感染性疾病病原的診斷策略(講座)(編輯修改稿)
2025-02-11 04:14 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 于培養(yǎng)依賴性一些難培養(yǎng)或者體外無法培養(yǎng)的細(xì)菌就很難達(dá)到數(shù)量上擴(kuò)增的要求，也很難檢測這就造成假音性結(jié)果，這對于病情是一種低估或誤診。二、基于免疫學(xué)特征（一）ELISA的原理有些病原體如異樣性病都離開人體很難通過培養(yǎng)性依賴檢測但是我們知道很多病原體在人體的感染程度會遺留下某些證據(jù)，比如病原體的一些抗原，或是這些抗原激發(fā)人體產(chǎn)生的抗體 這些抗原和抗體就通過免疫學(xué)的方法檢測出來，簡言之免疫學(xué)手段就是通過人工方法以知的抗原抗體利用免疫學(xué)結(jié)合的原理檢測病原體位置的抗原和抗體。并將這種結(jié)合可視化來達(dá)到鑒定的目的，免疫學(xué)鑒定的方法和反應(yīng)介質(zhì)分類分為物象測定和液相測定，在病原體的診斷中主要依賴于固相免疫測定，其中以酶來鎂為代表性，也就是我們說的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)是雇傭名才定方法，雖然針對其也有不同的策略，但是大致的原理是一致的。在設(shè)計(jì)過程中，有一種非常重要的酶標(biāo)抗體，這種抗體在不影響其抗議性結(jié)合的情況下與某種酶工賈結(jié)合，而酶本身的活性不受抗體的影響，這種酶可以喝特異性的地物反應(yīng)并顯色，在實(shí)驗(yàn)中先將已知的抗原和抗體包在載體表面，然后再臨床標(biāo)本在與其反應(yīng)，反應(yīng)后洗未反應(yīng)的物質(zhì)，待顯標(biāo)準(zhǔn)中可結(jié)合物越多，則殘留在表面可抗原抗體殘留物越多，在加入酶抗體與之結(jié)合洗脫后如果結(jié)合越多則酶含量越高，最后加入特異的地物顯色，顏色的深淺與酶多少相關(guān)，將顏色深淺量化之后得出樣品中含有多少抗原或抗體物質(zhì)結(jié)果，這就是實(shí)驗(yàn)。通過上圖可以看到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由下向上講解，最下方是一條橫線代表固相載體，上面的是小三角是足量的包被的已知抗原，與之結(jié)合的是病人的血型在抗體的上方時能識別人免疫球蛋白的抗體。酶工價(jià)結(jié)合成酶標(biāo)抗體，在反應(yīng)中我們可以看到病人的血清是擔(dān)任重要的角色，而與包被抗原之間是不能形成免疫復(fù)合物，只有當(dāng)血清中含有真正抗原的酶標(biāo)抗體才能避免被洗脫，然后保留下來。因此，顯示可以看到形成圖中所示的復(fù)合物才最終顯色，如果病人血清中沒有包被的抗體 那么反應(yīng)物沒有顯色形成陰性結(jié)果。（二）ELISA的主要策略當(dāng)然實(shí)驗(yàn)也有不同的策略和類別。針對不同檢測對象根據(jù)２抗的不同和檢測對象的不同，可以分為直接法間接法和夾心法；直接法是固相載體表面包被已知抗原然后和未知抗體與之結(jié)合。酶標(biāo)抗體和未知抗體是同一個抗體 沒有２抗出現(xiàn)。所以每次實(shí)驗(yàn)都必須進(jìn)行過程，這就無形中增加時間成本，且待測樣本中待測的量通常是未知的因此不宜大規(guī)模的生產(chǎn)，這就直接導(dǎo)入了直接法在臨床檢驗(yàn)中不常用的結(jié)果，間接法運(yùn)用的是酶標(biāo)和鎂表２抗其原理是我們先前講到的圖示。由于其包被在固體個表面，與之抗原檢測病人標(biāo)準(zhǔn)中的位置抗體，而且比較單一。；可以預(yù)先標(biāo)記大規(guī)模生產(chǎn)以此檢驗(yàn)中間接法廣泛運(yùn)用。這種方法的酶標(biāo)抗體是針對某種抗原的已知抗體 包被在固體表面的也是某種抗原的抗體，在反應(yīng)中標(biāo)準(zhǔn)中兩個抗體家在其中。因此叫夾心法；用于檢測病人血清中或ｉ其他標(biāo)本中的抗體在我們臨床使用中根據(jù)不同選擇適宜的方法。（三）ELISA間接法的實(shí)驗(yàn)過程上圖展示的是實(shí)驗(yàn)過程，他檢測的是病人體內(nèi)的未知抗體。首先我們將已知抗原同過化學(xué)方法在固相載體表面。然后加入不同病人血清；讓我們將左右兩張圖含有大量的兩個多重抗體，在左邊的病人血清中還有包被的對應(yīng)的抗體經(jīng)過洗脫的過
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