細(xì)胞系與細(xì)胞克隆ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-13 09:34 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 基質(zhì)或培養(yǎng)物） 稀釋鋪板法、飼養(yǎng)層克隆法、膠原膜板或血纖維蛋白膜層板克隆法、瓊脂克隆法等。 ：最常用 消化 — 低密度細(xì)胞懸液制備 — 接種 — 標(biāo)記與培養(yǎng) — 分離擴(kuò)大培養(yǎng) — 觀察 — 移植瓶或皿內(nèi)培養(yǎng) 注意事項(xiàng)： 1）確保一個(gè)細(xì)胞，注意培養(yǎng)孔的周邊 2）輪廓清晰完整，體積適宜的健康細(xì)胞 3）不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞（ feeder cell）：也稱(chēng)滋養(yǎng)細(xì)胞，是一層經(jīng)過(guò)射線或絲裂霉素 C處理過(guò)的供其它細(xì)胞附著的細(xì)胞層，如成纖維細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 ? 注意： 3周內(nèi)飼養(yǎng)細(xì)胞即死亡，要及時(shí)應(yīng)用。 飼養(yǎng)層克隆圖解 膠原膜板或血纖維蛋白膜板克隆法： 1）膠原膜板或血纖維蛋白膜板的制備 2）消化、稀釋、接種和培養(yǎng)待克隆細(xì)胞 血纖維蛋白膜板制備 A液： g凝血酶 ,100ml培養(yǎng)液 B液 :250mg 牛血纖維蛋白原、 800mg NaCl、
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