無菌工藝驗證-培養(yǎng)基灌封試驗(編輯修改稿)
2025-02-17 18:14 本頁面
【文章內容簡介】 ? 較好的澄明度，較小的粘度 ? 易于除菌過濾 ? 常用培養(yǎng)基： 3％大豆胰蛋白肉湯（ TSB） ? 厭氧培養(yǎng)基僅在特殊情況下使用 ? 培養(yǎng)溫度 ? FDA 2035℃ ，目標值 177。 ℃ ，不少于 14天；如選擇兩個溫度，則每一溫度下至少培養(yǎng) 7天，從低溫開始。 ? PIC 2025℃ 下至少 14天，或，先 2025℃ 下 7天， 然后 3035℃ 下 7天。 31 培養(yǎng)基的選擇試驗 ? 培養(yǎng)基的配制和滅菌 ? 培養(yǎng)基驗證 ? 分裝到若干數量的無菌小瓶或試管 ? 制備三種微生物（枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌的混懸液，菌液濃度控制在 1001000個菌 /ml ? 分別加入菌懸液各 ,每份至少 2瓶（支） ? 培養(yǎng)： 3035℃ （枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌） 2025℃ （白色念珠菌）） ? 觀察：如果在 7天內，每種微生物培養(yǎng)據至少有50%長菌，則可認為培養(yǎng)基可用于無菌工藝驗證。 32 灌裝體積與數量 ? 灌裝體積 ? 每只容器的灌裝體積不少于總容積的 1/3 ? 同樣，灌裝體積也不宜過大 ? 既要考慮到瓶倒轉或旋轉時，培養(yǎng)基能充分接觸到容器和密封件的內表面，又要保證容器內有足夠的氧氣支持微生物生長。 ? 灌封數量 ? 綜合考慮統(tǒng)計學要求和實際生產批量。 ? FDA (5000瓶 )：如果正常生產的批次量低于 5000瓶，則培養(yǎng)基灌封至少應為實際生產線的最大批次量。 ? PIC (3000瓶 )：如果正常生產的批次量低于 3000瓶，則培養(yǎng)基灌封至少應為實際生產線的最大批次量。 33 灌封時間與批次量控制 ? 灌裝時間 ? 對于初始性驗證，培養(yǎng)基灌封實驗應安排在一周內的不同時間進行。 ? 對于再驗證，可選擇在一周結束或其它最差條件下進行。 ? 灌封時間要涵蓋實際生產班次。 ? 批次量控制 ? 初次驗證，至少要連續(xù)成功灌封 3個批次。 ? 再驗證至少需要成功灌封 1個批次。 34 培養(yǎng)基灌封實驗的合格標準 FDA指南（ 2022版）與 EU GMP 附件 1標準統(tǒng)一 1. 灌封量 5000瓶時，若有 1瓶污染，需徹底調查，并重新驗證 (3批 )。 2. 灌封量為 500010000瓶時，若有 1瓶污染，視調查結果決定是否需要重新進行 1批培養(yǎng)基灌封試驗；若有兩瓶污染，必須重新驗證（ 3批），同時進行徹底調查。 3. 灌封量 10000瓶時，若有 1瓶污染，需徹底調查；若有兩瓶污染，必須進行徹底調查，并重新驗證（ 3批）。 注：歐盟標準將自 2022年 3月起執(zhí)行。 35 培養(yǎng)基灌封實驗的合格標準 ? 2022年 3月以前歐盟通用標準：污染率低于 % ? 計算公式：實際污染率 = (95%置信限值 )/(灌封容器數 ) 100% 污染瓶數與 95%置信限值間的關系 污染瓶數 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 95%置信限值 3 36 培養(yǎng)基灌封實驗的合格標準 ? SFDA 化學藥品注射劑基本技術要求（試行） 培養(yǎng)基灌裝試驗的批量與判斷合格的標準 批量（瓶） 3000 4750 6300 7760 允許污染的數量（瓶） 0 ≤ 1 ≤ 2 ≤ 3 37 主題 4:特殊劑型的培養(yǎng)基灌裝驗證方法 38 凍干制劑對培養(yǎng)基灌封的要求 ? 凍干制劑的典型生產流程 ? 配制 → 灌裝 → 凍干 → 加塞 → 軋蓋 ? 第一種方式，模擬裝載 /卸載過程，縮短放置時間（首選） ? 容器內灌封好培養(yǎng)基，以半壓塞狀態(tài)裝入凍干機 ? 凍干機內部分抽真空（ 500mbar），在室溫放置一定的時間，不得冷凍。 ? 用無菌空氣破真空（不使用惰性氣體），全壓塞 ? 軋蓋 缺點 :真空度不能過高，不能照成培養(yǎng)基沸騰。 注意，若所使用的容器透明度不高，應將內容物倒出進行檢查。 ? 凍干制劑培養(yǎng)基灌封試驗的特殊性 ? 對產品在凍干機內放置步驟的模擬 39 凍干制劑對培養(yǎng)基灌封的要求 ? 第二種方式，模擬凍干時間 ? 半壓塞產品在凍干機腔室內的放置時間同于正常工藝。 ? 缺點：耗時長 ? 第三種方式，以經稀釋的培養(yǎng)基模擬凍干過程 ? 容器內灌封好經稀釋的培養(yǎng)基（ diluted medium），以半壓塞狀態(tài)裝入凍干機 ? 模擬凍干過程，直到容器內的培養(yǎng)基大致達到正常濃度（ full strength）為止。 ? 缺點：耗時長，需開發(fā)特殊的凍干程序，營養(yǎng)支持性不均一，影響微生物的存活力。 40 粉針劑對培養(yǎng)基灌封的要求 ? 第一種方法 ? 在灌裝線上直接灌裝液體培養(yǎng)基，灌裝后壓塞 軋蓋或熔封。 ? 第二種方法 ? 先灌裝干粉培養(yǎng)基，再加入注射用水 ? 第三種方法 ? 先灌裝惰性劑，再加入液體培養(yǎng)基 ? 要點 ? 采用第二、三種方法時，所用惰性劑或干粉培養(yǎng)基需事先經過輻射滅菌。 ? 常用惰性劑有聚乙二醇 8000、羧甲基纖維素、乳糖。 41 混懸劑 /半固體制劑對培養(yǎng)基灌封的要求 ? 懸浮劑 ? 需要模擬攪拌或循環(huán)流動的過程。 ? 如果有無菌添加過程，也應進行模擬。 ? 半固體制劑 ? 需要將液體培養(yǎng)基增稠到適當粘度。 ? 可選用瓊脂或羧甲基纖維素作為增稠劑，也可選用其它試劑，但要證明其沒有抑制細菌或真菌的作用。 ? 在培養(yǎng)結束后，需將培養(yǎng)基從塑料或金屬管中擠出檢查其混濁度和真菌菌落，也可進行無菌檢查實驗。 ? 如果選擇顯色培養(yǎng)基遇到污染物變色的方法，則需要對其進行驗證。 42 主題 5：培養(yǎng)基灌裝驗證設計、執(zhí)行與文件編制 43 制訂培養(yǎng)基灌封實驗方案的考慮因素（一） ? 生產線最長運行時間及其造成的相關風險 ? 干預的次數、類型和復雜程度 ? 是否有凍干工序 ? 設備的無菌裝配 ? 總人數和所從事的操作 ? 無菌加入和無菌轉移的次數 ? 班次更換、暫停和必要的更衣 ? 無菌設備的拆卸與
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1