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正文內(nèi)容

微生物試題(問(wèn)答)(編輯修改稿)

2025-05-01 23:26 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 殖的真核微生物和能夠發(fā)生接合的原核微生物,可通過(guò)人工雜交的方法獲得新種,人工雜交是使兩個(gè)同種或同屬的個(gè)體細(xì)胞進(jìn)行接合,從中篩選帶有新遺傳性狀的個(gè)體。(3)原生質(zhì)體育種:包括原生質(zhì)體誘變育種和原生質(zhì)體融合育種。原生質(zhì)體誘變育種是以原生質(zhì)體為出發(fā)菌,用物理、化學(xué)的誘變劑處理,然后使細(xì)胞壁再生,從中挑選高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的變異菌株。原生質(zhì)體融合育種是用人工方法強(qiáng)制二親本細(xì)胞發(fā)生融合,從而可能導(dǎo)致遺傳重組,產(chǎn)生新型的遺產(chǎn)后代。(4)基因工程:建立在分子水平上的基因人工轉(zhuǎn)移技術(shù)。用人工方法在離體條件下得到所需的外源基因,然后把這個(gè)外源基因連接在載體DNA上,并通過(guò)轉(zhuǎn)化或其他方法把帶有外源基因的載體引入受體細(xì)胞,從而可使受體細(xì)胞獲得外源基因的遺傳信息,并進(jìn)行正常的復(fù)制表達(dá)和遺傳。1原核微生物的基因重組方式:答:(1)接合:兩個(gè)細(xì)菌細(xì)胞接觸,相互之間暫時(shí)溝通,并傳遞遺傳物質(zhì)的過(guò)程。F+F-—→F++F+HfrF—→Hfr+F-(大多數(shù)情況下)F39。F-—→F39。+F39。(2)轉(zhuǎn)化:細(xì)菌的無(wú)細(xì)胞DNA片段轉(zhuǎn)入到另一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞上,并使后者獲得了新遺傳性狀的現(xiàn)象。(3)轉(zhuǎn)導(dǎo):以噬菌體為媒介,將供體細(xì)胞的DNA片段攜帶到受體細(xì)胞中,從而使受體細(xì)胞中獲得了供體細(xì)胞部分遺傳性狀的現(xiàn)象。1遺傳物質(zhì)在微生物細(xì)胞中的存在形式:答:遺傳物質(zhì)在真核微生物和原核微生物細(xì)胞中存在方式是不同的。(1)真核微生物:酵母菌、霉菌、單細(xì)胞藻類和原生動(dòng)物等的遺傳物質(zhì)DNA主要以染色體的形式存在于細(xì)胞核中,核有核膜包圍。在染色體中,DNA與蛋白質(zhì)相結(jié)合。多數(shù)真核微生物細(xì)胞中99%以上的DNA集中在細(xì)胞核中,只有少量的DNA存在于葉綠體、線粒體、中心體等細(xì)胞器中。(2)原核微生物:細(xì)菌、放線菌等的DNA在細(xì)胞內(nèi)是以裸露狀態(tài)存在的,它不與蛋白質(zhì)結(jié)合,也沒(méi)有核膜包圍。原核微生物的細(xì)胞核僅僅是由DNA纏繞在一起形成的一個(gè)核區(qū)。一個(gè)核一般只有一條雙鏈的DNA分子,呈環(huán)狀或線狀。在原核微生物的核外也有一些小型的環(huán)狀或線狀的DNA結(jié)構(gòu),分散于細(xì)胞質(zhì)中,叫質(zhì)粒。1微生物遺傳的特點(diǎn):答:(1)有DNA也有RNA高等生物中,遺傳物質(zhì)是DNA。在微生物中,真核微生物及原核微生物的遺傳物質(zhì)也是DNA,而病毒中有的是DNA,有的是RNA。(2)有雙鏈也有單鏈高等生物中,遺傳物質(zhì)DNA都是雙鏈結(jié)構(gòu)。在微生物中,真核微生物和原核微生物的DNA也是雙鏈;而病毒中,無(wú)論是DNA或RNA,都既有雙鏈,也有單鏈。DNA分子中的堿基配對(duì)原則:答:A與T配對(duì),G與C配對(duì)。2誘變育種的基本程序。答:誘變育種大致可分為誘變階段、初篩階段、復(fù)篩階段、鑒定階段、培養(yǎng)階段等。(1)誘變階段:是整個(gè)誘變育種的基礎(chǔ),也是能否獲得預(yù)期效果的成敗的關(guān)鍵。出發(fā)菌株的選擇:通過(guò)誘變前的探索性試驗(yàn)確定,對(duì)誘變劑敏感的菌株,變異率和正變率都高的菌株,可用作出發(fā)菌;誘變劑、劑量和處理方式的選擇:誘變劑的作用是導(dǎo)致微生物發(fā)生突變。通過(guò)實(shí)驗(yàn),把誘變劑的劑量與死亡率、變異率、正變率、負(fù)變率作曲線,根據(jù)曲線找出微生物出現(xiàn)的變異率和正變率最高時(shí)的處理?xiàng)l件和使用的劑量范圍,即為最佳的處理方式和最佳劑量。(2)初篩階段:初篩是誘變劑處理后的第一次篩選,也是要在大量的處理菌中挑選出發(fā)生正變異的菌株,初篩階段工作量的大,因此要簡(jiǎn)化初篩方法,主要是簡(jiǎn)化培養(yǎng)方法和分析方法??股鼐N篩選中采用瓊脂塊預(yù)選法;蛋白酶菌種篩選中采用酪素培養(yǎng)平皿預(yù)選法;淀粉酶菌種篩選中采用淀粉固體培養(yǎng)基碘色反應(yīng)觀察法。(3)復(fù)篩階段:復(fù)篩是以出發(fā)菌株作對(duì)照的條件下,反復(fù)對(duì)初篩中挑選到的正變異菌株進(jìn)行比較,從中選出有進(jìn)一步試驗(yàn)價(jià)值的變異株。在復(fù)篩中,方法必須嚴(yán)格,產(chǎn)物的分析必須力求準(zhǔn)確、詳盡。(4)鑒定階段:為了肯定新獲得的菌株是否有應(yīng)用和生產(chǎn)的價(jià)值,還要在復(fù)篩的基礎(chǔ)上對(duì)新菌株進(jìn)行應(yīng)用試驗(yàn)、毒性試驗(yàn)、質(zhì)量分析、性能分析等全面的考察比較,才能對(duì)新菌株作出結(jié)論。(5)培養(yǎng)條件試驗(yàn)階段:通過(guò)鑒定保留下來(lái)的優(yōu)良菌株,還必須進(jìn)行全面、系統(tǒng)的培養(yǎng)條件試驗(yàn)。試驗(yàn)包括:篩選出最佳培養(yǎng)基配方(如碳源及濃度、氮源及濃度、最佳C/N濃度、需要生長(zhǎng)因子的種類及濃度等);最適的種齡和接種量;各種無(wú)機(jī)離子(包括金屬離子)對(duì)生長(zhǎng)、代謝及發(fā)酵的影響;最適的通氣量(包括生長(zhǎng)的通氣量和發(fā)酵的通氣量);最適的pH值(包括起始pH、生長(zhǎng)及代謝的最適pH、最終的pH等);最適培養(yǎng)時(shí)間(包括中間補(bǔ)料的時(shí)間)等。最后進(jìn)行擴(kuò)大試驗(yàn),對(duì)整個(gè)誘變育種作出結(jié)論。2在人工誘變后的黑曲霉懸液中篩選出賴氨酸缺陷型菌株的實(shí)驗(yàn)方案:答:(1)富集:可采用制霉菌素濃縮法、菌絲過(guò)濾法、差
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