單核增生李斯特氏菌檢測概述(編輯修改稿)
2024-11-22 18:46 本頁面
【文章內容簡介】 /L UVM ? UVM只有選擇性沒有區(qū)別性 ? 加入 萘啶酮酸 和 鹽酸吖啶黃 ，作為選擇性因子。雖然其中含有七葉靈，但是沒有添加檸檬酸鐵銨，不能發(fā)生黑色的顏色反應。 LEB和 BLEB ? 只有選擇性沒有區(qū)別性 ? LEB是在 TSBYE的基礎上加入 鹽酸吖啶黃 、萘啶酮酸 和 放線菌酮 等選擇性因子；加入的 丙酮酸鈉 ，有助于受損細胞的恢復；不含七葉靈和檸檬酸鐵銨，無顏色反應 ? BLEB是在 LEB基礎上加入緩沖體系：磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉 檢測程序 分離 ? 分離培養(yǎng)基有： OXA、 PALCOM、 LPM、 MOX等，但首選仍然是 OXA。分離原理主要是基于李斯特氏菌具有 β－ D－葡萄糖苷酶 的活性，能水解培養(yǎng)基中的七葉靈，產生七葉苷，與鐵離子產生顏色反應而，使菌落為棕褐色，并帶有褐色暈圈，而致病性和非致病性李斯特氏菌病都能發(fā)生這種反應 ?還有一些選擇性顯色培養(yǎng)基，如 BCM、 ALOA、CHROMagar listeria、 Rapid’L. mono等，其原理主要是檢測由毒力基因編碼的 溶血素 ，而此種溶血素只存在于單核增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌中，因而可以很好的將此兩種菌同李斯特屬的其他種分開。 OXA平板 單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 48h， 35℃ 培養(yǎng) OXA平板 無害李斯特氏菌ATCC 33090 48h， 35℃ 培養(yǎng) 檢測程序 鑒定 ? 藍色菌落檢驗（ Henry illumination） ? 典型運動：相差顯微鏡，輕微旋轉或翻跟頭 動力試驗： 7天，傘形生長 ? 過氧化氫酶 試驗：陽性 ? 革蘭氏染色 ：陽性短桿菌 ? 溶血試驗 ：穿刺接種血平板 ? 硝酸鹽還原試驗： 5天，陰性 ? 糖發(fā)酵試驗 ：葡萄糖、麥芽糖和七葉靈，李斯特菌屬反應均為陽性，除格氏李斯特甘露醇陰性，李斯特其他種甘露醇陰性， 木糖 和 鼠李糖 最有檢測意義 動力試驗 血平板 單核增生李斯特氏菌 ATCC 19117 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 無害李斯特氏菌 ATCC 33090 36h， 35℃ 培養(yǎng) 血平板 伊氏李斯特氏菌 ATCC 19119 24h， 35℃ 培養(yǎng) 單核增生李斯特氏菌檢測流程 25g樣品 +225ml BLEB基礎（加入丙酮酸鈉） 加入萘啶酮酸、鹽酸吖錠黃、放線菌酮 30℃ 4hr 劃線接種 OXA平板 30℃ 24hr和 48hr 科瑪嘉李氏菌顯色培養(yǎng)基 TSAYE分純 35℃ 24hr48hr 35℃ 24hr 過氧化氫酶試驗、革蘭氏染色、溶血試驗、糖發(fā)酵試驗（木糖、鼠李糖） API Listeria 35℃ 2448hr 報告結果 35℃ 1824hr 方法名稱 一次增菌 二次增菌 分離 鑒定 快速方法 SN 0184 1993 加工 MBP 30℃ ， 1824h EB 30℃ ， 24/48h MMA/ OXA （ 35℃ ， 2448h） 藍色菌落；典型運動；過氧化氫酶；革蘭氏染色；溶血試驗；尿素酶試驗；硝酸鹽還原； MRVP；三糖鐵；糖發(fā)酵；動力試驗；協(xié)同溶血 *；血清學檢驗 *；小鼠毒力試驗 * 無 未加工 EB （ 30℃ ， 24/48h） GB/T 2020 EB （ 30177。 1℃ ， 48h） MMA （ 30177。 1℃ ， 2448h） 藍色菌落；三糖鐵；動力試驗；染色鏡檢（革蘭氏染色、典型運動）；生化特性（溶血反應、硝酸鹽還原、尿素酶、 MRVP、糖發(fā)酵）；小鼠毒力試驗；協(xié)同溶血 無 LB1 （ 30177。 1℃ ，24h） LB2 （ 30177。 1℃ ，24h） FDA BLEB+Phy （ 30℃ ， 4h） BLEB+Phy+三種抑菌劑 （ 30℃ ，20/44h） O
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