掃描電子顯微鏡生物樣品制備與觀察細(xì)胞生物學(xué)實驗報告(編輯修改稿)
2025-05-01 23:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 圖11所示。電子槍、聚光鏡和物鏡等組成掃描電鏡的電子光學(xué)系統(tǒng)。電子槍發(fā)射的電子經(jīng)聚光鏡和物鏡的會聚作用形成極細(xì)的電子束入射樣品。在掃描偏轉(zhuǎn)線圈的控制下，入射電子束在樣品表面做光柵狀掃描。掃射過程中產(chǎn)生的二次電子由光電倍增管檢測，該信號經(jīng)視頻放大器放大后輸入觀察顯示器的柵極以調(diào)制其亮度。由于入射電子束與觀察顯示器的掃描偏轉(zhuǎn)線圈均由同一掃描信號發(fā)生器控制，所以兩者掃描同步。當(dāng)入射電子束對樣品某區(qū)域掃描時，在顯示器上可以觀察到該區(qū)域的二次電子像。像點(diǎn)的亮度與樣品物點(diǎn)上所產(chǎn)生的二次電子信號強(qiáng)度相關(guān)。當(dāng)來自物點(diǎn)的二次電子信號強(qiáng)時，對應(yīng)的像亮點(diǎn)；反之則暗。掃描電子顯微鏡的技術(shù)指標(biāo)分辨率、加速電壓和放大倍數(shù)是掃描電鏡的基本技術(shù)參數(shù)。掃描電鏡的分辨率通常指二次電子像分辨率，該分辨率與入射電子束斑直徑有關(guān)。配備熱發(fā)射電子槍的掃描電鏡分辨率約為3nm，而高分辨率場發(fā)射掃描電鏡的分辨率在1nm左右。掃描電鏡加速電壓范圍約為120kV。掃描電鏡的放大倍數(shù)由觀察顯示器的尺寸與入射電子束在樣品掃描區(qū)域尺寸之間的比值決定。通過改變?nèi)肷潆娮邮鴴呙鑵^(qū)域的大小，可以提高或降低放大倍數(shù)，其范圍為數(shù)十倍至數(shù)十萬倍。二次電子像的襯度機(jī)制二次電子的產(chǎn)率η定義為二次電子數(shù)與入射電子數(shù)之間的比值，并且η∝1／cosθ，θ為入射電子束與樣品表面法線之間的夾角。由于樣品表面不是平整的，各點(diǎn)的θ值與η值不同，即樣品表面各點(diǎn)的二次電子信號強(qiáng)度不同。因此二
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