【文章內容簡介】 多少 ？ 米氏常數(shù)的測定 基本原則 ： 將米氏方程變化成相當于y=ax+b的直線方程 ， 再用作圖法求出 Km。 例： 雙倒數(shù)作圖法 （ LineweaverBurk法 ） 米氏方程的雙倒數(shù)形式： 1 Km 1 1 — = —— . — + —— v Vmax [S] Vmax 酶動力學的雙倒數(shù)圖線 pH對酶反應速度的影響 ?過酸過鹼 導致酶蛋白變性 ?影響底物分子解離狀態(tài) ?影響酶分子解離狀態(tài) ?影響酶的活性中心構象 pH 最適 pH v 溫度與酶反應速度的關系 ? 在達到最適溫度以前，反應速度隨溫度升高而加快 ? 酶是蛋白質，其變性速度亦隨溫度上升而加快 ? 酶的最適溫度不是一個固定不變的常數(shù) v 溫度 激活劑 對酶作用的影響 類別 金屬離子： K+、 Na+、 Mg2+、 Cu2+、 Mn2+、 Zn2+、 Se3+ 、 Co2+、 Fe2+ 陰離子： Cl、 Br 有機分子 還原劑：抗壞血酸 、 半胱氨酸 、 谷胱甘肽 金屬螯合劑： EDTA 凡是能提高酶活性的物質，稱為酶的激活劑（ activator） 抑制劑對酶作用的影響 凡是使酶的必需基因或酶的活性部位中的基團的化學性質改變而降低酶活力甚至使酶完全喪失活性的物質 ， 叫酶的抑制劑 （ inhibitor） 。 類型 ： 可逆抑制劑 不可逆抑制劑 應用 ： 研制殺蟲劑 、 藥物 研究酶的作用機理 ， 確定代謝途徑 抑制劑類型和特點 競爭性抑制劑 可逆 抑制劑 非競爭性抑制劑 反競爭性抑制劑 非專一性不可逆抑制劑 不可逆抑制劑 專一性不可逆抑制劑 + I EI ES P+ E E+S 競爭性抑制作用 實例：磺胺藥物的藥用機理 H2N SO2NH2 對氨基苯磺酰胺 H2N COOH 對氨基苯甲酸 對氨基苯甲酸 谷氨酸 蝶呤 葉酸 非競爭性抑制作用 + I EI+S ESI ES P+ E E+S + I 實例：重金屬離子（ Cu2+、 Hg2+、 Ag+、 Pb2+） 金屬絡合劑（ EDTA、 F、 CN、 N3） 反競爭性抑制作用 ESI ES P+ E E+S + I 競爭性抑制作用 非競爭性抑制作用 競爭性非競爭性抑制作用機理示意圖 底物與酶專一性結合 競爭性抑制曲線 非競爭性抑制曲線 反競爭性抑制曲線 有無抑制劑存在時酶促反應的動力學方程 非專一性不可逆抑制劑 抑制劑作用于酶分子中的一類或幾類基團 ， 這些基團中包含了必需基團 ， 因而引起酶失活 。 類型 ： 專一性不可逆抑制劑 這類抑制劑選擇性很強，它只能專一性地與酶活性中心的某些基團不可逆結合，引起酶的活性喪失。 實例： 有機磷殺蟲劑 SerOH SerO P OR OR O P OR OR O X 第五節(jié) 重要的酶類及酶活性的調節(jié)控制 一、 多酶體系 (multienzyme system) 二 、 別構酶 (allosteric enzyme) 三 、 共價調節(jié)酶 (covalent regulatory enzyme) 四 、 酶原 (enzymogen或 proenzyme)的激活 五 、 同工酶 (isoenzyme) 六 、 抗體酶 (abzyme) 一、多酶體系和多酶復合體 細胞中的許多酶常常是在一個連續(xù)的反應鏈中起作用，即前一個反應的產物是后一個反應的底物，在完整細胞內的某一代謝過程中，由幾個酶形成的反應體系，稱為多酶體系（ multienzyme system）。 如果 體系中幾種酶彼此有機地組合在一起。精巧地鑲嵌成一定的結構，即形成 多酶復合體 。這種結構即能提高反應途徑的效率，又能增強調控的準確性。 分散多酶體系與中 間物示意圖 多酶復合體示意圖 二、酶的別構（變構）效應和別構酶 ?概念 ： 酶分子的非催化部位與某些化合物可逆地非共價結合后導致酶分子發(fā)生構象改變 ， 進而改變酶的活性狀態(tài) ， 稱為酶的 別構調節(jié) (allosteric regulation)， 具有這種調節(jié)作用的酶稱別構酶 (allosteric enzyme)。 別構酶促反應底物濃度和反應速度的關系不符合米氏方程 ， 呈 S型曲線 。 凡能使酶分子發(fā)生別構作用的物質稱為效應物 (effector)， 通常為小分子代謝物或輔因子 。 如因別構導致酶活性增加的物質稱為正效應物 (positive effector)或別構激活劑 ， 反之稱負效應物 (negative effector)或別構抑制劑 。 別構調節(jié)普遍存在于生物界 ， 許多代謝途徑的關鍵酶利用別構調節(jié)來控制代謝途徑之間的平衡 ， 研究別構調控有重要的生物學意義 。 ?實例 ： 天冬氨酸轉氨甲酰酶 （ anspartate transcarbamoylase， ATCase） ?別構酶活性調節(jié)機理 ： 序變模型 和 齊變模型 酶的別構（變構）效應示意圖 效應劑 別構中心 活性中心 別構酶的反饋調控機理 A （ 產物或中間產物） E D C B 關鍵酶 — a非調節(jié)酶 b正協(xié)同別構酶 的 S形曲線 別構酶與米氏酶的動力學曲線比較 1非調節(jié)酶 2正協(xié)同別構酶 3負協(xié)同別構酶 正、負協(xié)同別構酶與非