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細胞工程第6章:細胞拆合與克隆技術(編輯修改稿)

2025-02-17 13:59 本頁面
 

【文章內容簡介】 組配,還能培育出新物種。 二、發(fā)展歷程 三、核移植技術 ● 供體和受體的準備 魚類: 供體 —— 囊胚細胞或成體細胞, 受體 —— 成熟的卵細胞 發(fā)育 (人工催產、水中激活) 時間 兩棲類: 配合 供體 —— 囊胚細胞或成體細胞, 好 受體 —— 成熟卵細胞(人工針刺) 鳥類、爬行類:未知 哺乳類: 供體 —— 早期胚胎細胞、胚胎干細胞、體細 胞;后用體細胞,如乳腺細胞、粘 膜上皮細胞;合子核到 64細胞期, %鏈霉蛋白酶預處理 ,溶去胚胎 膠膜及透明帶 ,分離單個卵裂球; 受體 —— 去核卵母細胞、受精卵、 2細胞胚 胎(第一極體成熟時期去核); ● 去卵膜和卵核 —— 用玻璃微針(尖為 24um) 魚卵 —— 借助第二極體標志,去核; 兩棲卵 —— 紫外線去核; 哺乳卵 —— 借助第一極體; ● 供體細胞制備: 胚胎或組織機械切割 置細胞分離液 (含胰蛋白酶)處理幾分鐘 單細胞短期培養(yǎng) ● 移植 選擇合適微吸管(比細胞核大,比供體細胞小 ),不能多帶細胞質,須 3040min內完成操作過 程,溫度 1618186。C; ● 顯微操縱術:原子力顯微鏡、顯微操縱儀; 顯微操作儀 核移植操作過程 6. 2. 3 克隆動物一般制備技術 一、胚胎細胞核移植法 ● 世界: 1984年,英,綿羊 。 1995年,日本; 1997年,澳大利亞,孿生牛 。 1998年,食用牛 目前,小鼠、兔、山羊、綿羊、豬、羊、猴 ● 中國: 1990年,中國發(fā)育所,兔;西北農大,山羊 。 1991年,臺灣,豬 。 1992年,江蘇農科院,兔 。 1995年,中國發(fā)育所與揚州大學,山羊 。 1995年,華南師院與廣西師大,克隆雜色牛 。
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