cr技術(shù)培訓(xùn)講座ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-06 14:16 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ， PCR的靈敏度可達(dá) 3個(gè) RFU(空斑形成單位 )；在細(xì)菌學(xué)中最小檢出率為 3個(gè)細(xì)菌。 ? 簡(jiǎn)便、快速 PCR反應(yīng)用耐高溫的 Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在 DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性 退火 延伸反應(yīng)，一般在 2～ 4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。 ? 對(duì)標(biāo)本的純度要求低 不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞， DNA 粗制品及 RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活組織等 DNA擴(kuò)增檢測(cè)。 熒光 PCRTB檢測(cè)試劑盒的生產(chǎn)工藝流程 裝入海 棉墊中 包裝 成品 裂解液 DNA提取液 Taq酶 dNTP buffer 石蠟油 內(nèi)參照引物 1， 2 PCR反應(yīng)液 結(jié)核桿菌陽(yáng)性質(zhì)粒 強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照 超純水 陰性對(duì)照 PCR增強(qiáng)劑 貼標(biāo)簽 貼標(biāo)簽 貼標(biāo)簽 分裝 分裝 結(jié)核桿菌陽(yáng)性質(zhì)粒 弱陽(yáng)性對(duì)照 貼標(biāo)簽 稀釋 ， 分裝 內(nèi)參照探針 貼標(biāo)簽 MgCl2 貼標(biāo)簽 玻璃珠 固形物 貼標(biāo)簽 內(nèi)參照模板 結(jié)核引物 1， 2 結(jié)核探針 試劑盒檢測(cè)操作方法 所有用于臨床診斷的 PCR檢測(cè)均 應(yīng)在衛(wèi)生部批準(zhǔn)的臨床基因診斷實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行 ? 核酸分離提取 ? 試劑配制 ? 擴(kuò)增及檢測(cè) 實(shí)時(shí)熒光 PCR結(jié)果判讀 熒光 PCR試劑盒檢測(cè)結(jié)果 組別 涂片 培養(yǎng) 即時(shí)熒光 PCR 例數(shù) 百分率 (﹪) 肺結(jié)核 + + + 56/178 31． 5 + + 6/178 3． 4 + + 6/178 3． 4 + 32/178 18． 0 78/178 43． 8 對(duì)照組 + + 2/37 5． 4 + 1/37 2． 7 34/37 91． 9 3種方法檢測(cè)痰標(biāo)本結(jié)果 GAPDH A B ?CT = CT her2 /neu CT GADPH HER2/NEU 熒光域值（ threshold）的設(shè)定 PCR反應(yīng)管的前 15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào)，熒光域值是 PCR315個(gè)循環(huán)熒光信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)差的 10倍，即：threshold=10 sd 定在 PCR擴(kuò)增的指數(shù)期。 菌種 即時(shí)熒光 PCR檢測(cè) 百日咳菌 — 大腸桿菌 — 布氏桿菌 — 肺炎球菌 — 堪薩斯分支桿菌 — 海分支桿菌 — 猿猴分支桿菌 — 鳥分支桿菌 — 胞內(nèi)分支桿菌 — 草分支桿菌 — 戈登氏分支桿菌 — 母牛分支桿菌 — 偶發(fā)分支桿菌 — 恥垢分支桿菌 — 龜膿腫分支桿菌 — 龜膿腫亞分支桿菌 — 結(jié)核桿菌 + 結(jié)核桿菌的特異性檢測(cè)
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1