感染性疾病病原的診斷策略(講座)(編輯修改稿)
2025-02-11 04:14 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 于培養(yǎng)依賴性一些難培養(yǎng)或者體外無法培養(yǎng)的細(xì)菌就很難達(dá)到數(shù)量上擴(kuò)增的要求，也很難檢測(cè)這就造成假音性結(jié)果，這對(duì)于病情是一種低估或誤診。二、基于免疫學(xué)特征（一）ELISA的原理有些病原體如異樣性病都離開人體很難通過培養(yǎng)性依賴檢測(cè)但是我們知道很多病原體在人體的感染程度會(huì)遺留下某些證據(jù)，比如病原體的一些抗原，或是這些抗原激發(fā)人體產(chǎn)生的抗體 這些抗原和抗體就通過免疫學(xué)的方法檢測(cè)出來，簡言之免疫學(xué)手段就是通過人工方法以知的抗原抗體利用免疫學(xué)結(jié)合的原理檢測(cè)病原體位置的抗原和抗體。并將這種結(jié)合可視化來達(dá)到鑒定的目的，免疫學(xué)鑒定的方法和反應(yīng)介質(zhì)分類分為物象測(cè)定和液相測(cè)定，在病原體的診斷中主要依賴于固相免疫測(cè)定，其中以酶來鎂為代表性，也就是我們說的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)是雇傭名才定方法，雖然針對(duì)其也有不同的策略，但是大致的原理是一致的。在設(shè)計(jì)過程中，有一種非常重要的酶標(biāo)抗體，這種抗體在不影響其抗議性結(jié)合的情況下與某種酶工賈結(jié)合，而酶本身的活性不受抗體的影響，這種酶可以喝特異性的地物反應(yīng)并顯色，在實(shí)驗(yàn)中先將已知的抗原和抗體包在載體表面，然后再臨床標(biāo)本在與其反應(yīng)，反應(yīng)后洗未反應(yīng)的物質(zhì)，待顯標(biāo)準(zhǔn)中可結(jié)合物越多，則殘留在表面可抗原抗體殘留物越多，在加入酶抗體與之結(jié)合洗脫后如果結(jié)合越多則酶含量越高，最后加入特異的地物顯色，顏色的深淺與酶多少相關(guān)，將顏色深淺量化之后得出樣品中含有多少抗原或抗體物質(zhì)結(jié)果，這就是實(shí)驗(yàn)。通過上圖可以看到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由下向上講解，最下方是一條橫線代表固相載體，上面的是小三角是足量的包被的已知抗原，與之結(jié)合的是病人的血型在抗體的上方時(shí)能識(shí)別人免疫球蛋白的抗體。酶工價(jià)結(jié)合成酶標(biāo)抗體，在反應(yīng)中我們可以看到病人的血清是擔(dān)任重要的角色，而與包被抗原之間是不能形成免疫復(fù)合物，只有當(dāng)血清中含有真正抗原的酶標(biāo)抗體才能避免被洗脫，然后保留下來。因此，顯示可以看到形成圖中所示的復(fù)合物才最終顯色，如果病人血清中沒有包被的抗體 那么反應(yīng)物沒有顯色形成陰性結(jié)果。（二）ELISA的主要策略當(dāng)然實(shí)驗(yàn)也有不同的策略和類別。針對(duì)不同檢測(cè)對(duì)象根據(jù)２抗的不同和檢測(cè)對(duì)象的不同，可以分為直接法間接法和夾心法；直接法是固相載體表面包被已知抗原然后和未知抗體與之結(jié)合。酶標(biāo)抗體和未知抗體是同一個(gè)抗體 沒有２抗出現(xiàn)。所以每次實(shí)驗(yàn)都必須進(jìn)行過程，這就無形中增加時(shí)間成本，且待測(cè)樣本中待測(cè)的量通常是未知的因此不宜大規(guī)模的生產(chǎn)，這就直接導(dǎo)入了直接法在臨床檢驗(yàn)中不常用的結(jié)果，間接法運(yùn)用的是酶標(biāo)和鎂表２抗其原理是我們先前講到的圖示。由于其包被在固體個(gè)表面，與之抗原檢測(cè)病人標(biāo)準(zhǔn)中的位置抗體，而且比較單一。；可以預(yù)先標(biāo)記大規(guī)模生產(chǎn)以此檢驗(yàn)中間接法廣泛運(yùn)用。這種方法的酶標(biāo)抗體是針對(duì)某種抗原的已知抗體 包被在固體表面的也是某種抗原的抗體，在反應(yīng)中標(biāo)準(zhǔn)中兩個(gè)抗體家在其中。因此叫夾心法；用于檢測(cè)病人血清中或ｉ其他標(biāo)本中的抗體在我們臨床使用中根據(jù)不同選擇適宜的方法。（三）ELISA間接法的實(shí)驗(yàn)過程上圖展示的是實(shí)驗(yàn)過程，他檢測(cè)的是病人體內(nèi)的未知抗體。首先我們將已知抗原同過化學(xué)方法在固相載體表面。然后加入不同病人血清；讓我們將左右兩張圖含有大量的兩個(gè)多重抗體，在左邊的病人血清中還有包被的對(duì)應(yīng)的抗體經(jīng)過洗脫的過
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