布病實驗室技術(shù)培訓安(編輯修改稿)
2025-02-13 15:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 分離培養(yǎng) ? 純分離傳代 ? 玻片凝集初步鑒定，陽性血清、因子血清凝集 ? H2S產(chǎn)生試驗， CO2培養(yǎng)依賴試驗 ? 噬菌體裂解試驗 ? 染料抑菌試驗 ? PCR檢測 ? 其他方法檢測 生化測定 脂肪酸分析 PFGE等 布氏菌噬菌體 ? 我國 1981年起從國外引進布氏菌分型噬菌體，對鑒定布氏菌有良好使用價值，可以將布氏菌鑒定到種 ? 目前使用的噬菌體有 Tb Fi BK 2 Wb R R/O R/C 噬菌體 布魯氏菌種 T b W b F i B K 2 R R / O R / C 牛種 + + + + — 177。 — 羊種 — — — + — — — 豬種 — + 177。 + — 177。 — 犬種 — — — — — — + 沙林樹種 177。 + + + — — — 綿羊附睪種 — — — — — + + 噬菌體對布氏菌的裂解 羊種布氏菌噬菌體裂解 分離培養(yǎng)基 ? 商用培養(yǎng)基 布氏瓊脂 布氏肉湯 ? 制備培養(yǎng)基 肝浸液瓊脂 血瓊脂培養(yǎng)基 胰蛋白眎瓊脂培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 ? 選擇性培養(yǎng)基添加劑（多種抗生素） 商品添加劑 多粘菌素 B 桿菌肽 放線菌酮 制霉菌素 ? 注意： PH ，瓊脂適量，適當容器 布氏菌培養(yǎng)鑒定 ? 新方法的應(yīng)用 ? 細菌生化 鑒定系統(tǒng) ? PCR鑒定 OMP31 AMOSPCR 雙向血培養(yǎng)瓶 血清學檢驗 ? 血清學診斷的意義 ? 針對布病進行的檢驗 ? 血清樣本的采集和保存 血清學診斷的意義 ? 人的布病診斷方法：綜合性診斷 （ 1）流行病學接觸史：密切接觸家畜、野生動物（觀賞動物）、畜產(chǎn)品、布氏菌培養(yǎng)物等或生活在疫區(qū)內(nèi)的居民 ? （ 2）臨床癥狀和體征 ? （ 3）實驗室檢查：病原菌分離、試管凝集試驗、補體結(jié)合試驗、抗人球蛋白試驗 ? 具備（ 1）、（ 2）和（ 3）項中的任何一項檢查陽性即可確定為布病病人 針對布病進行的檢驗 實驗室檢查陽性判定標準 （ 1）病原菌分離：檢出布魯氏菌 （ 2）試管凝集試驗： 1： 100（ ++）及以上 （ 3）補體結(jié)合試驗： 1： 10（ ++）及以上 （ 4）抗人球蛋白試驗： 1： 400（ ++）及以上 （ 5）虎紅、平板凝集試驗：出現(xiàn)可見凝集 （ 6）皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)：皮試后 2 48小時分別各觀察一次 ,皮膚紅腫范圍有一次在 上（或４ .０平方厘米及以上） ? 虎紅、平板凝集試驗和皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)供初篩試驗用 ? 對已確診的慢性病人和接種過菌苗的人，應(yīng)以臨床癥狀為主要依據(jù)，血清學試驗效價高低，皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)強弱供參考 布氏菌的血清學診斷方法 ? 試管凝集試驗 (SAT) ? 虎紅玻片凝集試驗 (RBPT) ? 含巰基化物處理血清后的凝集試驗（ 2ME 試驗） ? 抗球蛋白試驗 (Coomb`s試驗 ) ? 補體結(jié)合試驗 (CFT) ? 乳環(huán)凝集試驗 (MRT) ? 酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA) ? 金標法 ? 熒光偏振方法 （ FPA） 、虎紅玻片凝集實驗 原理：利用酸性帶色的抗原與被檢血清作用時能抑制血清中的 IgM類抗體的凝集活性，主要檢查血清中的 IgG類抗體。 評價：簡便快速、容易操作，適用
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