生物醫(yī)用高分子微球的制備與應用(編輯修改稿)
2025-05-01 23:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 發(fā)色團，通過測定其發(fā)光度的變化加以判斷。張文軍[22]等用有封閉活性的抗鈣粘蛋白(Ncadherin)單抗包被的PS微球與表達鈣粘蛋白的人胚肺細胞接觸后，誘導細胞膜上的鈣粘蛋白聚集在微球周圍。通過分子免疫熒光定位分析，揭示細胞內(nèi)粘著斑分子間相互作用的鏈條關(guān)系及相關(guān)的信號通路。這是一種將細胞內(nèi)蛋白質(zhì)定位與功能研究有機結(jié)合的新技術(shù)。 生物大分子的純化分離 利用高分子微球?qū)ι锎蠓肿拥奈?解吸來達到純化分離的目的。PNIPAAm微球在其LCST上下流體動力學尺寸和親水/疏水性發(fā)生變化，這種熱敏特性已被用來純化分離一些生物大分子，如肌紅蛋白(MG)、a乳清蛋白(LA)、溶菌酶(LZ)和核糖核酸酶A(RNase)等。將含熱敏性PNIPAAm的微球在溫度低于LCST條件下加入到待分離的生物大分子(如蛋白質(zhì))混合液中,此時微球因水合作用而膨脹，然后升溫至LCST以上，微球又因脫水而收縮，于是大量的生物大分子就吸附到微球上。將微球分離出來后，再在LCST 以下將吸附在微球上的生物大分子解吸下來。如此反復操作，即可達到分離純化生物大分子的目的[23]。 核酸雜交的固定 將固定在固相載體上的核酸作為探針進行核酸雜交在核酸技術(shù)中占有十分重要的地位。其原理是，固定化的單鏈核酸在溶液中與具有互補堿基序列的多核苷酸片段冷卻時形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，從而達到對特定DNA的檢測和序列分析的目的。姚萍[24]等將寡聚核苷酸的539。端定向聯(lián)接到或直接將單鏈的DNA的5′端聯(lián)接到表面帶有甲胺基(CH2NH2)官能團的PS微球上，制得了長鏈的DNA探針。這種探針在較高溫度下仍有相當高的聯(lián)接效率。所以功能化的高分子微球是一種較為理想的核酸雜交的固定載體。 酶的固定化 把酶固定在微球上有物理吸附和化學結(jié)合兩種方式。通?；瘜W結(jié)合有由共價鍵偶聯(lián)和由多功能基化合物交聯(lián)等，而直接的物理吸附力比較弱，通常還需用雙功能基化合物(如戊二醛，e氨基己酸等)交聯(lián)。固定在功能性微球上的酶不僅具有較高的pH穩(wěn)定性，熱穩(wěn)定性和貯存穩(wěn)定性，而且易與反應物分離，可以重復使用，提高使用效率。同時，多酶聯(lián)合固定化的微球可以促進多酶反應。柏正武[25]等用聚丁二酰亞胺和3氨基丙基硅膠制得微球，用作固定化酶的載體，其中聚丁二酰亞胺和3氨基丙基硅膠之間以共價鍵相連，這種酶的固定化實用性強，便于工業(yè)化。3 微球在醫(yī)學診治中的應用 免疫細胞檢查 利用表面帶有COOH官能團的高分子微球在較溫和的條件下與免疫細胞物質(zhì)中的NH2發(fā)生偶聯(lián)的特性，把抗原固定到單分散微球的表面，然后加入抗體，利用抗體使固定抗原的微球發(fā)生凝聚的原理，再用分光光度計測定凝聚的有無和多少來測定免疫細胞量[26]。 病毒脫除 其原理與生物大分子的純化分離類似。結(jié)合有一定生物活性分子的高分子微球?qū)δ承┎《揪哂泻芨叩淖R別和親和能力。利用這種特性，就可以用它來分離除去一些較難用藥物治愈的病毒。Akashi[5]等利用功能性高分子微球用于脫除HIV1病毒(Human Immunodeficiency Virus1,又稱愛滋病病毒)，發(fā)現(xiàn)脫除率可達97%。脫除的方法是：首先在微球表面引入帶有羧基的高分子鏈，進而通過縮合反應把伴刀豆
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