核移植技術(shù)與動(dòng)物克隆(2)-文庫吧資料
2025-01-27 15:14本頁面
【正文】 胞工程 細(xì)胞工程但他們強(qiáng)調(diào)：不會(huì)制造用于生育目的的胚胎，他但他們強(qiáng)調(diào)：不會(huì)制造用于生育目的的胚胎，他們的研究是為了幫助病人。 細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆的克隆的 人類胚胎人類胚胎細(xì)胞工程 細(xì)胞工程ACT公司的研究人員將公司的研究人員將 一枚卵細(xì)胞中的一枚卵細(xì)胞中的 DNA全部剔除全部剔除，然后用一枚成年人，然后用一枚成年人 皮膚細(xì)胞中的細(xì)胞核皮膚細(xì)胞中的細(xì)胞核 替代上述替代上述DNA，由于這個(gè)卵細(xì)胞事先經(jīng)過受精，所以開始自然，由于這個(gè)卵細(xì)胞事先經(jīng)過受精，所以開始自然分裂，但它并沒有發(fā)育成一個(gè)嬰兒，而是演變成干細(xì)分裂，但它并沒有發(fā)育成一個(gè)嬰兒，而是演變成干細(xì)胞，研究人員得到胞，研究人員得到 3個(gè)早期胚胎，其中兩個(gè)發(fā)育到個(gè)早期胚胎，其中兩個(gè)發(fā)育到 4細(xì)細(xì)胞階段，另一個(gè)至少發(fā)育到胞階段，另一個(gè)至少發(fā)育到 6細(xì)胞階段。 ? 當(dāng)然，如果一對(duì)夫婦愿意的話，也可以克隆女性。通過細(xì)胞分裂形成的胚胎應(yīng)只帶有這名男性的全部遺傳信息分裂形成的胚胎應(yīng)只帶有這名男性的全部遺傳信息，最后將，最后將 胚胎移植到女性子宮胚胎移植到女性子宮 中，獲得男性克隆后中，獲得男性克隆后代。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 克隆人克隆人細(xì)胞工程 細(xì)胞工程克隆人克隆人 制備過程制備過程? 將普通的將普通的 男性細(xì)胞男性細(xì)胞 和一枚和一枚 女性卵子女性卵子 結(jié)合起來，儲(chǔ)存結(jié)合起來，儲(chǔ)存于于 女性卵子中的遺傳信息將事先被消除女性卵子中的遺傳信息將事先被消除 。2022第一次，因?yàn)楣吩诼涯讣?xì)胞尚未成熟時(shí)就排卵，而且當(dāng)時(shí)還沒有建立起可在體外使狗的卵細(xì)胞成成熟的體外培養(yǎng)體系。2022年 2月，率先從人類克隆胚胎中提取出 “成對(duì)細(xì)胞 ”干細(xì)胞。1993年黃禹錫培育出韓國第一頭 “試管牛 ”1999年培育出韓國第一頭克隆奶牛。使用胎兔成纖給細(xì)胞制作獲得存活的克隆兔，在世界上尚屬首次報(bào)道。自多莉羊誕生后，世界多個(gè)小組開始克隆兔研究，但只有法國國立農(nóng)業(yè)研究院于 2022年報(bào)道 獲得來自性成熟母兔顆粒細(xì)胞的克隆兔。分子生物學(xué)鑒定顯示這是 世界上首例 存活的來自胎兔成纖給細(xì)胞的克隆兔。也具有全能性。子宮內(nèi)移植適用于桑椹胚到囊胚期階段的胚胎，另外在胚胎移植時(shí)，應(yīng)避免帶入多余的培養(yǎng)液或氣泡。6 . 胚胎移植 重構(gòu)胚的移植與胚胎移植的方法基本一樣，將重構(gòu)胚移入輸卵管或子宮，以期產(chǎn)生克隆動(dòng)物。 激活的原理是通過電刺激、鈣離子載體等方法，使卵母細(xì)胞從減數(shù)分裂 Ⅱ 期中解放出來，并轉(zhuǎn)到 “ 受精 ” 的狀態(tài)。由于微吸管破壞了卵膜和一部分細(xì)胞質(zhì)，同時(shí)移入的細(xì)胞核未與供體細(xì)胞質(zhì)膜發(fā)生緊密聯(lián)系，若直接移植，成功率很低，故需對(duì)重胚進(jìn)行融合。 操作的環(huán)境溫度在 3035℃ 左右，帶下和胞質(zhì)內(nèi)注射后需進(jìn)行激活處理。放射冠極體皮質(zhì)顆粒卵母細(xì)胞細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 根據(jù)供體核移入部位的不同可分為帶下移植和胞質(zhì)內(nèi)注射1）帶下移植：將核供體卵裂球放在操作液滴中，用一直徑 接近卵裂球大小的移植針 吸取一枚分離出的完整卵裂球，注入去核卵母細(xì)胞的卵周隙，并使供體細(xì)胞與卵質(zhì)膜接觸2）胞質(zhì)體注射：用注射針（內(nèi)徑 5～ 8181。皮質(zhì)顆粒胞吐，顆粒內(nèi)容物擴(kuò)散至細(xì)胞表面和透明帶，阻止多精受精。透明帶卵丘細(xì)胞（ 2）獲能精子在接觸放射冠后發(fā)生頂體反應(yīng)，釋放水解酶溶解放射冠細(xì)胞間質(zhì)。這種方法可以在同一時(shí)間大量去核，同時(shí)還避免了人為操作的不穩(wěn)定性和重復(fù)性，這一方法應(yīng)用將會(huì)使哺乳動(dòng)物克隆技術(shù)大為簡化。3）化學(xué)誘導(dǎo)去核 用 脫羧秋水仙堿處理 激活的小鼠減數(shù)分裂 Ⅱ 期卵母細(xì)胞，使其排放第二極體。2)功能性去核法 這是一種非機(jī)械去核方法，通過用 紫外線或激光照射 使染色體失活而達(dá)到去核的目的。 核受體細(xì)胞的去核可用化學(xué)處理和紫外光滅活染色體的辦法，但以顯微手術(shù)法簡便有效。因?yàn)楹艘浦餐ǔＪ怯?電融合 的方法完成供體細(xì)胞與受體細(xì)胞的融合，所以在去核的同時(shí)要去掉第一極體，以免將其融合到卵母細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 作為胚胎細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞主要有 3類，即去核的成熟卵母細(xì)胞、受精卵及 2細(xì)胞胚胎。取建系的細(xì)胞在含 低濃度血清 的培養(yǎng)液中培養(yǎng) 15天。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 對(duì)于 體細(xì)胞 ，需建立 穩(wěn)定的細(xì)胞系 ，并處理誘離生長周期，進(jìn)入 G0期 。作用時(shí)間短，透明帶不能充分消化，卵裂球不易獲得，作用時(shí)間長，則影響到卵質(zhì)膜，容易破裂，在操作時(shí)容易失敗。其中，以胚胎細(xì)胞克隆的應(yīng)用最為普遍，體細(xì)胞克隆的意義最大。其次，供體細(xì)胞核必須能在受體細(xì)胞的作用下，產(chǎn)生細(xì)胞分化過程的逆轉(zhuǎn)。細(xì)胞核移植的技術(shù)路線 在核移植操作中，細(xì)胞核供體首先必須是 完整的二倍體 。1999年，陳大元等對(duì)異種動(dòng)物體細(xì)胞克隆應(yīng)用在大熊貓，但由于難于找到合適的胚胎移植的受體，所以未能獲得突破性的進(jìn)展。細(xì)胞工程 細(xì)胞工程二是解快了用體細(xì)胞做核供體與轉(zhuǎn)基因的問題。4）將新的卵母細(xì)胞植入羊的結(jié)扎的輸卵管內(nèi)， 6天后發(fā)育成桑椹期胚胎或囊胚（ 816個(gè)細(xì)胞），再移入假孕母羊子宮內(nèi)。2833h取其 未受精卵 快速去核，放入 10％ FCS（小牛血清）、1％ FCS和 ％ FCS連續(xù) 5天， 饑餓使其進(jìn)入 G0期作為受體細(xì)胞。 具體克隆過程如下：1）取處于后三分之一 妊娠期 的 6歲母綿羊（芬蘭多塞特白品種綿羊）的乳腺細(xì)胞作核供體細(xì)胞， 用 ”饑餓法 ”使其進(jìn)入休眠狀態(tài)而使全部基因具有活性。將動(dòng)物體細(xì)胞經(jīng)過抑制培養(yǎng)，使其處于 休眠狀態(tài) ，利用細(xì)胞核移植技術(shù)將其導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞，克隆出胚胎，經(jīng)移植至受體妊娠產(chǎn)仔，克隆出成體動(dòng)物。 1996年，英國報(bào)道選
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