[農(nóng)學(xué)]第七章植物花藥和花粉培養(yǎng)及單倍體育種(編輯修改稿)
2025-04-18 06:54 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 相同點(diǎn) ：胚狀體成苗途徑、愈傷組織再分化成苗途徑 不同點(diǎn) ：花粉培養(yǎng)：花粉分離收集及培養(yǎng)方式 (需進(jìn)行花粉的分離特殊的花粉誘導(dǎo)培養(yǎng) ) 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花藥有藥壁 (2n)、藥隔 (2n)、花粉 (n)等，因此，再生植株有可能來(lái)自藥壁(2n)、藥隔 (2n)、或起源于數(shù)個(gè)花粉 (n)的嵌合體。 游離花粉粒培養(yǎng)，再生植株為純合體。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 優(yōu)點(diǎn)（與花藥培養(yǎng)比）： a、花藥培養(yǎng)容易受藥壁、花絲、藥隔等體細(xì)胞組織的影響，再生植株會(huì)出現(xiàn)不同倍性的個(gè)體，而分離的花粉培養(yǎng)可以克服這一不足。 b、能更好調(diào)節(jié)控制核發(fā)育的各種因子，而且可以直接從單細(xì)胞開(kāi)始觀察整個(gè)雄核發(fā)育的過(guò)程，為研究雄核的生理生化等問(wèn)題提供方便。 c、原則上將，從花粉培養(yǎng)能得到更多的花粉植株。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉分離收集： 由于花粉包于花藥內(nèi)，必須將它們從花藥中分離、收集才能進(jìn)行培養(yǎng)。方法： 1）機(jī)械擠壓法：主要有擠壓法和研磨過(guò)濾收集法 擠壓法： 是將花藥消毒后，加入少量的分離溶液，用鑷子或小玻璃棒將花粉從花藥中擠壓出來(lái)，通過(guò)不銹鋼網(wǎng)或尼龍網(wǎng)篩去組織碎片，收集懸浮液，然后用 30％蔗糖離心收取懸浮在蔗糖溶液上層的完整花粉粒，再用培養(yǎng)基洗滌幾次后用于培養(yǎng)。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉分離收集 1）機(jī)械擠壓法 研磨過(guò)濾收集法： 在無(wú)菌條件下，將采集到的花蕾經(jīng)表面消毒后剝離出花藥，再將花藥置于無(wú)菌的研缽中研磨并擠出小孢子，同時(shí)濾去藥壁等大的組織碎片，經(jīng)離心收集后接種于適宜培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的方法。 2)自然散落法： 將花藥接種于液體培養(yǎng)中，使花粉自然釋放，再進(jìn)行收集培養(yǎng)。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉分離收集 3）機(jī)械游離法 :主要有磁攪拌法和小型攪拌法。 磁攪拌法 ：利用機(jī)械力使花藥壁破裂至花粉溢出的方法。 小型攪拌法： 又稱超速旋切法，是通過(guò)轉(zhuǎn)軸的高速轉(zhuǎn)動(dòng)帶動(dòng)花蕾、穗子切段或花藥高速運(yùn)動(dòng)而使之破裂，從而使小孢子游離出業(yè)，經(jīng)過(guò)分級(jí)過(guò)篩收集后進(jìn)行培養(yǎng)。 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉分離收集 花粉純化：需經(jīng)過(guò)篩、梯度離心、收集等步驟。 梯度離心前 （小孢子形態(tài)、活力不一致） 30%蔗糖梯度離心后 （獲得均一的小孢子群體） 一、花藥與花粉培養(yǎng) 花粉的培養(yǎng)方法：與第五章相似 平板培養(yǎng) 花粉置瓊脂固化培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 液體培養(yǎng) 花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，需震蕩，以利通氣。 雙層培養(yǎng) 花粉置固體 液體雙層培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)基制作方法：先鋪一層瓊脂固體培養(yǎng)基，凝固后，在表面加入少量液體培養(yǎng)基。 看護(hù)培養(yǎng) 利用花藥或花藥愈傷組織釋放出的活性
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