生物化學蛋白質之三(編輯修改稿)
2025-02-14 02:01 本頁面
【文章內容簡介】 － － － － 帶負電荷的蛋白質 不穩(wěn)定的蛋白質顆粒 酸 堿 酸 堿 脫水作用 脫水作用 脫水作用 酸 堿 + + + + + + + 帶正電荷的蛋白質 溶液中蛋白質的聚沉 蛋白質沉淀方法： 1. 鹽析： 條件 :高濃度的強電解質鹽 (如硫酸胺、氯化鈉、硫酸鈉等 )鹽析 。 低濃度的鹽溶液 鹽溶 。 機理： 破壞水化膜，中和表面的凈電荷。 注意 :鹽析法 不會 使 蛋白質產生變性 。 ： 條件 :有機溶劑如乙醇、丙酮等。 機理： 破壞蛋白質的水化膜。 注意 :低溫 條件下進行，否則 溶解熱 會使蛋白質變性。 條件： pH 稍大于 pI為宜 。 機理： 重金屬鹽加入之后，與帶負電的羧基結合。 注意 :蛋白質變性， 長期從事重金屬作業(yè)的人應多吃高蛋白食品， 以防止重金屬離子被機體吸收后造成對機體的損害。 條件： pH稍小于 pI。生物堿試劑一般為弱酸性物質，如單寧酸、苦味酸、三氯乙酸等。 機理： 在酸性條件下，蛋白質帶正電，可以與生物堿試劑的酸根離子結合而產生沉淀。 “ 柿石癥 ” 的產生 就是由于空腹吃了大量的柿子，柿子中含有大量的單寧酸，使腸胃中的蛋白質凝固變性而成為不能被消化的 “ 柿石 ” 。 ： 條件： pH=pI 機理： 破壞蛋白質表面凈電荷。 三 、 蛋白質的變性、沉淀和凝固 * 蛋白質的變性 (denaturation) 在某些物理和化學因素作用下，蛋白質分子的特定空間構象被破壞，從而導致其理化性質改變和生物活性的喪失。 ? 造成變性的因素： 1）物理因素：高溫、高壓、射線等 。 2）化學因素：強酸、強堿、重金屬鹽等 。 ? 變性的本質： —— 破壞非共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白質的一級結構。 ? 蛋白質變性后的性質改變： 溶解度降低、粘度增加、結晶能力消失、生物活性喪失及易受蛋白酶水解。 ? 應用舉例 ?臨床醫(yī)學上，變性因素常被應用來消毒及滅菌。 ?防止蛋白質變性也是有效保存蛋白質制劑（如疫苗等）的必要條件。 若蛋白質變性程度較輕 ， 去除變性因素后 ，蛋白質仍可恢復或部分恢復其原有的構象和功能 ，稱為 復性 。 復性 (renaturation) 天然狀態(tài)，有催化活性 尿素、 β 巰基乙醇 去除尿素、 β 巰基乙醇 非折疊狀態(tài)，無活性 * 蛋白質變性易沉淀 在一定條件下 ， 蛋白疏水側鏈暴露在外 ， 肽鏈會相互纏繞繼而聚集 ， 因而從溶液中析出 。 變
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