病毒(沈萍主編)微生物(編輯修改稿)
2025-02-14 02:19 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 斑點(diǎn)試驗(yàn)法 液體稀釋管法 試樣（ 未知效價(jià)的噬菌體液） 培養(yǎng)液和宿主細(xì)胞 計(jì)數(shù)管中完整宿主細(xì)胞數(shù) （定時(shí)取樣對(duì)活細(xì)胞計(jì)數(shù)） 噬菌體數(shù) =原細(xì)胞數(shù) — 活細(xì)胞數(shù) 雙層平板法 瓊脂平板 菌液 +噬菌體試樣 +瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng) 10天 計(jì)數(shù)噬菌斑 噬菌斑數(shù) =試樣中噬菌體數(shù) 噬菌斑 (plaque) 下層培養(yǎng)基 雙層培養(yǎng)基 敏感菌 +上層培養(yǎng)基 噬菌體稀釋液 培養(yǎng) 噬菌斑 敏感菌菌苔 為何要使用雙層平板？ 快速玻片法 試樣 +宿主細(xì)胞 +瓊脂培養(yǎng)基 低倍鏡下計(jì)數(shù)噬菌斑 充分混勻 短期培養(yǎng) 布在滅菌玻片上 空斑和病斑 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑 ,稱為病斑 .因?yàn)槭苣[瘤病毒感染 . 枯斑 噬菌體增殖規(guī)律的描述方法 離 心 術(shù) 抗病毒血清 培養(yǎng) 定時(shí)取樣測(cè)噬菌斑數(shù) 以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以噬菌斑數(shù)為 縱坐標(biāo)，繪出的曲線為一步生長(zhǎng)曲線。 一步生長(zhǎng)曲線可分為三個(gè)時(shí)期： ① 潛伏期 是指菌體的核酸侵入宿主細(xì)胞后至第 一個(gè)噬菌體粒子裝配前的一段時(shí)間。 ② 裂解期 是指溶液中噬菌體粒子急劇增多的一 段時(shí)間。 ③ 穩(wěn)定期 溶液中噬菌體總數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。 一步生長(zhǎng)曲線 定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長(zhǎng)曲線 溶 源性 溫和噬菌體或稱溶源性噬菌體（ lysogenic phage）： 感染宿主細(xì)胞后不能完成復(fù)制循環(huán)，噬菌體基因組長(zhǎng)期存在于宿主細(xì)胞內(nèi)，沒(méi)有成熟噬菌體產(chǎn)生。 這一現(xiàn)象稱做 溶源性（ lysogeny） 現(xiàn)象 附著或融合在溶源性細(xì)菌染色體上的溫和噬菌體的核酸 稱為 原噬菌體 或 前噬菌體 。 前噬菌體 含有溫和噬菌體的 DNA 而又找不到形態(tài)上可見的噬菌體 粒子的宿主細(xì)菌叫 溶源性細(xì)菌 。 溶源性細(xì)菌的基本特性： ①自發(fā)裂解 ②誘發(fā)裂解 ③免疫性 ④復(fù)愈性 ⑤溶源轉(zhuǎn)變 溶源菌 細(xì)菌的溶源性具有 遺傳性 溶源菌對(duì)同源噬菌體具有 免疫性 溶源性細(xì)菌在培養(yǎng)中 不易被查覺(jué) 非溶源細(xì)胞 自發(fā)裂解和誘導(dǎo)裂解 ：有少數(shù)噬菌體可自發(fā)或 誘發(fā)裂解宿主細(xì)胞變成烈性噬菌體 溶源性細(xì)胞可獲得一些 新的生理特性 復(fù)愈 :溶源菌 失去前噬菌體 白喉?xiàng)U菌 白喉毒素 β－ 噬菌體 宿主發(fā)病 植物病毒沒(méi)有專門的吸附結(jié)構(gòu)，通過(guò)昆蟲口器、摩擦傷口和人為傷口進(jìn)入寄主細(xì)胞。植物病毒在入住宿主細(xì)胞后脫去蛋白質(zhì)外殼。 TMV的衣殼粒以雙層盤的形式組裝成衣殼，PH的改變、 RNA的嵌入對(duì)衣殼的裝配起關(guān)鍵作用。 （二）植物病毒 黃豆黃萎病毒 花葉、黃化或紅化等癥狀 植株發(fā)生矮化，叢枝或畸形等 形成枯斑或壞死等癥狀 植物感染病毒后的主要癥狀 植物 黃 萎 病 借昆蟲刺吸式口器進(jìn)入 “侵入”方式 通過(guò)傷口進(jìn)入 再通過(guò)胞間連絲或輸導(dǎo)組織迅速向 其它部位擴(kuò)散引起普遍感染。 嫁接 不釋放 煙草花葉病毒 植物病毒侵入宿主細(xì)胞后才能發(fā)生脫殼 植物病毒病的控制 轉(zhuǎn)基因植物抗病毒番茄 選用天抗性品種 改變作制度 使用剎蟲劑消滅昆蟲介體 化藥 轉(zhuǎn)基因抗病毒植物的開發(fā) （三）人類和脊椎動(dòng)物病毒 脊椎動(dòng)物病毒包括 DNA和 RNA病毒， 動(dòng)物病毒的釋放方式多種多樣，主要有以下幾種形式： ，如腺病毒通過(guò)細(xì)胞裂解或局部破裂而釋放。 DNA病毒，如皰疹病毒，以細(xì)胞質(zhì)中通道釋放到細(xì)胞外。 RNA病毒，如副流感病毒用出芽方式通過(guò)寄主細(xì)胞膜， 釋放到細(xì)胞外并獲得細(xì)胞源性的包膜和產(chǎn)生刺突。 腺病毒的復(fù)制可代表 DNA病毒的復(fù)制 脊髓灰質(zhì)炎病毒的復(fù)制可代表 RNA病毒的復(fù)制 ：腺病毒吸附在宿主細(xì)
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