ài)滋病病毒)，發(fā)現(xiàn)脫除率可達(dá)97%。脫除的方法是：首先在微球表面引入帶有羧基的高分子鏈，進(jìn)而通過(guò)縮合反應(yīng)把伴刀豆
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