核移植技術(shù)與動(dòng)物克隆(2)(編輯修改稿)
2025-02-17 15:14 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 透明帶結(jié)合并發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放水解酶溶解透明帶。透明帶卵丘細(xì)胞（ 2）獲能精子在接觸放射冠后發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放水解酶溶解放射冠細(xì)胞間質(zhì)。（ 1）獲能精子接近卵冠丘復(fù)合體（ 5）卵母細(xì)胞發(fā)生皮質(zhì)反應(yīng)。皮質(zhì)顆粒胞吐，顆粒內(nèi)容物擴(kuò)散至細(xì)胞表面和透明帶，阻止多精受精。（ 4）精子進(jìn)入卵周腔與卵母細(xì)胞融合，精子細(xì)胞核和部分細(xì)胞器進(jìn)入卵母細(xì)胞。放射冠極體皮質(zhì)顆粒卵母細(xì)胞細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 根據(jù)供體核移入部位的不同可分為帶下移植和胞質(zhì)內(nèi)注射1）帶下移植：將核供體卵裂球放在操作液滴中，用一直徑 接近卵裂球大小的移植針 吸取一枚分離出的完整卵裂球，注入去核卵母細(xì)胞的卵周隙，并使供體細(xì)胞與卵質(zhì)膜接觸2）胞質(zhì)體注射：用注射針（內(nèi)徑 5～ 8181。m）將細(xì)胞核直接注入卵質(zhì)內(nèi)， 一般去核時(shí)留下的口進(jìn)入。 操作的環(huán)境溫度在 3035℃ 左右，帶下和胞質(zhì)內(nèi)注射后需進(jìn)行激活處理。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 正常受精卵的發(fā)育啟動(dòng)和早期卵裂主要由卵母細(xì)胞胞質(zhì)中母源信息所控制，成熟的卵母細(xì)胞質(zhì)能使移人的細(xì)胞核在形態(tài)上和功能上發(fā)生改變。由于微吸管破壞了卵膜和一部分細(xì)胞質(zhì)，同時(shí)移入的細(xì)胞核未與供體細(xì)胞質(zhì)膜發(fā)生緊密聯(lián)系，若直接移植，成功率很低，故需對(duì)重胚進(jìn)行融合。重組胚的發(fā)育需要迸一步激活，卵母細(xì)胞的激活涉及的因素很多，無論是受精卵引起的卵母細(xì)胞激活還是人工的激活，都引起卵母細(xì)胞發(fā)生一系列的反應(yīng)， 這些反應(yīng)是胚胎發(fā)育所必需的，可以采用電激活和化學(xué)激活方法。 激活的原理是通過電刺激、鈣離子載體等方法，使卵母細(xì)胞從減數(shù)分裂 Ⅱ 期中解放出來，并轉(zhuǎn)到 “ 受精 ” 的狀態(tài)。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 重構(gòu)胚需要在體外培養(yǎng)一段時(shí)間以觀察其發(fā)育能力，方可移植到受體，兔和豬重構(gòu)胚在體外培養(yǎng)24h以內(nèi)即可，而羊和牛重構(gòu)胚所需培養(yǎng)時(shí)間較長，一般發(fā)育到囊胚或桑椹胚時(shí)移植。6 . 胚胎移植 重構(gòu)胚的移植與胚胎移植的方法基本一樣，將重構(gòu)胚移入輸卵管或子宮，以期產(chǎn)生克隆動(dòng)物。輸卵管移植一般適用于～ 8細(xì)胞期胚胎。子宮內(nèi)移植適用于桑椹胚到囊胚期階段的胚胎，另外在胚胎移植時(shí)，應(yīng)避免帶入多余的培養(yǎng)液或氣泡。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程里程碑式的突破里程碑式的突破? 19961997年首只體細(xì)胞克隆動(dòng)物年首只體細(xì)胞克隆動(dòng)物 “多莉多莉 ”羊的成羊的成功證明了功證明了 成熟的體細(xì)胞成熟的體細(xì)胞 也具有全能性。也具有全能性。 細(xì)胞工程 細(xì)胞工程多莉培育者之一多莉培育者之一———— 伊斯維姆伊斯維姆 .穆特穆特細(xì)胞工程 細(xì)胞工程細(xì)胞工程 細(xì)胞工程世界首例兔體細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)在 2022年 2月 12日在我國獲得成功 中國農(nóng)科學(xué)院北京畜牧研究國家畜禽分子遺傳育種中心博士后李善剛，日前成功獲得來自胎兒成纖給細(xì)胞的克隆兔。分子生物學(xué)鑒定顯示這是 世界上首例 存活的來自胎兔成纖給細(xì)胞的克隆兔。 家兔的克隆是一個(gè)世界難題。自多莉羊誕生后，世界多個(gè)小組開始克隆兔研究，但只有法國國立農(nóng)業(yè)研究院于 2022年報(bào)道 獲得來自性成熟母兔顆粒細(xì)胞的克隆兔。李善剛等2022年獲得來自成年公兔組織的克隆兔。使用胎兔成纖給細(xì)胞制作獲得存活的克隆兔，在世界上尚屬首次報(bào)道。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆先鋒成果驚為韓國上下尊為國寶。1993年黃禹錫培育出韓國第一頭 “試管牛 ”1999年培育出韓國第一頭克隆奶牛。2022年培育出克隆豬。2022年 2月，率先從人類克隆胚胎中提取出 “成對(duì)細(xì)胞 ”干細(xì)胞。2022年 5月，成功利用患者體細(xì)胞提取了干細(xì)胞。2022第一次，因?yàn)楣吩诼涯讣?xì)胞尚未成熟時(shí)就排卵，而且當(dāng)時(shí)還沒有建立起可在體外使狗的卵細(xì)胞成成熟的體外培養(yǎng)體系。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程黃禹錫首次克隆出狗斯納皮細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆狗 Snuppy（中）和提供成熟細(xì)胞的阿富汗獵犬（左）與黃色的代孕狗拉布拉多獵狗（右）細(xì)胞工程 細(xì)胞工程bona韓國成功克隆出 “斯納皮 ”的女朋友細(xì)胞工程 細(xì)胞工程中國首例體細(xì)胞克隆豬誕生細(xì)胞工程 細(xì)胞工程2022年 10月 14日，美國俄勒岡州國家靈長類動(dòng)物研究中心的科學(xué)家米塔利波夫，宣布成功得到了恒河猴的克隆胚胎，他運(yùn)用傳統(tǒng)的體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移技術(shù)，將恒河猴的皮膚細(xì)胞移植入卵細(xì)胞中，并將這個(gè)細(xì)胞培育成逐漸形成胚胎，從中提取出胚胎干細(xì)胞。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 克隆人克隆人細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆人克隆人 制備過程制備過程? 將普通的將普通的 男性細(xì)胞男性細(xì)胞 和一枚和一枚 女性卵子女性卵子 結(jié)合起來，儲(chǔ)存結(jié)合起來，儲(chǔ)存于于 女性卵子中的遺傳信息將事先被消除女性卵子中的遺傳信息將事先被消除 。通過細(xì)胞。通過細(xì)胞分裂形成的胚胎應(yīng)只帶有這名男性的全部遺傳信息分裂形成的胚胎應(yīng)只帶有這名男性的全部遺傳信息，最后將，最后將 胚胎移植到女性子宮胚胎移植到女性子宮 中，獲得男性克隆后中，獲得男性克隆后代。代。 ? 當(dāng)然，如果一對(duì)夫婦愿意的話，也可以克隆女性。當(dāng)然，如果一對(duì)夫婦愿意的話，也可以克隆女性。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆的克隆的 人類胚胎人類胚胎細(xì)胞工程 細(xì)胞工程ACT公司的研究人員將公司的研究人員將 一枚卵細(xì)胞中的一枚卵細(xì)胞中的 DNA全部剔除全部剔除，然后用一枚成年人，然后用一枚成年人 皮膚細(xì)胞中的細(xì)胞核皮膚細(xì)胞中的細(xì)胞核 替代上述替代上述DNA，由于這個(gè)卵細(xì)胞事先經(jīng)過受精，所以開始自然，由于這個(gè)卵細(xì)胞事先經(jīng)過受精，所以開始自然分裂，但它并沒有發(fā)育成一個(gè)嬰兒，而是演變成干細(xì)分裂，但它并沒有發(fā)育成一個(gè)嬰兒，而是演變成干細(xì)胞，研究人員得到胞，研究人員得到 3個(gè)早期胚胎，其中兩個(gè)發(fā)育到個(gè)早期胚胎，其中兩個(gè)發(fā)育到 4細(xì)細(xì)胞階段，另一個(gè)至少發(fā)育到胞階段，另一個(gè)至少發(fā)育到 6細(xì)胞階段。細(xì)胞階段。 由于這由于這 證明證明 人體單個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)能被誘導(dǎo)發(fā)育成人體單個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)能被誘導(dǎo)發(fā)育成為為 幼胚胎幼胚胎 ，因此這項(xiàng)研究被認(rèn)為是向著，因此這項(xiàng)研究被認(rèn)為是向著 克隆人的方向克隆人的方向邁出了關(guān)鍵一步邁出了關(guān)鍵一步 。 ?細(xì)胞工程 細(xì)胞工程
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